美洲大蠊醇提取物对小鼠急性免疫性肝损伤的影响

目的研究美洲大蠊醇提物对刀豆球蛋白A诱导急性免疫性肝损伤的保护作用。方法将小鼠随机分为空白组、模型组、联苯双酯组(200 mg/kg)、美洲大蠊醇提物组(90、60、30 mg/kg),灌胃给药,1次/d,给药7 d。末次给药2 h后,除空白组外,其他组一次性尾静脉注射刀豆蛋白A(20 mg/kg)建立小鼠免疫性肝损伤模型。计算小鼠肝、脾系数;测定小鼠血清ALT、AST水平,以及肝脏组织SOD、MDA水平;HE染色观察肝脏组织病理;免疫组化检测淋巴细胞CD4、CD8。结果与模型组比较,美洲大蠊醇提物(90、60、30 mg/kg)能降低急性免疫性肝损伤小鼠肝、脾系数,下调血清ALT、AST水平,降低肝组织CD4、CD8阳性细胞数量(P<0.05,P<0.01);美洲大蠊醇提物(90、60 mg/kg)能上调肝组织SOD水平,下调肝组织MDA水平(P<0.05、P<0.01),美洲大蠊醇提物能改善急性免疫性肝损伤小鼠肝脏组织病理损伤。结论美洲大蠊醇提物对刀豆蛋白A引起的小鼠急性免疫性肝损伤具有一定保护作用,并且可通过调节T淋巴细胞亚群,使其达到一个平衡的状态,抑制肝损伤从急性向慢性的进一步发展。

藏族药二十五味松石丸治疗慢性胆汁淤积小鼠的血清代谢组学研究

采用喂养含3,5-二乙氧基羰基-1,4-二氢-2,4,6-三甲基吡啶(3,5-diethoxy carbonyl-1,4-dihydro-2,4,6-trimethylpyridine,DDC)的饲料建立慢性胆汁淤积小鼠模型,基于液相色谱-质谱(LC-MS)检测技术的代谢组学分析方法,探究二十五味松石丸(Ershiwuwei Songshi Pills,ESP)对慢性胆汁淤积小鼠的内源性代谢物的影响。结果发现ESP能够有效改善模型组小鼠的病理性损伤以及降低血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆汁酸(TBA)水平。代谢组学筛查得到模型组与空白组、模型组与ESP组13个共有的差异代谢物,分别是尿酸(uric acid)、乙醇醛(glycolaldehyde)、犬尿氨酸(kynurenine)、黄素腺嘌呤二核苷酸(flavin adenine dinucleotide)、L-3-苯乳酸(L-3-phenyllactic acid)、I-尿胆素(I-urobilin)、白三烯D4(LTD4)、牛磺胆酸(taurocholic acid)、trioxilin A3、1D-肌醇1,4-二磷酸(D-inositol-1,4-diphosphate)、PC[16:0/20:2(11Z,14Z)]、PC[14:0/22:2(13Z,16Z)]、PC[20:4(5Z,8Z,11Z,14Z)/20:4(5Z,8Z,11Z,14Z)]。ESP干预后,13个差异代谢物的含量均有明显回调,通路分析显示,ESP主要通过影响花生四烯酸代谢、甘油磷脂代谢、色氨酸代谢、初级胆汁酸的生物合成等途径来达到治疗效果。该研究从代谢物角度阐释了二十五味松石丸抗慢性胆汁淤积的作用机制。

藏族药二十五味松石丸调控肠道菌群改善非酒精性脂肪性肝炎的作用机制研究

探究藏族药二十五味松石丸(Ershiwuwei Songshi Pills,ESP)对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)小鼠肠道菌群的影响。将48只雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组(control),模型组(MCD),藏族药二十五味松石丸高(ESP 0.8 g·kg^(-1))、中(ESP 0.4 g·kg^(-1))、低(ESP 0.2 g·kg^(-1))剂量组和吡格列酮组(pioglitazone,PGZ 10 mg·kg^(-1)),每组8只。空白组普通饲料喂养,其余5组蛋氨酸-胆碱缺乏(methionine-choline-deficient,MCD)饲料喂养5周构建非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型,造模的同时灌胃(ig)给予相应的药物进行干预;实验过程中记录小鼠体质量、日饮水量及日摄食量的变化;实验结束后收集肝组织,苏木精-伊红染色(HE)染色观察肝脏病理变化,油红O染色观察肝脏脂肪堆积情况,检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和肝组织中甘油三酯(TG)的含量;采用16S rRNA高通量测序技术检测小鼠肠道菌群的变化。结果显示,与模型组相比,二十五味松石丸高、中、低剂量组和吡格列酮组血清中的AST、ALT和肝组织中TG含量显著降低,对肝细胞脂肪变性和肝脏中脂肪堆积均有改善作用。16S rRNA测序结果显示,模型组肠道菌群丰度和多样性指数降低,二十五味松石丸组小鼠肠道菌群的丰度和多样性指数升高,并且在门水平上降低了厚壁菌门Firmicutes与拟杆菌门Bacteroidetes的比例;在改变肠道菌群组成方面,降低了肠道菌群中Erysipelotrichia和Faecalibaculum的丰度,提高了Desulfovibrionaceae、Rikenellaceae、Lachnospiraceae和Ruminococcaceae的丰度。该研究发现藏族药二十五味松石丸对MCD饮食诱导的NASH具有保护作用,其作用机制可能是通过调节肠道菌群的变化,改变肠道菌群的组成,抑制肠道菌群的失调,进而改善NASH。

波棱瓜子总木脂素对慢性酒精性肝损伤大鼠肝组织TGF-β/CTGF表达的影响

目的:探讨波棱瓜子总木脂素对慢性酒精性肝损伤大鼠肝脏TGF-β/CTGF表达的影响及保护作用机制。方法:大鼠分为:模型对照组、水飞蓟素50 mg/kg组、波棱瓜子总木脂素100、200、400 mg/kg组,连续灌胃给药8 w,并同时建立慢性酒精性肝损伤大鼠模型,另设正常对照组。取肝脏,计算大鼠的肝脏系数。通过酶联免疫吸附(Elisa)法检测大鼠血清中转化生长因子-β(TGF-β)、结缔组织生长因子(CTGF)以及肝匀浆超氧化物歧化酶(SOD)的活力,观察大鼠肝组织病理切片胶原纤维染色(Masson)结果,免疫组织化学染色观察TGF-β、CTGF蛋白表达情况。结果:与正常对照组相比,肝脏组织经过Masson三色胶原染色后发现,模型对照组有胶原纤维的生成,肝脏系数显著升高,血清中TGF-β、CTGF含量显著升高,肝组织中SOD活力显著升高,肝组织中TGF-β、CTGF蛋白表达显著上调(P<0.01)。与模型对照组相比较,波棱瓜子总木脂素400 mg/kg组大鼠的肝脏系数显著降低(P<0.01),血清中TGF-β、CTGF含量显著降低,肝匀浆SOD活力显著增高(P<0.01),肝脏损伤程度减轻,胶原纤维的生成减少,肝组织中TGF-β、CTGF蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01)。结论:波棱瓜子总木脂素可以通过抑制CTGF的生成,对酒精性肝损伤大鼠的肝组织具有一定的保护作用。