阴道加德纳菌对细菌性阴道病的病原学诊断评价

目的 探讨阴道加德纳菌对细菌性阴道病(BV)的病原学诊断价值。方法 对237例妇科门诊生殖道感染患者,采集阴道分泌物标本,用直接涂片染色、细菌分离培养、PCR和 BV试验等 4 种方法,检测阴道加德纳菌和细菌性阴道病;BV诊断按照 Amsel金标准分组:BV组 174 例,非 BV组 63 例;另设对照组 40 例为健康体检妇女。结果 BV组174例直接涂片(线索细胞)、细菌培养、PCR和BV试验等4种方法阳性检出率分别为30.5%、51.1%、78.2%和89.7%;63例非BV组,阳性检出率分别为 6.3%、9.5%、11.1%和 28.6%,2 组比较经统计学分析,P值均<0.05,差异有显著性;40例健康对照组,只有PCR阳性检出率为12.5%,余均为阴性;23株 GV药敏试验结果甲硝唑敏感2株,替硝唑敏感3株,罗红霉素敏感3株,阿奇霉素敏感4株,克林霉素敏感 1 株。结论阴道加德纳菌在细菌性阴道病中占有主导作用,是细菌性阴道病的重要致病菌之一;BV诊断试验快速、敏感,适用于BV筛查;涂片染色检测线索细胞简单、易行,且可同时进行真菌、淋菌等检测;细菌分离培养是阴道加德纳菌鉴定的金标准。

单克隆抗体ELISA法快速诊断疱疹性脑炎

本文用单纯疱疹病毒单克隆抗体（ＨＳＶ－ＭｃＡｂ）ＥＬＩＳＡ法检测了１２８例病毒性脑炎患儿脑脊液中ＨＳＶ特异性抗原（ＨＳＶ—Ａｇ），２０例其他神经系统疾患也作了测定，３２例脑炎患儿同时取脑脊液和血清作ＨＳＶ—ＩｇＧ抗体水平测定比较，病毒性脑炎患儿的ＨＳＶ－Ａｇ阳性检出率为１９．５％，与血清／脑脊液的ＨＳＶ－ＩｇＧ测定比较，敏感性８４．６％，特异性９４．７％。用ＥＬＩＳＡ法检测脑脊液中ＨＳＶ－Ａｇ是一种简便、快速、敏感、特异的方法，对疱疹性脑炎具有早期诊断价值。

单纯疱疹病毒感染与宫颈癌

我们采集了临床诊断为宫颈癌患者的宫颈病变组织。用ELISA法作了HSV—Ag检测和病理切片检查,以探讨宫颈癌与HSV感染的关系。材料和方法一、标本来源:1990年8月～1991年1月在山西省肿瘤医院妇科门诊。

用单克隆抗体酶联免疫法检测临床标本中单纯疱疹病毒抗原

本文报告在太原市6所医院从各类感染性疾病中采取各种临床标本2067份,正常妇女阴道分泌物72份,用ELISA法快速分型检测单纯疱疹病毒抗原(HSV-Ag),总阳性率为24.5％,其中HSV-1占4.4％,HSV-2占20.1％;正常对照总阳性率为7.0％,HSV-1占1.4％,HSV-2占5.6％。HSV-Ag阳性率和型分布因感染部位而不同:肺部感染以HSV-1居多,生殖器疱疹、疱疹性脑炎、宫颈癌和胎儿畸型均以HSV-2为主。

弓形体感染小鼠试验及基因快速诊断

为建立检测弓形体基因(Tox-DNA)的PCR快速诊断法.采用10只感染弓形体小鼠试验剖检取得的各脏器活检组织标本,32例畸形胎儿的脑、肺、肝、胎盘标本,29例正常产妇胎盘标本,及177例孕产妇和其它传染病人血液标本,用PCR法作了Tox-DNA测定.结果10只感染弓形体小鼠的脑、心、肺、肝、脾、肾、小肠、子宫/睾丸,腹水中均检出Tox-DNA.32例畸形胎儿的脑、肺、肝、胎盘中检出Tox-DNA 10例,阳性率31.25%,29例正常产妇胎盘对照Tox-DNA阳性1例,阳性率3.4%,两者比较差异有显著性,P<0.005.177例孕产妇及其它传染病人Tox-DNA阳性7例,阳性率3.95%.结论:小鼠感染弓形体可通过血液和淋巴侵犯各个脏器组织,引起病理性损害;孕产妇感染弓形体是致胎儿畸形的一个重要因素;PCR检测临床标本中Tox-DNA具有简便、快速、敏感、特异之优点,可用于弓形体病的早期诊断.

变应性鼻炎鼻粘膜P物质受体的研究

目的探讨Ｐ物质受体（ｓｕｂｓｔａｎｃｅＰｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＳＰＲ）在变应性鼻炎发病中的作用。方法选健康大鼠２０只，雌雄不拘，随机分为实验组和对照组各１０只。实验组用卵清蛋白腹腔注射免疫，继之鼻局部免疫建立大鼠变应性鼻炎模型，取该模型和健康对照组动物的鼻粘膜行常规ＨＥ染色及免疫组化染色，以观察ＳＰＲ在鼻粘膜中的分布、密度及其在该模型中的动态变化。结果ＳＰＲ广泛分布于健康鼻粘膜上皮细胞、血管内皮细胞、腺细胞及导管、肥大细胞、嗜酸粒细胞、浆细胞和其它单核细胞。变应性鼻炎鼻粘膜中上述部位ＳＰＲ染色加深，阳性颗粒增多，密度增强，同时ＳＰＲ阳性细胞数量增多。结论变应性鼻炎鼻粘膜中ＳＰＲ表达增多。

医学独立实验室践行20年之浅析

通过分析医学独立实验室发展20年面临的政策、市场、医院需求变化,阐述医学独立实验室在20年间,对医院临床学科的发展、诊疗水平的提高和为政府提供服务方面起到积极的促进作用。同时分析了在新医改和互联网时代,医学独立实验室发展面临的机遇,为实现医学独立实验室与医院合作发展以及健康服务业良性发展探索可行之路。

宫颈癌患者病毒感染及其细胞因子水平变化的调查研究

用PCR和ELISA技术对195例宫颈癌和75例宫颈良性疾病患者组织标本进行病毒病原体和血清SIL2R、TNF的测定。结果宫颈癌患者组织中HPV16、18、35型检出率为31.79%(62/195);HSVⅡ为30.77%(60/195);HCMV为3.08%(6/195),均高于良性疾病患者的20%、4.0%、6.6%和0,经χ2检验差异显著,均P<0.01。而HPV6.11型、EBV、Uu及CT的检出率在良恶性两组之间比较,差异无显著性,均P>0.05。宫颈癌患者血清SIL2R和TNF水平明显高于良性疾病组,且宫颈癌病毒感染阳性者血清SIL-2R和TNF水平明显高于阴性者,经统计学处理差异显著,均P<0.01。结论HPV16、18、35型、HSVⅡ和HCMV合并感染及血清中TNF和SILIR水平明显升高,可能是山西地区宫颈癌高发的一个重要因素。

噬菌体展示免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库的构建

目的:构建由免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合的噬菌体展示文库,为应用各种类型免疫球蛋白对该文库进行体外分子进化筛选研究打下基础。方法:PCR扩增制备分别编码Protein A 的A、D结构域、Protein G的B2 结构域和Pro tein L的B3结构域的序列片段,片段两端引入XbaⅠ酶切位点,3′端引入分别编码0、1、2、3个氨基酸大小随机连接肽的序列,并克隆于pMD 18T载体构建重组质粒。以上述16种重组质粒为模板,PCR扩增分别制备各种单结构域片段及两端部分T载体序列,XbaⅠ酶切,各种酶切片段混合后连接,并克隆于噬菌体展示载体pCANTAB5S,构建噬菌体展示免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库,挑取单克隆进行序列测定,评价文库的随机性。结果:噬菌体展示免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库库容量为2×107,滴度为1.3×1011;文库中含77%以上的阳性克隆,其中由2个以上单结构域组成的阳性克隆占24%;序列分析显示组合文库包含上述4种单结构域序列,连接方式符合随机连接的特点,随机连接肽的编码核酸也呈随机分布。结论:成功构建了免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库,该文库库容、多样性和随机性完全可满足进行体外分子进化研究的要求。

临床标本军团菌分离方法研究

目的建立临床痰液标本军团菌分离培养标准检验方法,提高培养阳性率。方法采集50例新鲜痰液标本分为两组,一组直接预处理后进行培养,另一组加入标准菌株后再预处理及培养。预处理采用液化处理,然后分别采用直接接种、酸处理或热处理后再接种军团菌选择性BCYEα-DGVPC培养基,观察菌落生长情况。根据军团菌生长缓慢及菌落形态和在缺乏L-半胱氨酸的平板、血平板上不生长的特点作初步判断、生化反应及PCR法确证。结果 50例未加菌的痰液均未分离出军团菌;50例加有军团菌的模拟痰标本直接接种的检出率为58%,其中酸处理的标本检出率为70%,热处理的标本检出率为66%。3种培养方法进行比较,单独的热处理与直接处理相比较差异有统计学意义(P=0.261),单独的酸处理与直接处理相比较差异有统计学意义(P=0.003),而酸处理和热处理培养阳性结果比较并不具有一致性。结论酸处理和热处理2种方法均可以提高军团菌检出率,其中酸处理可以显著提高军团菌检出率。

产AmpC酶鲍曼不动杆菌的耐药表型及基因型分析

目的通过对鲍曼不动杆菌产AmpCβ-内酰胺酶的耐药表型及基因型分析,研究其耐药特征和流行趋势。方法收集2010年1月至10月两所综合性医院临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌63株,采用琼脂扩散法进行药物敏感试验,采用聚合酶链反应检测AmpC酶。结果 63株鲍曼不动杆菌耐头孢西丁61株(96.8%),而且对临床其他常用抗生素的耐药率也非常高,均在90%以上(除亚胺培南,美罗培南,米诺环素,阿米卡星,头孢哌酮/舒巴坦,替卡西林/棒酸),表现为多重耐药,其中对米诺环素的敏感率最高为56%,头孢哌酮/舒巴坦位列第二为41.3%。所测63株鲍曼不动杆菌中AmpC酶阳性率为67%。结论鲍曼不动杆菌多重耐药有蔓延趋势,出现1株对临床现有抗生素全部耐药的菌株。AmpC酶在鲍曼不动杆菌的耐药机制中起重要作用,其携带率为67%。米诺环素和头孢哌酮/舒巴坦是目前本地区最为有效的抗菌药物。

副溶血弧菌的致病性及检测方法

副溶血弧菌是沿海地区的一种嗜盐性细菌,其生长快,繁殖速度高,常通过感染多种海产品而引发人的食物中毒发生,近年来,由副溶血弧菌引起的食源性疾病日益增多,到目前为止,O3:K6型副溶血弧菌菌株已引起了亚洲、欧洲、美洲、非洲等多个国家的大流行。随着由副溶血弧菌引起疾病的规模不断增加和频发,人们对其也更加关注,各种检测方法逐渐取代传统的生化鉴定实验,尤其是在食品微生物检测、流行病学调查以及医院感染监控等方面发挥越来越重要的作用。本文就副溶血弧菌的基础特性,致病性及目前的检测方法作一综述。

大肠埃希菌AmpC酶的临床实验室检测与报告

目的探讨致病大肠埃希菌AmpC酶的临床实验室检测方法,为临床合理使用抗生素提供科学依据。方法将纸片扩散法药敏试验中对头孢西丁中介或耐药的菌株采用三维试验和聚合酶链反应(PCR)基因扩增对AmpC酶进行确证试验。结果临床分离筛选的10株耐头孢西丁大肠埃希菌中采用三维试验和PCR基因扩增后1株被确证为AmpC酶菌株。结论耐头孢西丁的革兰阴性菌需要作AmpC酶试验或PCR基因扩增进行确证,准确AmpC酶检测结果对临床合理使用抗生素具有积极意义。

16S rRNA基因突变致淋球菌对大观霉素耐药研究

目的探讨山西地区淋球菌流行株对大观霉素的耐药性及耐药机制。方法采用琼脂稀释法检测淋球菌对大观霉素的耐药性,用PCR和DNA测序及序列比较检测耐大观霉素菌株的16S rRNA基因突变。结果 2株大观霉素耐药菌株和3株中敏菌株株均存在16S rRNA基因突变,突变形式主要是均在991位发生了单位点突变,由A(腺嘌呤)突变为G(鸟嘌呤)。结论大观霉素仍为山西地区治疗淋病的首选药物,淋球菌16S rRNA基因突变在大观霉素耐药中可能起着重要作用。

宫颈癌与HPV16和18及VEGF和TGF-β_1关系的探讨

目的 :探讨HPV16、18,VEGF、TGF β1与宫颈鳞癌的发生、发展的关系。方法 :99例宫颈癌患者及 5 4例对照组取患者宫颈分泌物 ,使用荧光基因定量PCR法检测HPV16、18,取宫颈癌组Ⅰ、Ⅱ期HPV16、18阳性患者的鳞癌组织用免疫组化方法进行VEGF、TGF β1检测 ,结果 :宫颈癌组HPV16、18水平明显高于对照组 ,且差异有统计学意义 ,P <0 0 5 ;淋巴结转移组中HPV阳性表达高于HPV阴性表达 ,且差异无统计学意义 ,P >0 0 5 ;VEGF、TGF β1在宫颈鳞癌Ⅰ、Ⅱ期表达呈增高趋势 ,组间比较差异无统计学意义 ,P>0 0 5。结论 :HPV16、18可能为宫颈癌的主要危险因素 ,HPV上调VEGF、TGF β1启动子的活性 ,VEGF可促进肿瘤细胞的增生与转移 ;TGF β1可能与机体免疫功能降低及肿瘤细胞免疫逃逸有关。

ELISA检测妇女生殖器疱疹中单纯疱疹病毒型特异性抗原的研究

用抗HSV型共同性McAb和抗HSV-2型特异性McAb包被微板,建立了能检测妇女生殖器疤疹的宫颈或阴道棉拭标本中HSV抗原,并可分型的ELISA。经与病毒分离和中和试验分型对照研究,证明本法快速、敏感、特异,分型准确可靠,可用于大规模现场普查。用本法分型检测了宫颈糜烂、霉菌性阴道炎、淋病和滴虫性阴道炎标本中的HSV抗原,结果提示上述疾病均可感染或并发感染HSV,其中以HSV-2感染为主,占24.51％,HSV-1感染次之,占6.94％。宫颈糜烂的程度与HSV阳性检出率呈正相关。淋病患者并发HSV感染的机会更多,其中HSV-1感染较其它疾病多见。故预防HSV性传播和产道感染给新生儿,应得到高度重视。