超螺旋DNA的碱变构研究

对超螺旋ＤＮＡ（ＤＮＡⅠ）的碱处理产物进行了琼脂糖凝胶电泳，氯化铯－溴化乙锭密度梯度超离心分析，紫外吸收光谱分析和电镜观察。实验结果表明超螺旋ＤＮＡ在碱性环境中的结构改变发生在很窄的ｐＨ范围内（ｐＨ１２．８８─１３．００）．超过ｐＨ临界点的超螺旋ＤＮＡ碱变构产物紫外吸收高于同浓度天然ＤＮＡ紫外吸收的２９％。变构产物在ＣｓＣｌ－ＥＢ密度梯度超离心中的高密度区形成稳定的区带．用透射电镜的观察表明碱变构的超螺旋ｐＢＲ３２２ＤＮＡ具有高电子密度并呈中空颗粒状，以上事实表明，ＤＮＡ在高ｐＨ下可产生一种结构有序的相对稳定的产物．这些结果意味着在碱处理过程中，超螺旋ＤＮＡ在构象上发生了改变，使其分子由扭曲线形变成球形颗粒状。根据实验事实本文对超螺旋ＤＮＡ的碱变构产物（ＤＮＡⅣ）提出一个新的结构模型──压缩模型。这个模型能更合理地解释一些实验现象。

胰岛素样生长因子-Ⅰ在神经前体细胞中抗凋亡的作用

目的探讨胰岛素样生长因子-I(insulin-like growth factor I,IGF-I)对神经前体细胞抗凋亡的影响。方法以大鼠神经前体细胞(即Ge6细胞)为研究对象,体外培养Ge6细胞,在培养基中加入含IGF-I 10ng/mL为实验组,不加IGF-I为对照组,分别继续培养2d、4d、6d,定量实时逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测IGF-I对Ge6细胞caspase-3mRNA表达的影响。采用细胞免疫荧光染色观察各组细胞caspase-3蛋白的阳性表达率。结果 qRT-PCR结果显示,实验组Ge6细胞caspase-3mRNA的表达较对照组低,实验组培养4d(2.007±0.297)和6d(1.194±0.244)与对照组培养4d(5.530±1.027)和6d(5.371±0.513)的差异有统计学意义(P均<0.05)。细胞荧光染色表明培养2d、4d、6d实验组Ge6细胞caspase-3蛋白的阳性表达率较对照组减少,实验组培养4d(3.5%±0.2%)和6d(5.1%±0.1%)与对照组培养4d(7.0%±0.5%)和6d(7.4%±0.4%)caspase-3蛋白的阳性表达率的差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 IGF-I对神经前体细胞具有抗凋亡作用。

γ-分泌酶抑制剂DAPT对神经前体细胞系分化的作用研究

本研究目的为探究γ-分泌酶抑制剂DAPT(3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S苯基甘氨酸t-丁酯)对神经元前体细胞系分化的影响,检验经DAPT诱导产生更多可用于移植的神经元的可能性。培养神经元前体细胞系GE6时,以培养基中加入4μmol/L DAPT的为实验组,不加DAPT的为对照组,分化4d,采用免疫荧光染色的方法分别检测两组细胞Tuj1、GFAP、O4的阳性率,采用qRT-PCR分别检测两组细胞Tuj1mRNA、GFAP mRNA相对表达量。免疫荧光染色表明实验组Tuj1阳性率较对照组增加,而GFAP和O4的阳性率较对照组减少,这些差异均有统计学意义(P<0.05)。qRT-PCR中两组Tuj1和GFAP mRNA的变化趋势与免疫荧光染色结果一致。结果提示DAPT能促进神经元前体细胞系向神经元分化,抑制其向胶质细胞分化,可以用DAPT诱导产生更多的可用于移植的神经元。

Cxcr7受体在中间神经元迁移中的新功能

中间神经元主要的一类是GABAergic抑制性神经元，可以和glutamatergic兴奋性神经元形成突触，在大脑调节它们的功能。在小鼠发育过程中，GABAergic抑制性神经元主要起源于前脑的腹面，然后沿切面迁移（tangential migration）到发育中的前脑皮层。从腹面来源的中间神经元和它们的前体细胞表达Dlx转录因子，

人为什么聪明——“悬空”放射状胶质神经干细胞的发现

Arnold R.Kriegstein实验室向来以动态细胞成像（Time-lapse imaging）技术为专长。此前已利用此技术发表数篇颇具影响力的文章,并在2001年与其他实验室同时提供证据表明,一直被认为是放射状胶质细胞（Radial glia）可以产生神经元,并且是在神经发育中的神经干细胞,

中间神经元前体细胞株GE6在不同分化条件下小RNA的表达

本研究通过分析小RNA(microRNAs)在大鼠大脑中间神经元前体细胞株GE6体外分化中的表达,筛选出在中间神经元前体细胞系分化成熟过程中特异性表达的小RNA,并预测分析其可能在此过程中的功能。实验中,将GE6在三种不同条件下培养,即:不加入任何其他生长因子,正常分化培养4天的GE6(Ge6_4d);加入骨形态发生蛋白-2(BMP2)后分化培养4天的GE6(Ge6_bmp2);以及加入音猥因子(SHH)后分化培养4天的GE6(Ge6_shh)。设阴性对照组为未分化的GE6(Ge6_u)。四组GE6细胞进行细胞免疫荧光染色、qRT-PCR以及小RNA芯片检测分析。通过四组细胞的两两比较、筛选及分析发现,多种小RNA在GE6细胞的分化过程中含量有明显变化。miR-710、miR-290-5p和miR-3473等在加入分泌因子BMP2的GE6细胞中含量显著上调。这些小RNA可能对大鼠中间神经元分化起到重要的调控作用。