儿童过敏性紫癜T细胞亚群的改变及糖皮质激素受体水平的变化

为了解过敏性紫癜（ＨＳＰ）患儿糖皮质激素受体（ＧＣＲ）及Ｔ细胞亚群的改变，采用放射配基结合一点分析法，测定了患儿和健康儿童（各３５ 例）的外周血Ｔ淋巴细胞亚群及ＧＣＲ。结果：患儿外周血ＣＤ＋３ ，ＣＤ＋４ 细胞及ＣＤ＋４ ／ＣＤ＋８ 细胞比值分别为４６．０３％ ±９．４０％ ，３１．０６％ ±６．８０％ 和１．２３±０．３３，淋巴细胞ＧＣＲ值为３０６０±２１５３结合位点／细胞。健康对照儿童外周血ＣＤ＋３ ，ＣＤ＋４ 细胞及ＣＤ＋４ ／ＣＤ＋８ 细胞比值分别为５３．１１％ ±５．４０％ ， ３５．０１±４．４１％ 及１．５２±０．２６，淋巴细胞ＧＣＲ为５２１０±１６３９ 结合位点／细胞。患儿的ＣＤ＋３ ，ＣＤ＋４ 及ＣＤ＋４ ／ ＣＤ＋８ 水平较健康儿童低，ＧＣＲ水平也低于对照儿童（Ｐ＜ ０．００１），提示过敏性紫癜儿童具有免疫调节紊乱，ＧＣＲ水平减少，可能在一定程度上导致了免疫调节紊乱，从而参予了过敏性紫癜的发病。

炎性细胞因子及脂多糖诱导产生的一氧化氮对人血管内皮细胞的损伤作用

目的 :探讨炎症过程诱生的一氧化氮 (NO)对内皮细胞的损伤及其作用机制。方法 :黄递酶法及Griess法检测可诱导性NO合酶 (iNOS)活性、NO-2 /NO-3 水平 ,RT -PCR技术分析iNOSmRNA的表达 ;同时观察NO产生后对内皮细胞的损伤作用。结果 :IL - 1β 2× 10 5U/L、TNF -α 5× 10 5U/L、γ -INF 2× 10 5U/L联用LPS(10mg/L)可诱导出高浓度NOS合成及NO产生 ,比单用这些细胞因子或LPS诱导的量高两倍多 ,iNOSmRNA的表达水平也显著增加 ;同时MDA及LDH释放率明显增加 ,细胞存活率下降 ,并伴随细胞受损的形态学改变。而单用上述细胞因子或LPS ,以及降低剂量或缩短处理时间 ,其诱生的NOS及NO与正常对照相比P >0 0 5 ;但MDA及LDH释放率仍增加明显。使用 2倍剂量的这些炎性细胞因子或延长处理时间到 48h ,与标准剂量及 2 4h组相比NOS和NO的增加虽不显著 ,但细胞生长受限更明显。NOS抑制剂能阻止NO的产生及其对细胞的损伤作用。结论 :炎性细胞因子及脂多糖可激活iNOS大量表达诱生高浓度的NO 。

儿童急性淋巴细胞白血病抗原错译表达的临床意义

目的 研究儿童急性淋巴细胞白血病 (ALL)抗原错译表达的临床意义。方法 对 5 4例ALL患儿的骨髓标本分别进行细胞形态学及细胞化学染色 ,确定其FAB类型 ,运用一组相关的单克隆抗体 ,采用流式细胞仪及直接免疫荧光标记技术进行免疫分型 ,采用吉姆萨G显带技术进行核型分析。结果 儿童ALL5 4例髓系抗原阳性表达率为 2 9.63 % ,其中CD13为 2 5 .93 % ,CD33为 2 0 .3 7% ,CD14 为 11.11%。T ALL和B ALL髓系抗原阳性表达差异无统计学意义 ( 3 0 .77%vs 2 9.2 7% P =0 .918)。CD34 表达阳性ALL髓系抗原阳性表达率明显高于CD34 表达阴性ALL髓系抗原阳性表达率 ( 40 .63 %vs 13 .64 % P =0 .0 3 9) ;ALL髓系抗原阳性表达与髓系抗原阴性表达的完全缓解 (CR)率差异无统计学意义 ( 81.2 5 %vs94.74% P =0 .148) ;但生存率曲线比较分析 ,ALL髓系抗原阳性表达的生存时间短 (P =0 .0 3 1)。结论 儿童ALL的抗原错译表达率为2 9.63 % ;CD34 阳性的ALL抗原错译表达率明显高于CD34 表达阴性的ALL抗原错译表达率 ;ALL髓系抗原阳性表达的生存时间短 ;

阿司匹林抗氧化作用机制的探讨

目的 探讨阿司匹林 (AS)抗氧化作用的机制。方法 观察不同浓度的 AS在抗 H2 O2 损伤内皮细胞过程中诱导铁蛋白 (Fn)表达的情况 ,以及添加外源性 Fe Cl3 和细胞内铁螯合剂去铁胺时对 AS诱导 Fn表达的影响。结果 极低剂量 (0 .1m mol/ L)的 AS即可诱导内皮细胞 Fn表达超过对照 2 5 % (P<0 .0 5 ) ,使乳酸脱氢酶(L DH)释放率减少 5 0 % ,保护 74.4%的细胞避免 H2 O2 的损伤 ,同时使氧自由基指标丙二醛明显下降。AS与 Fn表达之间表现出剂量与时间依赖关系 ,且对细胞的保护作用逐渐增强。但使用去铁胺去除细胞内游离铁能明显降低AS诱导 Fn表达的作用 ,而加入 Fe Cl3 后诱导 Fn表达的作用增强。结论 初步证实 AS的抗氧化作用是通过影响细胞内铁代谢变化 ,增加

阿司匹林对炎症条件下人血管内皮细胞一氧化氮的产生及诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的影响

目的 :探讨炎症时阿司匹林 (AS)对内皮细胞一氧化氮 (NO)的产生及诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)基因表达的抑制作用。方法 :Griess法测上清液NO-2 /NO-3 水平、黄递酶法测NOS活性、常规生化法测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛 (MDA)浓度 ,染料排除法测细胞活力 ,RT -PCR技术分析iNOSmRNA水平。结果 :白介素 (IL) - 1β、肿瘤坏死因子 (TNF) -α、γ -干扰素 (INF)联用脂多糖 (LPS)诱导后上清液中NO-2 /NO-3 由 (4 2 7± 0 75 ) μmol/L增加到(9 35± 1 2 5 ) μmol/L ,对内皮细胞造成明显的损伤。但 3mmol/LAS组NO生成及NOS活性明显降低 ,LDH释放率及MDA浓度下降 ,细胞存活率上升 ,与NO诱导组相比差异显著。并随AS剂量的增加对NO的抑制及对细胞的保护作用更加明显 ,但AS对生理水平的NO没有抑制作用。同时发现 10mmol/L浓度以下AS对iNOSmRNA表达水平没有影响 ;但 10 - 2 0mmol/L的AS则可在转录水平上抑制iNOSmRNA的表达。并观察到水杨酸钠及消炎痛不具有抑制NO产生的作用。结论 :AS具有明显抑制IL - 1β、TNF -α、γ -INF及LPS诱导NO生成的作用 ,从而保护血管内皮细胞避免炎症时高浓度NO的损伤。

细胞铁代谢变化参与阿司匹林抗氧化作用的调控机制

目的 :探讨铁蛋白 (Fn)表达及细胞内铁的变化在阿司匹林 (AS)抗氧化损伤中的调控作用。方法 :ELISA法检测不同浓度AS诱导Fn的表达 ,以及FeCl3和去铁胺对AS诱导Fn表达的影响 ;同时使用RNA -proteinbandshiftassay及RT -PCR检测AS诱导铁蛋白表达过程中铁调节蛋白 (IRP)结合活性及IRP2 mRNA水平的变化。结果 :0 1mmol/L的AS可诱导内皮细胞Fn表达超过对照 2 5 % ,随AS剂量的增大诱导Fn表达逐渐增加 ,二者间有明显的剂量依赖关系。AS诱导Fn表达后能明显增强细胞抗H2 O2 损伤的能力。但去铁胺 +AS组细胞Fn表达明显降低 ,此时IRP的结合活性却为正常的 3倍 ,IRP2 mRNA的表达水平也升高 ;而FeCl3+AS组Fn表达明显高于去铁胺组 ,但IRP的结合活性降低、IRP2 mRNA表达水平下降。结论 :阿司匹林通过下调IRP结合活性及IRP2 mRNA水平 ,导致细胞铁蛋白表达增加而发挥抗氧化损伤的作用。

慢性病贫血大鼠肝脏铁代谢紊乱的调节

目的 在建立慢性病贫血 (ACD)大鼠动物模型的基础上 ,探讨一氧化氮 (NO)、铁调节蛋白 (IRP)在ACD大鼠肝组织铁代谢紊乱中的调节作用。方法 在传统佐剂性关节炎大鼠模型基础上 ,通过追加注射福氏佐剂两次 ,增强其免疫反应 ,从而诱发贫血的发生 ;对不同处理组大鼠肝脏铁含量、铁蛋白 (Fn)、NO、IRP 2mRNA水平及IRP结合活性进行检测。结果 ACD大鼠肝组织IRP结合活性较正常对照组升高 ,IRP 2mRNA表达下调 ,硝基精氨酸甲酯 (NAME)组大鼠则位于两者之间 ,NO水平与IRP结合活性呈正相关。结论 NO。

静注免疫球蛋白与丙型肝炎病毒传播的安全性研究

笔者就输注国产ＩＶＩＧ后传播ＨＣＶ的危险性作了研究。２９名有ＩＶＩＧ应用指针的病儿，输注经加热法灭活病毒的ＩＶＩＧ后１周、２周、１月，抗－ＨＣＶ阳性率分别为８３．３％、４５．５％、４．６％，３个月后全部转阴，显示抗－ＨＣＶ随输注ＩＶＩＧ后时间延长而转阴。随机抽取１１名输注ＩＶＩＧ后抗－ＨＣＶ阳性病儿的２４份系列血标本，用ｎｅｓｔ－ＰＣＲ检测ＨＣＶ－ＲＮＡ，无阳性发现。检则１０份ＩＶＩＧ中抗－ＨＣＶ均阳性，抗－ＨＣＶ滴度１∶１６，抽取６份ＩＶＩＧ，ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性。经３个月～１年观察，所有病例无肝炎的临床症状和体征，结果支持：用于本研究的国产ＩＶＩＧ输注可被动输入抗－ＨＣＶ，但不传播ＨＣＶ。

全反式维甲酸对K562细胞的诱导分化及c-myc基因表达的抑制

目的观察ATRA对K562细胞的诱导分化作用,探讨c-myc基因表达与诱导分化的关系及可能的作用机制。方法 采用形态学观察、流式细胞术及RT-PCR方法,检测K562细胞向粒系分化特征及c-myc基因的表达。结果 ATRA诱导K562细胞的诱导分化的同时,伴有c-myc基因mRNA水平表达下降。结论ATRA可通过下调c-myc基因表达而诱导K562细胞向粒系成熟方向分化。

多重等位基因特异多聚合酶链反应产前基因在诊断β-珠蛋白生成障碍性贫血中的应用

目的 探讨多重等位基因特异多聚合酶链反应(PCR)产前基因诊断β-珠蛋白生成障碍性贫血的临床应用价值。方法 在B超监视下对21名孕妇行羊膜腔穿刺,抽取羊水20ml,常规酚-氯仿法提取DNA,应用多重等位基因特异PCR检测其羊水细胞的β-珠蛋白的5种基因突变类型(CD17,CD41～42,IVS-Ⅱ654,nt-28,nt-29)。结果 检测的21例中,4例双重杂合子及1例纯合子,均选择流产。16例为正常或单个突变的杂合子,胎儿出生后取脐血验证并随访观察,现小儿9个月～3.2岁,均健康。结论 多重等位基因特异PCR可用于β-珠蛋白生成障碍性贫血高风险胎儿的产前基因诊断,在指导β-珠蛋白生成障碍性贫血阳性家系的选择性妊娠中具有一定的临床意义。

中期孕母与胎儿间铁营养状态的关系

为进一步确定中期孕母铁缺乏症对胎儿铁代谢的影响，我们研究了中期孕母与胎儿铁代谢的关系。结果发现，二者的红细胞碱性铁蛋白（ＥＦ）值是显著正相关关系（ｒ＝０．４０２１，Ｐ＜０．０２５），且孕母中度ＩＤＡ组胎儿ＥＦ值下降了１３．６％，而母、胎其它铁代谢指标间无相关关系；说明孕母铁缺乏影响其胎儿的铁储备，尤以严重铁缺乏时明显，证实孕母铁缺乏可致胎儿出生后易患铁缺乏症。

阿司匹林在内皮细胞抗氧化损伤中的作用

为证实阿司匹林的抗氧化作用是通过抑制ＮＯ生成，从而导致铁蛋白表达增加来实 现的．在培养的内皮细胞中使用炎性因子诱导产生ＮＯ后，测定细胞中铁蛋白（Ｆｎ）的含量和 细胞损伤的指标；观察不同浓度的阿司匹林（ＡＳ）抑制ＮＯ产生后铁蛋白及细胞损伤指标的 改变和ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达水平的变化，结果显示诱导ＮＯ产生后，细胞Ｆｎ表达降低，细胞明显 损伤；而低浓度的 ＡＳ（０．３ｍｍｏｌ／Ｌ）即可抑制 １５％的 ＮＯ生成，增加细胞 Ｆｎ的表达，同时能 有效地对抗Ｈ２Ｏ２的损伤作用．并随着ＡＳ用量的增加抑制ＮＯ的作用逐渐增强．而且在中小剂 量（＜１０ｍｍｏｌ／Ｌ）下ＡＳ对ＮＯ的抑制作用主要是在转录后水平影响ｉＮＯＳ的催化活性或蛋白 表达，不影响ｉＮＯＳｍＲＮＡ水平；但高剂量的ＡＳ （ｌ０～２０ ｍｍｏｌ／Ｌ）则可在转录水平上抑制ｉＮ－ ＯＳｍＲＮＡ的表达．并观察到水杨酸钠及消炎痛不具有抑制ＮＯ产生及诱导Ｆｎ表达的作用．ＡＳ 具有明显抑制ＮＯ生成的作用，其诱导Ｆｎ表达增加可能是通过抑制ＮＯ产生而实现的；提示 ＡＳ是目前非甾体类抗炎药中唯一具有抑制ＮＯ产生及增加Ｆｎ表达的药物．

一氧化氮及铁蛋白在阿司匹林抗过氧化氢损伤内皮细胞中的作用

目的 证实阿司匹林的抗氧化作用是通过抑制一氧化氮 (NO)生成、增加铁蛋白 (Fn)表达来实现的。方法 在培养的内皮细胞中使用炎性因子诱导产生NO后 ,测定细胞中Fn的含量和细胞损伤的指标 ;观察不同浓度的阿司匹林 (AS)抑制NO产生后Fn及细胞损伤指标的改变和诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)mRNA表达水平的变化。结果 诱导NO产生后 ,细胞Fn表达降低 ,细胞明显损伤 ;而低浓度的AS( 0 .3mmol/L)即可抑制 15 %的NO生成 ,增加细胞Fn的表达 ,同时能有效地对抗H2 O2 的损伤作用。随AS用量增加 ,抑制NO的作用渐增强。中小剂量 ( <10mmol/L)下AS对NO的抑制作用主要是在转录后水平影响iNOS的催化活性或蛋白表达 ,不影响iNOSmRNA水平 ;但高剂量的AS( 10mmol/L～ 2 0mmol/L)在转录水平上抑制iNOSmRNA的表达。水杨酸钠及消炎痛不具有抑制NO产生及诱导Fn表达的作用。结论 AS的抗氧化作用是通过抑制可诱导性NO产生 ,从而导致Fn表达增加来实现的。

铁调节蛋白在慢性病贫血大鼠肝脏铁代谢紊乱中的作用

目的 探讨一氧化氮 (NO)、铁调节蛋白 (IRP)在慢性病贫血 (ACD)大鼠肝组织铁代谢紊乱中的调节作用。方法 在传统佐剂性关节炎大鼠模型基础上 ,通过追加注射福氏佐剂两次 ,增强其免疫反应 ,从而诱发建立贫血大鼠模型。对贫血模型组和正常对照组大鼠肝脏铁含量、铁蛋白、NO、IRP- 2 m RNA水平及 IRP结合活性进行检测。结果 佐剂性关节炎大鼠经追加福氏佐剂 ,肝铁、铁蛋白水平升高 (P<0 .0 5〉,与 ACD铁代谢改变特征一致 ;ACD大鼠肝组织 IRP结合活性较正常对照组升高 ,IRP- 2 m RNA表达下调 ,NO水平与 IRP结合活性呈正相关。结论 NO、IRP在

缺铁性贫血对中性粒细胞趋化功能的影响及其机理探讨

本文定量测定了三组大鼠(对照组、缺铁性贫血组、缺铁性贫血补铁组)中性粒细胞体内及体外趋化功能。结果表明中性粒细胞体外趋化功能不受缺铁性贫血影响,但体内趋化功能则明显受损,补铁一周后仍未恢复正常。本文对此现象发生的机理进行了初步探讨。

缺铁对大鼠中性粒细胞吞噬杀菌功能的损害及其机理的研究

本文研究了三组大鼠(对照组、缺铁组、补铁组)中性粒细胞吞噬杀菌功能。三组中性粒细胞化学发光峰值、5分钟积分面积值均有显著性差异,缺铁组分别为对照组的41％及32％,示中性粒细胞NADPH氧化酶活性降低,吞噬伴随的“呼吸爆发”功能受损。髓过氧化物酶活性三组间也有显著性差异,缺铁组为对照组的30％,示中性粒细胞杀菌功能障碍。补铁一周后,补铁组上述三项指标明显恢复,分别达正常组值的79％、76％及66％,与缺铁组相比有显著性差异,但尚未达正常水平。若按其每日平均恢复速率,推算出补铁后中性粒细胞吞噬伴随的“呼吸爆发”功能完全恢复约需11天,髓过氧化物酶活性完全恢复约需14天。

人类猫白血病病毒受体的研究进展

人类猫白血病C亚类病毒受体(feline leukemia virus subgroup C receptor,FLVCR)于2000 年克隆,并定位于1号染色体长臂(1q31)。研究表明人类FLVCR广泛表达于CD34+造血干／组细胞、造血细胞及其他人类组织和细胞系。新近发现FLVCR具有输出血红素的重要功能,并由此参与红系生成的调节。目前,对于FLVCR的功能和病理生理意义的认识是一个尚待深入研究的领域。