DNA指纹技术在动物亲子鉴定中的应用

论述了DNA指纹技术在动物亲子鉴定中的应用.主要内容包括:利用DNA指纹技术进行亲子鉴定的原理;DNA指纹图谱法亲子鉴定的优点;DNA指纹技术在动物亲子鉴定中的应用及其前景;存在的问题.

高校青年教师教学能力培养“传帮带”模式研究——以延边大学农学院为例

'传帮带'在高校青年教师教学能力的培养中起到了至关重要的作用。近十年的'传帮带'实践证明,高校常用的单一'传帮带'模式虽然在提高青年教师教学能力方面发挥了一定作用,但是存在很大的局限性,只有建立多级'传帮带'模式的联合机制,才能整合各级各部门优势,实现'传帮带'效果最优化。

奶牛繁殖性状的育种值估计

利用北京市8个荷斯坦奶牛群的头胎繁殖性状资料,用BLUP法估计了公牛繁殖力的育种值。利用20头公牛的2299头与配母牛头胎繁殖性状资料,估计了公牛雄性繁殖力的育种值。利用19头公牛的2001头女儿的头胎繁殖性状资料,估计了公牛雌性繁殖力的育种值。分别比较了考虑场、年、季之间互作效应的和未考虑场、年、季之间互作效应的育种值估计准确性,分析了不同场、不同输精年份、不同输精月份对公牛繁殖力的影响。结果表明,考虑场、年、季之间互作效应时的准确性最高,未考虑时的准确性最低;本文中不同场、年、季水平对公牛繁殖力的影响是显著的。结论:估计公牛繁殖性能的育种值时,应事先或模型中加以剔除这些固定效应。

卓越农林人才教育培养计划下地方高校教师教学能力培养效果研究

以延边大学为例,分析了地方高校教师教学能力培养相关培训的现状和存在的问题,并提出了复合型卓越农林人才培养目标下地方高校教师教学能力培养体系的优化建议。

奶牛繁殖性状的育种值估计

[目的]奶牛繁殖性状的育种值估计及比较不同育种值估计方法的准确性。[方法]利用北京市8个黑白花奶牛群的头胎繁殖性状资料,用BLUP法估计了公牛繁殖力的育种值;利用20头公牛的2299条与配母牛头胎繁殖性状资料,估计了公牛雄性繁殖力的育种值;利用19头公牛的2001条女儿的头胎繁殖性状资料,估计了公牛雌性繁殖力的育种值。分别比较了考虑场、年、季之间互作效应的和未考虑场、年、季之间互作效应,用最小二乘法事先矫正了场、年、季效应这3种方法的育种值估计准确性。[结果]考虑场、年、季之间互作效应时的准确性最高,未考虑时的准确性最低。[结论]估计公牛繁殖性能的育种值时,应事先或模型中加以剔除这些固定效应。

教学研究型大学动物科学系教学实践基地建设探索

教学实践基地是帮助学生更好地掌握、运用所学知识的一个重要教学场所。该文从实践基地的基本情况、利用情况以及所存在的一些问题及需要改革的地方等进行了探讨。

长春花碱对鼠单卵裂球染色体标本制备的影响

为了研究长春花碱对鼠单卵裂球染色体标本制备的影响。以长春花碱为纺锤体中期阻断剂,以CZB为基础培养液,研究不同的阻断培养浓度和时间对小鼠4、8-细胞期胚胎单卵裂球中期分裂相数的影响。0.5μg/ml浓度、阻断培养10 h组的4-细胞卵裂球中期分裂相检出率最高,而只有0.5μg/ml浓度6、h组,0.1μg/ml浓度8、h组,0.3μg/ml浓度、8 h组,0.7μg/ml浓度、8 h组,0.1μg/ml浓度、10 h组和0.3μg/ml浓度1、0 h组与最高值组差异不显著;0.5μg/ml浓度、阻断培养10 h组的8-细胞卵裂球中期分裂相检出率最高,而只有0.1μg/ml浓度1、0 h组和0.7μg/ml浓度1、0 h组与最高值组差异不显著;0.1μg/ml浓度8、h阻断培养的4-细胞单卵裂球的中期分裂相的检出率与0.1μg/ml浓度1、0 h阻断培养的8-细胞单卵裂球的差异不显著,其染色体标本的制备质量评分分别为2.7和1.90为确定适宜小鼠早期胚胎单卵裂球的长春花碱处理浓度和阻断培养时间提供了科学依据。

活性氧(ROS)对小鼠早期胚胎染色体相对长度的影响

通过对小鼠体内发育的囊胚、扩张囊胚和从1-细胞期取出在CZB培养液中培养的囊胚、扩张囊胚的染色体相对长度进行统计分析,在各号染色体相对长度出现显著性差异的同时,发现体外培养的比体内发育的染色体相对长度短;体外CZB培养的不同时期添加外源性过氧化氢,发育至囊胚、扩张囊胚阶段,制作胚胎标本,观察胚胎的染色体相对长度。结果表明:不同时期添加外源性过氧化氢组比对照组的染色体相对长度短。说明经过氧化氢处理之后存活下来的胚胎染色体相对长度发生了变化。

在《动物遗传学》教学过程中的实践与体会

《动物遗传学》作为现代农业高校基础课程,在医学、环境、生物多样性等方面的应用更为广泛。遗传学知识在各个学科的扩展与延伸表现尤为重要,尤其作为畜牧专业的必修课程更是意义深远。遗传学理论具有较强的理论性及逻辑性,在教学实践中将较为抽象的理论知识应用现代课堂多样化的教学方式教学手段和网络资源,助推学生的学习积极性和主动性提高,从而达到提高教学的效率与质量的目的。

过氧化氢诱导延边奶山羊乳腺上皮细胞氧化损伤模型的建立

为了建立过氧化氢诱导延边奶山羊乳腺上皮细胞(DGMECs)氧化损伤模型,用体外培养的延边奶山羊乳腺上皮细胞传代后进行试验,用DMEM/F12培养基将H2O2稀释为5、50、100、200、500μmol/L,以DMEM/F12培养基作为空白对照组。以H2O2处理4 h后,用MTT法观察H2O2对乳腺上皮细胞活力的影响,用Hoechst33342/PI荧光染色法观察H2O2损伤对乳腺上皮细胞的促凋亡情况,DCFH-DA检测细胞内活性氧(ROS)含量。MTT活性检测结果表明,各处理组的细胞存活率与未处理组差异显著(P<0.05)。5、50、100μmol/L H2O2作用4 h后,细胞存活率分别为91.21、77.50%、54.48%;而200、500μmol/L H2O2作用4 h后,细胞存活率仅为35.53%、27.79%,乳腺上皮细胞死亡过多。Hoechst33342/PI染色结果表明,H2O2通过诱导乳腺上皮细胞的凋亡及坏死来降低细胞的存活率。利用荧光探针DCFH-DA分析DGMECs的ROS水平,结果显示,细胞经H2O2处理后会明显增加细胞内ROS水平。H2O2100μmol/L处理细胞4 h后,约导致50%的细胞死亡,坏死比例小,ROS含量也相对较少,在此浓度下,细胞还具有恢复其功能的可能性,因此选用100μmol/L H2O2处理细胞4 h来建立延边奶山羊乳腺上皮细胞氧化损伤模型。

氧化应激与胚胎的氧化还原调节

由活性氧(Reactive oxygen species,ROS)引起的氧化应激是胚胎发育受阻的主要原因之一。氧化应激能通过氧化细胞内核酸、蛋白质、脂质等生物分子而导致细胞的衰老或者死亡。在体外受精(In vitro fertilization,IVF)和胚胎体外培养等辅助生殖过程中降低氧化应激是非常重要的。在另一方面,ROS在细胞信号转导中发挥重要作用,也是细胞正常生理活动所必需的。基于ROS的这种双重作用,很难解决由其引起的氧化应激现象。本文对ROS在卵子发生和胚胎发育过程中作用机制的研究进展作一综述。

哺乳动物胚胎的活性氧来源及其抗氧化机制

活性氧(reactive oxygen species,ROS)与胚胎发育缺陷密切相关,胚胎或其培养的环境都有可能产生ROS,一些外源因子能够使胚胎的ROS产量增加,引起胚胎发育阻滞,这严重地限制了与胚胎相关的研究。胚胎存在着多种抗氧化机制,在实际操作中应结合胚胎发育各时期内部ROS的来源及其抗氧化机制,提高细胞内部抗氧化效率;控制培养条件,完善培养体系,降低外在因素对ROS的诱发作用,更高效地生产体外发育胚胎。

谷胱甘肽对卵母细胞成熟及胚胎发育影响的研究进展

体外成熟期间谷胱甘肽(Glutathione,GSH)的合成对卵母细胞及胚胎的发育有很重要的作用。GSH是属于含有巯基的、小分子肽类物质,具有抗氧化作用和整合解毒作用,GSH能激活细胞内多种酶,如巯基(-SH)酶-辅酶等,从而促进糖类、脂肪及蛋白质代谢,并能影响细胞的代谢过程。本研究就有关GSH的相关研究进行综述,探讨其在卵母细胞成熟及胚胎发育过程中的作用。

挤压去核法和盲吸去核法在延边黄牛体细胞核移植中的对比研究

分别采用挤压去核法和盲吸去核法对延边黄牛卵母细胞进行去核处理,之后进行核移植,培养观察,比较两种去核方法对延边黄牛体细胞核移植效率的影响。挤压法的操作成功率和去核率明显高于盲吸法,盲吸法操作程序耗时比挤压法长,但是差异不显著。两种方法获得了相近的卵裂率和囊胚率,但挤压法构建的重组胚在囊胚数上高于盲吸法。挤压法在延边黄牛体细胞核移植上比盲吸法更有效。

抗凋亡因子cFLIP在延边黄牛性周期黄体中表达的研究

为了研究延边黄牛黄体中抗凋亡因子(Cellular FLICE-like inhibitory protein:cFLIP)的变化情况及其与细胞凋亡的关系,本实验采用免疫染色方法,观察cFLIP在延边黄牛周期黄体中的表达变化,并从组织化学角度分析了cFLIP作为抗凋亡因子参与延边黄牛的黄体退化。

延边黄牛体细胞克隆胚胎氧化损伤的初步研究

为了优化体细胞克隆胚胎体外培养液,提高体细胞的克隆效率,以CR1aa+5%FBS+0.3%BSA为基础培养液,分别添加0、60、80、100和120μmol/LH2O2观察延边黄牛体细胞克隆胚胎的氧化损伤情况和体外发育模式,并研究1、4和7 mmol/L GSH对延边黄牛重组胚的保护作用。结果表明:(1)添加0、60、80μmol/LH2O2组卵裂率显著要高于100μmol/L和120μmol/L组(P<0.05),添加H2O2的组囊胚发育率显著低于未添加组(P<0.05);(2)随着H2O2处理浓度的升高,重组胚发育速度增加,但是发育停滞现象也更明显;(3)在培养液中添加GSH后,1 mmol/L组卵裂率显著高于7 mmol/L组(P<0.05),与0和4 mmol/L组差异不显著(P>0.05),囊胚发育率显著高于其它组(P<0.05)。可见,在体细胞克隆胚胎体外发育过程中H2O2对其具有氧化损伤作用,不利其体外发育,在培养液中添加1 mmol/L GSH对体细胞克隆胚胎的氧化损伤具有明显的保护作用。

谷氨酰胺对延边黄牛卵母细胞成熟及重组胚发育的影响

为了提高卵母细胞的成熟率及重组胚胎的发育率,在体外成熟液中添加了不同浓度的谷氨酰胺,研究谷氨酰胺对延边黄牛卵母细胞成熟的影响,并观察它对重组胚胎后续发育的影响,从中筛选出最佳的体外培养条件。结果表明,1.0 mmol/L的谷氨酰胺能够显著提高卵母细胞的成熟率,同时也能提高囊胚发育率。说明谷氨酰胺能够提高延边黄牛卵母细胞的体外成熟率,并能促进囊胚发育。

FSH和LH对延边黄牛卵母细胞体外成熟及重组胚发育的影响

实验主要研究促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)对延边黄牛卵母细胞体外成熟及重组胚发育的影响,从而提高延边黄牛体细胞克隆的效率。采集屠宰后延边黄牛卵巢,用抽吸法回收卵母细胞,然后在不同种类、浓度激素条件下进行卵母细胞的体外成熟培养,最后将成熟的卵母细胞进行核移植及重组胚的体外培养。实验分别比较了在0、5、10、15、20μg/mL条件下,单独使用FSH与LH和在15μg/mL的FSH与10μg/mL的LH共同作用下对延边黄牛卵母细胞体外成熟率、卵裂率和囊胚发育率的影响。结果表明:将卵母细胞单独置于加有浓度为15μg/mL的FSH和10μg/mL的LH的成熟液中培养,其成熟率及后期发育率优于其他浓度组(P<0.05);而2种最优浓度同时添加共同作用时要好于单独使用(P<0.05)。由试验可得出,成熟培养液中单独添加15μg/mL的FSH和单独添加10μg/mL的LH浓度对延边黄牛卵母细胞体外成熟及重组胚后期发育效果最好;使用最佳浓度进行协同作用时,其共同作用要好于单独使用的效果。

延边黄牛核移植胚胎的活性氧含量的测定

为了研究延边黄牛体细胞克隆胚胎内部的活性氧水平,以延边黄牛孤雌激活胚胎为对照,用2,′7′-二氯荧光素二乙酸酯和二氢乙锭两种染料分别对体细胞克隆胚胎进行染色,测定其内部超氧阴离子和过氧化氢含量。结果表明,2细胞期处理组间超氧阴离子水平差异不显著(P>0.05),其它细胞期体细胞克隆组均显著高于孤雌激活组(P<0.05),过氧化氢水平各细胞期体细胞克隆胚胎均显著高于孤雌激活胚胎(P<0.05)。因此,延边黄牛体细胞克隆胚胎氧化损伤水平显著高于孤雌激活胚胎。