云南省无量山乌骨鸡传染性支气管炎和大肠杆菌混合感染的诊断

研究旨在诊断某鸡场发生混合感染的情况,对发病鸡开展临床观察、病理剖解。采集150日龄无量山乌骨鸡病料2份,采用分子生物学技术、细菌分离培养、生化鉴定、药敏试验及病理组织切片进行诊断。结果显示:乌骨鸡表现为精神沉郁、腹泻、呼吸有啰音;病理解剖发病鸡可见鼻腔及气管内有大量黏液,肺部出血瘀血,肠道鼓气,肠壁变薄内有黄色泡沫样液体。分子生物学诊断结果显示,发病鸡呈鸡传染性支气管炎阳性;细菌分离培养及生化鉴定结果显示,致病菌为大肠杆菌。药敏试验结果显示,该大肠杆菌对头孢喹肟、阿莫西林、磺胺甲恶唑、四环素、多西环素和头孢曲松钠等6种抗生素显示耐药,对新霉素显示敏感;病理组织切片结果显示,患病鸡肺部病变明显。研究表明,该鸡场内发病鸡为鸡传染性支气管炎及大肠杆菌混合感染,根据诊断结果建议用药后,该场病情得到控制。

黄芩多糖的急性和亚慢性毒性试验

为了评价黄芩多糖的急性、亚慢性毒性,试验采用小鼠进行急性经口毒性试验和亚慢性毒性试验,在急性经口毒性试验中,将40只(雌雄各半)SPF小鼠随机均分为高(5000 mg/kg)、中(2500 mg/kg)、低(1250 mg/kg)剂量组和对照组(按体重0.1 mL/10 g灌胃纯化水),每天灌胃2次,连续9 d,每天观察并记录小鼠的临床症状、体重及采食量,计算半数致死量(LD_(50));在亚慢性毒性试验中,将40只(雌雄各半)小鼠随机均分为高(2/25 LD_(50))、中(1/25 LD_(50))、低(1/50 LD_(50))剂量组和对照组(按体重0.1 mL/10 g灌胃纯化水),每天灌胃1次,连续35 d,每天观察并记录小鼠的临床症状、体重及采食量,最后1天采集小鼠血液及器官,计算脏器系数,检测血液生理生化指标及观察组织病理学变化。结果表明:黄芩多糖经口给小鼠灌胃,LD_(50)大于5000 mg/kg。根据WTO有关外源性化学物急性毒性分级标准进行评价,本药物属实际无毒。黄芩多糖各剂量组小鼠体重、采食量、脏器系数与对照组均差异不显著(P>0.05),黄芩多糖各剂量组组织器官无损伤,但雌性小鼠低、高剂量组血小板总数(PLT)极显著高于对照组(P<0.01),雄性小鼠高剂量组及雌性小鼠中、高剂量组天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性极显著高于对照组(P<0.01),其余血常规及血清生化指标与对照组均差异不显著(P>0.05)。说明黄芩多糖对小鼠无明显急性、亚慢性毒性作用,临床合理剂量用药安全可靠。

灯盏花黄酮对腹泻仔猪肠道微生物多样性影响的研究

为了研究灯盏花黄酮对腹泻仔猪肠道微生物多样性的影响,试验将20头60日龄健康仔猪分为空白组、药物组、阳性组和模型组,第1~3天除空白组外其他组仔猪按体重灌服浓度为3×10^(8) cfu/mL的沙门氏杆菌液0.5 mL/kg,第1~10天药物组仔猪按体重灌服灯盏花黄酮1 mL/kg,阳性组仔猪按体重灌服氟苯尼考1 mL/kg,空白组和模型组仔猪灌服等量的纯化水。观察仔猪临床症状,在第4,8,11天采集各组仔猪粪便进行微生物多样性分析。通过OTU序列与相应微生物数据库进行比对,得到各样本的物种聚类信息与各水平注释信息,基于聚类结果进行α多样性分析和β多样性分析,基于β多样性分析结果进行UPGMA聚类分析和Kru-Wall秩和检验分析,基于注释结果进行物种分类分析和差异物种分析。结果表明:仔猪灌服沙门氏杆菌后,出现精神沉郁、伏卧、采食和饮水减少、排黄色稀便等症状。空白组、药物组、阳性组和模型组在第4,8,11天共有的OTU数目分别为912,872,780,796条,空白组和药物组高于阳性组和模型组,在第11天空白组、药物组、阳性组和模型组特有的OTU数目分别为84,96,74,37条,药物组高于其他3组。与第4天比较,第11天药物组的Chao指数升高,而模型组下降,ACE指数变化趋势与Chao指数相同,药物组的Shannon和Simpson指数相对稳定,第8天与第4天相比模型组Simpson指数显著降低(P<0.05)。UPGMA聚类分析药物组和空白组分布相对均匀,模型组和阳性组分布相对集中。Kru-Wall秩和检验空白组和药物组菌群波动性较小,模型组菌群波动性较大。在门水平上,相对丰度最高的为厚壁菌门,其次为拟杆菌门,模型组浮霉菌门和蓝细菌相对丰度极显著高于药物组和阳性组(P<0.01),药物组互养菌门相对丰度极显著高于模型组和阳性组(P<0.01)。在属水平上,药物组普雷沃氏菌相对丰度极显著低于模型组和阳性组(P<0.01),乳酸杆菌相对丰度极显著高于阳性组和模型组(P<0.01),模型组巨型球菌相对丰度极显著高于阳性组和药物组(P<0.01),粪杆菌属相对丰度极显著低于药物组和阳性组(P<0.01)。说明灯盏花黄酮能够调节肠道菌群丰度,有利于腹泻仔猪康复,具有替代抗生素的潜力。

应用16S rDNA分析撒坝火腿表面和内部微生物多样性

为分析云南撒坝火腿中微生物的菌群构成、物种丰富度和多样性差异,以1年以上的撒坝火腿为研究对象,通过提取DNA,采用Illumina高通量测序方法对火腿表面和内部细菌的16S rDNA V3~V4区和真菌ITS2区进行扩增和测序,并对其菌落构成和多样性进行分析。结果表明:撒坝火腿中微生物菌群存在差异,细菌丰富度极显著高于真菌(P<0.01),多样性高于真菌,且内部真菌和细菌微生物多样性和丰富度均高于表面;子囊菌门下曲霉菌属是表面和内部真菌中的优势菌群,其次Yamadazyma和青霉菌属也是主要菌群,这些菌属在火腿表面的分布多于内部;厚壁菌门下葡萄球菌属是火腿表面和内部细菌中的优势菌群,色盐杆菌、酸杆菌和链球菌也是表面的主要菌群;放线菌、杆菌属、酸微菌纲及球菌属则是火腿内部的主要菌群,此外火腿内部还存在大量未知微生物。综上所述,曲霉菌和葡萄球菌是撒坝火腿表面和内部的优势菌群。

不同保存方式下土鸡肉品质及微生物变化规律的研究

为解决鸡肉运输难及保鲜期短的问题,提供最佳的鸡肉品质,研究设计真空和非真空包装,设定11个温度梯度(-30℃、-20℃、-10℃、-4℃、0℃、2℃、4℃、6℃、8℃、9℃、室温),并在第1d、2d、4d、6d进行感官检验、测定pH值、TVB-N和菌落总数。结果鸡肉的组织弹性在第4d,真空包装出现异常肉质比非真空包装少,且发生变质时间更迟,两个包装比较差异极显著(p<0.01);鸡肉色泽两个包装出现异常无显著变化;鸡肉气味第2d和4d二者差异极显著(p<0.01),第2d真空包装和非真空包装分别在室温以上和6℃以上出现异味。第4d真空包装和非真空包装分别在在室温以上和在8℃以上时为臭味。在0℃以下鸡肉组织弹性、切面色泽、气味均无明显变化;鸡肉pH保存温度在-30~2℃时,两个包装均为pH<6.7,而非真空包装在第4d、6℃时,就已经开始变质,比真空包装出现变质时间更早;鸡肉TVB-N保存温度<4℃时,两个包装均正常;鸡肉菌落总数第6d保存温度在-30~2℃两个包装均<5.7lg(CFU/g),保存温度越低,菌落总数均越小,同一温度真空包装保存低于非真空包装。可见土鸡胴体在0℃时不管是感官检验pH值、TVB-N以及菌落总数是最佳保存方式,真空包装优于非真空包装,可以使新鲜鸡肉的保存期延长至6d以上,且能保持较好的土鸡胴体品质。

一例大肠杆菌和鸡传染性支气管炎混合感染诊治

试验采用病理学解剖、细菌分离培养、生化鉴定、药敏试验和分子生物学检测,对云南省某发病鸡场的3只病鸡进行病因诊断。病理学解剖发现病鸡鼻腔和支气管黏膜出血并有黏性渗出物,肝、肾和直肠上有白色尿酸盐沉着;细菌分离培养、生化鉴定发现致病菌为大肠杆菌,药敏试验发现该大肠杆菌对庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、奈替米星、四环素和妥布霉素6种抗菌药物不敏感;分子生物学检测发现鸡传染性支气管炎病原为阳性,禽流感和新城疫病原为阴性。结果表明,鸡群发病原因为大肠杆菌和鸡传染性支气管炎的混合感染,且大肠杆菌已产生耐药性。建议该鸡场可选用环丙沙星和诺氟沙星进行治疗且必须规范使用抗菌药物,减少耐药菌群的滋生,同时做好鸡传染性支气管炎疫苗的接种工作,使鸡场健康发展。

2017-2020年云南省规模猪场常见疫病监测及分析

为了解云南省常见疫病感染状况,分析疫情趋势及可能暴发风险,本试验分别采用聚合酶链式反应(PCR)和酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法,对2017-2020年部分规模猪场12946份猪只组织和血液样品进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪O型口蹄疫病毒(FMDV)、副猪嗜血杆菌(HPS)抗原和猪瘟(CSF)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪伪狂犬病(PR)、猪圆环病毒病(PCVD)、猪O型口蹄疫(FMD)抗体检测。2017-2020年各年份抗原PCR检测结果显示:CSFV抗原阳性率分别为13.16%、12.27%、16.35%、10.29%;PRRSV分别为20.40%、30.06%、22.41%、6.09%;PRV分别为10.75%、16.99%、11.17%、20.34%;PCV2分别为59.82%、62.50%、57.14%、5.34%;PEDV分别为27.78%、20.45%、20.00%、20.00%;HPS分别为35.71%、31.82%、52.78%、62.00%。PCV2阳性率较高,其次是HPS。混合感染较严重,二重感染分别有CSFV+PCV2、CSFV+PRV、CSFV+PRRSV、PCV2+PRV、PCV2+PRRSV、PRV+PRRSV,阳性率最高分别为6.65%、2.76%、8.65%、5.26%、6.61%、4.37%。三重感染有CSF+PCV2+PRV、CSFV+PCV2+PRRSV、PCV2+PRV+PRRSV、CSFV+PRV+PRRSV,阳性率最高分别为1.40%、2.22%、2.22%、1.54%;无四重感染。抗体ELISA检测结果显示,CSF、PCVD、PRRS、FMD、PR-gB和PR-gE的阳性率最高分别为91.18%、100.00%、85.29%、97.20%、86.18%和26.50%。结果表明,云南省规模猪场常见疾病防控形势严峻复杂,需进行综合防控,并定期做好病原学和血清学检测,防止更多的混合感染出现。