富氢水协同金复康口服液阻断硫代乙酰胺诱发大鼠胆管癌上皮癌变的实验研究

目的观察富氢水、中成药(金复康口服液)或两者协同干预对胆管癌成瘤的影响。方法实验分为四组:对照组(n=10),富氢水组(n=10),金复康口服液组(n=5)和富氢水+金复康口服液组(n=5)。对照组予以成年SD雄性大鼠自由饮用含有硫代乙酰胺(300mg/L)水,实验组在饮用含硫代乙酰胺水的同时,分别经胃灌注适量富氢水、金复康口服液、富氢水+金复康口服液,20周处死所有大鼠,肉眼和显微镜下观察肝成瘤情况。结果9只可评价对照组大鼠在第20周时均形成肉眼以及镜下可见的肿瘤100%(9/9),而富氢水干预组7只大鼠可评价,肝肿瘤发生率为57.1%(4/7),金复康口服液干预组大鼠肝内肿瘤的成瘤率为40%(2/5),富氢水联合金复康口服液干预组大鼠肝内成瘤率为0(0/5)。结论富氢水+金复康口服液的协同作用能够成功阻断大鼠肝内胆管癌的发生。

ANXA4和ANXA6在肝门部胆管癌中的表达及临床意义

目的探讨膜联蛋白A4(ANXA4)和膜联蛋白A6(ANXA6)在肝门部胆管癌(HC)组织中的表达及两者与HC临床病理特征和预后的关系。方法采用组织芯片与免疫组织化学技术检测2005年至2007年49例HC组织及10例癌旁组织中ANXA4和ANXA6的表达情况,分析两者表达与HC临床病理特征及预后的关系。结果 ANXA4和ANXA6在HC组织中的阳性表达率分别为63.3%(31/49)和69.4%(34/49),明显高于癌旁组织的20.0%(2/10)和30.0%(3/10),差异均有统计学意义(P<0.05)。ANXA4蛋白表达与淋巴结转移有关(P<0.05),ANXA6表达则与肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05)。ANXA4阳性表达者的中位总生存时间(OS)和无进展生存时间(PFS)分别为14个月和12个月,明显短于阴性表达者的46个月和39个月(P<0.05);ANXA6阳性表达者的中位OS和PFS分别为14个月和12个月,明显短于阴性表达者的42个月和39个月(P<0.05)。Cox多因素分析显示,ANXA6、浸润深度是影响OS的独立因素,浸润深度是影响PFS的独立因素。结论 ANXA4和ANXA6与HC的发生、发展有关,且ANXA6是潜在的评估预后的肿瘤标志物。

阿司匹林中断硫代乙酰胺诱发大鼠胆管上皮癌变

目的构建胆管癌原位诱导大鼠模型,应用阿司匹林干预该模型,观察阿司匹林对胆管癌的影响。方法给予SD雄性大鼠饮用含有硫代乙酰胺(300 mg/L)的饮用水,第8、12、16和20周时H-E染色分别观察肝脏成瘤情况,采用免疫组化法检测碳酸酐酶2(CA-2)在肝脏组织中的表达。另选取SD雄性大鼠,在硫代乙酰胺饲养12周后开始用阿司匹林处理,第3、6个月取出肝脏,H-E染色观察肝脏成瘤情况,免疫组化法检测CA-2的表达变化。取胆管癌细胞QBC939,予以阿司匹林(0 mmol/L和5 mmol/L)处理,培养48 h后采用蛋白质印迹法检测细胞中CA-2的表达。结果硫代乙酰胺饲养第12周时部分大鼠肝内可见明显的纤维化;第16周时所有大鼠肝内均出现大量纤维组织增生,镜下可见肿瘤或疑似肿瘤;第20周时所有大鼠肝脏均形成肉眼和镜下可见的肿瘤。阿司匹林处理6个月后,大鼠肝内肿瘤或疑似肿瘤的发生率为28.6%(2/7),而未处理组中大鼠肝内肿瘤或疑似肿瘤的发生率为100%(7/7)。大鼠肝脏组织中CA-2的表达水平随胆管癌病情的进展逐渐升高,而阿司匹林处理后大鼠肝脏组织中CA-2的表达减弱。5 mmol/L阿司匹林处理48 h后QBC939细胞中CA-2的表达与未处理对照组相比下调(P<0.01)。结论硫代乙酰胺能成功诱导肝内胆管癌的发生,阿司匹林能阻断该过程,可用于预防肝内胆管癌。

新课标背景下初中生物教学改革的困境与路径选择

目前,我国的教学工作正在进行深化改革,生物学科作为初中学科中的重要组成部分,在新课标背景下,进行改革和创新有着重要的意义和作用。学校应该认识到生物学科的重要性,在新课标的要求下,改变传统的生物教学观念,有效培养学生的生物学习兴趣和爱好,提升学生的实际动手操作能力和创新能力。本文对初中生物教学改革的困境和路径进行了有效分析和探究。

富氢水通过减少氧化应激及上调CLDN3和SRD5A2表达改善大鼠精子活力的实验研究

目的:探讨长期饮用富氢水促进雄性大鼠精子活力的作用机制。方法:正常SD大鼠随机分为氢水组与对照组,氢水组给予每日胃内灌注富氢水(1.2 ppm)2 ml,对照组灌注等量生理盐水。9个月后各组大鼠经相应处理后,双侧附睾制备精子悬液,检测精子活力。分离睾丸组织进行HE染色、免疫组织化学SP法检测Ki67、CYBB、eNOS、CLDN3和SRD5A2等蛋白在睾丸组织中的表达。结果:氢水组大鼠精子的前向运动精子百分率[(64.3±4.7)%]明显高于对照组[(55.3±9.5)%](P<0.05)。免疫组化结果显示氢水组大鼠睾丸组织中Ki67的表达率明显高于对照组(P<0.01)。与对照组相比,氢水组睾丸组织中氧化应激相关指标CYBB明显下降(P<0.01),而eNOS明显升高(P<0.01)。氢水组中与精子发育相关指标CLDN3和SRD5A2的表达率要明显高于对照组(P<0.01,P<0.05)。结论:氢气即能够调控部分氧化应激相关指标的表达,亦能上调促进精子成熟和运动的分子的表达,这为氢气在弱精子症人群中的应用与研究提供了一定的理论依据和实验支撑。

阿伐麦布中断硫代乙酰胺诱发的大鼠胆管上皮癌变

目的探索阿伐麦布在预防化学致癌物硫代乙酰胺所致胆管上皮癌变中的作用。方法用含300 mg/L硫代乙酰胺的饮用水饲养雄性SD大鼠,3个月后停止饮用并分为两组(n=5):对照组和阿伐麦布干预组。对照组更换为普通饮用水,阿伐麦布干预组用含阿伐麦布(30 mg/kg)的饮用水灌胃饲养。干预3个月后处死所有大鼠,用H-E染色观察大鼠肝脏病变情况,用免疫组织化学染色检测大鼠肝脏病变组织中醛固酮类还原酶家族1成员C1(AKR1C1)和Ki-67的表达。用不同浓度(0、10、20μmol/L)的阿伐麦布处理胆管癌细胞QBC939,用CCK-8法检测细胞增殖能力,用qRT-PCR和蛋白质印迹分析检测QBC939细胞中AKR1C1的表达情况。结果H-E染色结果显示,对照组大鼠均形成了镜下可见的肿瘤,成瘤率为100%(5/5);阿伐麦布干预组仅1只大鼠形成了肿瘤,成瘤率为20%(1/5)。免疫组织化学染色结果显示,阿伐麦布干预组大鼠的肝脏病变组织中AKR1C1和Ki-67的表达水平均较对照组下降(P<0.05,P<0.01)。CCK-8法细胞增殖能力检测结果显示阿伐麦布能够抑制QBC939细胞的增殖。qRT-PCR和蛋白质印迹分析结果显示,经阿伐麦布干预的QBC939细胞中AKR1C1 mRNA和蛋白的表达水平均较对照组下降(P均<0.01)。结论阿伐麦布能够中断化学致癌物所致的肝内胆管癌的发生,是极具潜力的预防胆管癌的药物;AKR1C1是胆管癌潜在的治疗靶点。