Pluronic F-127-胰蛋白酶混合凝胶提高静脉桥血管腺相关病毒感染效率的研究

目的·探讨应用pluronic F-127-胰蛋白酶混合凝胶是否可以有效提高静脉桥血管中腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)的感染效率。方法·构建大鼠静脉桥血管再狭窄模型。用编码增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,Egfp)报告基因的重组AAV(AAV1、AAV6、AAV8、AAV9血清型)感染静脉桥血管,并使用pluronic F-127-胰蛋白酶混合凝胶增加病毒接触时间和改善血管壁通透性。分别在术后21d采集标本,应用冰冻切片、免疫组织化学染色和定量反转录PCR检测静脉桥血管中EGFP的表达以明确感染效率。通过测量组织拉伸强度来评估组织的结构完整性。结果·Pluronic F-127-胰蛋白酶混合凝胶能够显著提高静脉桥血管中AAV的感染效率,但并不影响静脉桥血管的组织抗拉性,且AAV6血清型相比AAV1、AAV8、AAV9血清型感染静脉桥血管的效率更高。结论·Pluronic F-127-胰蛋白酶混合凝胶涂染是一种提高静脉桥血管AAV感染效率安全有效的方法,可用于静脉桥血管再狭窄的防治研究。

Poloxamer 407-胰蛋白酶混合凝胶提高腺病毒转染移植静脉组织效率的研究

安全高效地将治疗基因导入移植静脉组织是移植静脉再狭窄基因治疗研究的重要内容。该研究探讨应用Poloxamer 407-胰蛋白酶混合凝胶局部转染提高移植静脉的腺病毒转染效率的可行性。构建大鼠移植静脉再狭窄模型,应用Poloxamer 407-胰蛋白酶混合凝胶涂染法,通过增加腺病毒载体与血管组织的接触时间以及改善血管壁的渗透性,提高移植静脉的腺病毒转染效率。分别在术后7、14、28天采集标本,应用冰冻切片、免疫组化染色和qRT-PCR检测移植静脉中EGFP的表达以评估转染效率。Poloxamer 407-胰蛋白酶混合凝胶局部转染能够显著提高移植静脉的腺病毒转染效率,其中0.25%的胰蛋白酶转染效率最佳,并且不影响移植静脉血管的组织抗拉性。Poloxamer 407-胰蛋白酶混合凝胶涂染是一种简单、安全和高效的局部基因转染方法,可用于移植静脉再狭窄的防治研究。