检测兔出血症病毒抗体间接ELISA方法的建立

为建立检测兔出血症病毒(RHDV)抗体的间接ELISA方法,应用杆状病毒表达系统表达的RHDV VP60包被酶标板,经间接ELISA的最佳反应条件优化试验确定:抗原的包被浓度为4.62μg/ml,标准阴、阳性血清稀释度为1∶200,封闭液选用2%明胶;羊抗兔IgG最佳稀释度为1∶4 000。阻断试验、特异性试验、敏感性试验、重复性试验结果显示,该方法具有较高的特异性、敏感性和重复性。用建立的ELISA方法与血凝抑制试验对临床血清样品进行检测,结果显示,ELISA与HI检测兔血清的RHDV抗体阳性率分别为84.7%(955/1 127)和76.0%(857/1 127),符合率为91.3%。该方法的建立为检测RHDV抗体提供了一种安全、特异、敏感、快速、操作简便经济的检测方法,为兔出血症免疫监测和预防控制提供了科学的技术手段。

HPLC法测定醋酸氯己定软膏的含量

目的建立高效液相色谱法测定醋酸氯己定软膏中醋酸氯己定软膏含量的方法。方法采用Phenomenex Luna C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水(30∶70)为流动相,流速为1.0mL·min-1,检测波长为260nm。结果醋酸氯己定在16.24～162.4μg·mL-1范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率为99.06%,RSD为0.67%(n=9)。结论本方法简便、快速、结果准确,重现性好。

全省9个地市药检所对中成药香莲丸微生物限度检查结果的研讨

目的对中成药香莲丸微生物限度检查方法学验证进行比对试验以确定并建立其检查方法。方法采用常规法、培养基稀释法、薄膜过滤法对香莲丸试验菌回收率进行有效性评价,计算出试验菌的回收率,以确认所采用的方法是否适合于法制剂细菌、霉菌及酵母菌的测定。结果按中国药典2005年版对中成药香莲丸测定细菌、霉菌及酵母菌细霉菌的回收率,结果全省9个地市药检所实验室均采用消除抑菌成分的处理方法测定细菌回收率高于70%。测定霉菌及酵母菌回收率高于70%是采用常规法有1个实验室,占总实验室的11.1%,采用其他方法有8个实验室,占总实验室的88.9%。结论全省9个地市药检所对中成药香莲丸微生物限度检查方法验证比对实验,结果基本一致,建立的检查方法准确可靠,以保证检验结果的干确性。

内蒙古地区纯蒙古族人群中Hp、Gc血清型分布调查

本文采用聚丙烯酰胺凝胶园盘电泳(PAGE—disc)法,分别检测血液中Hp(结合珠蛋白)、Gc(型特异性成分)两种血清型,调查了254名内蒙古地区纯蒙古族18～25岁健康人群两种血清型Hp和Gc的表型分布及基因频率,并与其他种族人群的基因频率进行比较。根据检测结果得出Hp、Gc两种血清型在内蒙地区纯蒙族人群中的表型分布及基因频率,见表1。

高效液相色谱法测定近视康合剂中芍药苷的含量

目的测定近视康合剂中芍药苷的含量。方法采用高效液相色谱法测定。以乙腈-0.05%磷酸二氢钾溶液(30:70)为流动相,检测波长为230nm,柱温为50℃。结果芍药苷在0.300～3.000μg(r=0.9990)范围内呈良好线性关系,芍药苷的平均回收率为99.00%(RSD=2.77%,n=5)。结论方法简便,分离效果好,结果准确可靠,可以用于近视康合剂的质量控制。

内蒙古地区纯蒙古族人群中Hp与Gc血清型分布

本文采用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳(PAGE-disc)法分别检侧血液中Hp(结合珠蛋白),Gc(型特异性成分)两种血清型,调查了254名内蒙古地区纯蒙古族18～25岁健康人群的两种血清型Hp和Gc的表型分布及基因频率,并与其它种族人群的表型基因频率进行比较。

兔出血症病毒胶体金免疫层析试纸条诊断方法的建立及初步应用

为了建立一种快速、简便的兔出血症病毒(RHDV)的检测方法,用胶体金标记纯化的RHDV多克隆抗体,以杆状病毒表达系统表达的重组RHDV VP60蛋白为免疫原制备RHDV的单克隆抗体(McAb,简称单抗)A3C,将RHDV McAb和羊抗兔IgG抗体包被在硝酸纤维素膜上,分别作为检测线和质控线,经条件优化研制成RHDV免疫胶体金试纸条。该试纸条可以检出红细胞凝集试验(HA)效价为1∶10的RHDV悬液,即HA检测为阴性的样品,该试纸条检测为阳性,其敏感性高于HA;特异性试验结果显示,该试纸条不与家兔其他常见病菌发生交叉反应。应用该试纸条对127份疑似兔出血症家兔肝脏样品进行初步检测,同时用HA做平行试验,阳性符合率为100%。因此,该试纸条是一种快速、灵敏、特异的兔出血症病毒检测方法,为兔出血症的现场诊断提供了有效的方法,显示出很好的临床应用前景。

压力超负荷性心肌肥厚形成过程中细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的变化

目的探讨心血管系统压力负荷增加到心肌肥厚形成的过程中血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-β)、白介素-6(IL-6)等细胞因子的变化及意义。方法腹主动脉部分缩窄制备心肌肥厚动物模型。用鼠尾动脉测压仪测定动物不同时间点的动脉血压;用放免法检测血清TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度;用电子天平称量左心室重;计算心重指数(左心重mg/体质量g)。结果与对照组相比,实验组第3天高血压形成(P<0.01),1周后血压继续升高并稳定在一定水平(P<0.01);而心重指数在第3天未见明显差异,1周开始出现差异,此后逐渐加重,分别为(P<0.05)和(P<0.01);血清TNF-α第1周已经升高(P<0.05)、IL-1β、IL-6至第2周升高(P<0.01),且与心肌肥厚程度正相关(P<0.01)。结论细胞因子可能参与了压力超负荷性心肌肥厚的发生和发展。

医学院校开展实验室生物安全教学的探讨

随着科技进步和生物技术的迅猛发展,实验室生物安全问题已备受关注,很多院校已相继开展实验室生物安全课程。本文根据医学院校学生专业特点,结合笔者实践教学体会,从教学方法、教学内容、考核评估和教学反馈四个方面进行总结,对医学院校开展实验室生物安全课程进行探讨。

进出境皮毛加工工艺中pH和温度对杀灭病原微生物的影响

以枯草芽胞杆菌 (40 0 1株 )作为试验菌株 ,对其在不同pH条件下以及在进境原羊毛、禽类羽毛、皮张等动物产品加工过程 (pH和温度 )中的存活情况等进行测试。试验结果表明 :(1 )枯草芽胞杆菌对酸性敏感、对碱性不敏感 ;(2 )进境浸酸羊皮不能分离到任何细菌 ;(3)枯草芽胞杆菌在洗羊毛过程中不能被完全杀灭 ,但在进境禽类羽毛洗涤过程中和出境猪鬃加工过程中被完全被杀灭 ;(4)在进境牛皮、猪皮、羊皮、兔皮加工过程中 ,因工艺 (主要考虑pH和温度 )的不同 ,其被杀灭情况也不完全相同。这充分说明加强进境皮毛生产、加工、存放过程的检疫监管工作 ,各定点企业做好进境皮毛生产、加工、存放过程的防疫工作的必要性和重要性。并可进一步通过改进加工工艺达到健康、卫生。

不同动物源新城疫病毒感染不同种属细胞的病变观察

用10株不同动物源的新城疫病毒F48E8,LaSota、LaSota-GFP、ZJ1、ZJ1-GFP、JS-4-05-Go、GX-1-05-Ch、JS-1-07-Os、JS-1-07-Du、JS-1-07-Pi等毒株分别感染鸡胚、鹅胚、鸭胚成纤维细胞、PK-15、Dulac、FK81、MDCK、Vero、Hela多种不同动物来源的传代细胞系,通过对病毒感染细胞后病变的观察、ZJ1-GFP及LaSota-GFP两个病毒感染细胞后细胞中绿色荧光蛋白指示的病变,了解不同的毒株对不同细胞感染性的差别。结果表明,不同毒力、不同动物源的新城疫病毒致不同种属细胞病变的作用不同,产生病变的时间有差异,强毒F48E8等毒株感染细胞后48～72h可以引起几种禽源成纤维细胞全部裂解,而哺乳动物来源的细胞在60～120h细胞发生病变,且病变也不如禽源成纤维细胞严重,出现了细胞的圆缩。弱毒株在胰酶处理后感染细胞,72h以后出现明显细胞病变,引起的哺乳动物细胞病变不明显。受试毒株的动物种属来源与细胞的致病性没有明显相关性。

用废纸浆制备的缓蚀缓冲纤维材料的性能研究

本文研究了以二环已胺分别和淀粉胶、聚乙烯醇、脲醛树脂组成的三种缓蚀粘合剂的稳定性及缓蚀性能 ,研究了用废纸浆为原料 ,分别加入三种不同的缓蚀粘合剂制成的废纸浆纤维缓蚀缓冲材料的缓蚀性能和机械性能。研究结果表明 :缓蚀聚乙烯醇粘合剂的稳定性最好 ,缓蚀淀粉粘合剂稳性次之 ,缓蚀脲醛粘合剂的稳定性最差 ;缓蚀脲醛粘合剂以及以其制成的废纸浆缓蚀缓冲纤维材料的缓蚀效果最好 ,缓蚀淀粉粘合剂及其制成的纤维材料缓蚀效果次之 ,缓蚀聚乙烯醇粘合剂缓蚀效果最差 ,其主要原因是由于聚乙烯醇粘合剂成膜后的透气性最差 ,降低了气相缓蚀剂的挥发 ,从而降低了缓蚀效果。气相缓蚀剂的加入对废纸浆缓蚀缓冲材料的抗压强度影响较小。

发达国家畜禽产品安全性评定准则与方法(下)

1.3卫生注册要求越来越严格 各国特别是发达国家的政府,除了加强对畜禽产品的安全卫生项目中疫病、残留、品质等实施抽检外,同时又要求对出口国的企业进行审核注册,由出口国的主管部门向其推荐出口肉类的企业名单,经进口国主管部门检查、审核、批准后,方可对其出口畜禽产品.

天麻及其伪品的比较鉴别

中药材天麻,别名:明天麻、赤箭,性平味甘,有平肝熄风之功效,用于治疗头痛眩晕、肢体麻木、小儿惊风、癫痫抽搐、破伤风等症.根据现代药理学研究表明,天麻的水煎液有明显的抗惊厥作用[1],故民间常以单方治疗头痛、头晕目眩等症.……

一株鸵鸟胚源新城疫病毒生物学特征和遗传发生分析

从死亡的鸵鸟胚胎中分离到1株新城疫病毒毒株,经毒力检测为强毒株,鸡胚平均死亡时间为45h,IVPI为2.90,IPCI为1.88。RT-PCR扩增出融合蛋白(F)基因,测定核苷酸序列并进行遗传发生分析和酶切位点分析。对基因编码的氨基酸序列进行了推导,该毒株的蛋白酶裂解激活位点附近的氨基酸序列为112R(K)RQKR↓F117,为强毒特征序列,然而该毒株并未引起该鸵鸟群发病。根据绘制的系统进化发生树和F基因上3种限制性内切酶(RE)位点分布,确定该毒株均为基因Ⅶ型。该病毒与在我国鸡群、鹅群同期流行的毒株有很高的同源性。

胰腺癌胰腺炎CD44V6,RB,C-myc基因检测分析

目的 :通过CD44V6 ,RB ,C myc基因表达 ,探讨三种基因蛋白对胰腺肿瘤的发生及预后的影响。 方法 :采用免疫组化S P法。结果 :RB基因胰腺癌表达率为 35 .0 % ,胰腺炎为 80 % ;C myc胰腺癌表达率为 5 0 6 % ,胰腺炎为 0 % ,和癌比较有统计意义 (P <0 0 5 ) ;CD44V6在胰腺癌中表达率为 6 8 2 % ,胰腺炎为 2 0 0 % ,有组间差异 (P <0 0 5 )。结论 :CD44V6 ,C myc参与胰腺癌的发生过程 。