重症肌无力增生型胸腺组织11KD差异蛋白带双向电泳图谱的建立

目的建立分辨率高和重复性好的重症肌无力(MG)增生型胸腺组织11KD差异(异常)蛋白带的二维凝胶电泳图谱。方法首先采用SDS-PAGE电泳筛选出含有11KD差异(异常)蛋白条带的MG增生型胸腺组织,然后富集11KD蛋白条带。以17cm pH3-10固相pH梯度胶条(immobilized pH gradient,IPG)做第一向等电聚焦(IEF),12%SDS聚丙烯酰胺凝胶为第二向进行双向电泳(2-DE),PD Quest 7.1软件分析电泳图谱。结果11KD差异(异常)蛋白条带的出现率为72.2%;通过双向电泳,建立分辨率高和重复性好的重症肌无力(MG)增生型胸腺组织11KD差异蛋白带的双向凝胶电泳图谱,进一步分离11KD差异(异常)蛋白带,共得到(30±6)个蛋白点。结论通过蛋白质组技术快速建立重症肌无力11KD差异(异常)蛋白表达图谱,为进一步研究差异表达蛋白的功能提供实验基础。

重症肌无力患者胸腺增生组织中11000条带的蛋白质组学分析

目的:探讨重症肌无力(MG)患者胸腺增生组织中相对分子质量为11000差异(异常)条带的蛋白质组成。方法:采用非还原性SDS-PAGE制备型电泳对11000条带进行筛选和富集;应用双向电泳得到蛋白质二维图谱,并对差异蛋白点进行质谱分析;应用免疫组化法比较20例MG胸腺增生组织和10例正常对照组织中4.1R蛋白的表达水平。结果:MG患者胸腺增生组织中目标条带的阳性率为72.7%(8/11),该条带由(30±6)个蛋白点组成,质谱分析显示有16个高表达差异蛋白点,其中3个蛋白得到鉴定,分别为4.1R蛋白、自整合抑制因子1和胆碱乙酰转移酶。免疫组化结果显示,与正常对照组的(0.98±0.18)相比,MG患者胸腺增生组织中4.1R蛋白表达水平为(1.55±0.46)明显增高(t=3.054,P=0.016)。结论:MG胸腺增生组织11000条带由多个蛋白点构成,这些蛋白主要功能涉及细胞骨架的组成、细胞内信息传递和乙酰胆碱合成等。

食管活瓣成形-胃食管套接术预防食管癌术后吻合口并发症的效果分析

目的明确食管活瓣成形-胃食管套接术预防食管癌术后吻合口并发症的效果。方法预先设计了一项随机对照试验,纳入2010年1月至2013年6月共394例食管癌患者。该项研究已在中国临床试验中心注册,并获得了注册号:ChiCTRTRC-13003817。有9例(2.3%)患者因未行食管癌根治术被排除,余下的所有患者均遵循随机分组的原则,随机分为两组,A组191例,B组194例。A组为试验组,术中接受食管活瓣成形-胃食管套接吻合,而B组为对照组,术中接受常规器械吻合。比较两组术后并发症发生情况。结果术后吻合口瘘的发生率在A组和B组分别为4.1%和3.6%,差异无统计学意义(P=0.768)。在观察术后吻合口狭窄时有7例患者因术后死亡而失访。在剩下的病例中,观察到A组和B组术后吻合口狭窄发生例数分别为13例(6.9%)和25例(13.2%),差异有统计学意义(P=0.044)。此外对于术后胃食管返流的监测发现,A组和B组术后返流性食管炎和Barrett食管的例数分别为54例(28.7%)和105例(55.3%),差异有统计学意义(P<0.01)。结论食管活瓣成形-胃食管套接术能有效预防术后胃食管返流的发生,同时也能降低术后吻合口狭窄的发生率。

3种方法提取胸腺组织蛋白双向电泳纯化结果比较

目的:选择合适的胸腺组织蛋白质提取和纯化方法。方法:分别采用组织裂解液法、丙酮沉淀法和蛋白纯化试剂3种方法提取7例重症肌无力患者胸腺组织蛋白质,上样量为1mg蛋白,以17cmpI3～10固相pH梯度胶条做第一向等电聚焦,SDS-PAGE垂直电泳为第二向进行双向电泳(2-DE),考马斯亮蓝染色,图像分析软件分析电泳图谱。结果:利用蛋白纯化试剂法提取的胸腺组织蛋白2-DE凝胶图像纵条纹、横条纹以及背景都明显减少,获得蛋白点数量较其他2种方法增加(P均<0.05)。结论:采用蛋白纯化试剂法提取胸腺组织蛋白,能够获得较好2-DE凝胶图像,为胸腺组织蛋白质组学的研究打下基础。

重症肌无力患者胸腺细胞Bcl-2表达的研究

目的探讨重症肌无力(myastheniagravis,MG)的发病机制,为临床治疗提供一定的实验理论依据。方法用机械分离法、淋巴细胞分离液获取19例MG患者和11例正常对照组胸腺细胞悬液,接种于培养板中,分别加入雌、孕激素作为特异性刺激组,未加内分泌激素作为空白对照组,培养72h后收获细胞。采用流式细胞术分别检测MG患者和正常对照组胸腺细胞及雌、孕激素培养前后胸腺细胞的Bcl-2表达。结果MG患者胸腺细胞Bcl-2表达率比正常对照组显著增高,2者相比有统计学意义(P<0.01);雌、孕激素培养组MG患者胸腺细胞Bcl-2的表达率比空白对照组显著降低,分别比较差异有统计学意义(P<0.05),雌激素培养组与孕激素培养组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论MG患者胸腺细胞Bcl-2表达升高,可能参与调控胸腺细胞凋亡,其表达异常可能是MG发病的一个重要因素;雌、孕激素抑制MG患者胸腺细胞Bcl-2的表达,提示体内雌激素、孕激素水平变化与MG患者病情变化有一定联系。

重症肌无力患者胸腺组织中天冬氨酰氨基葡糖苷酶基因mR-NA的表达

目的:探讨重症肌无力(MG)患者胸腺组织中天冬氨酰氨基葡糖苷酶(AGA)基因mRNA的表达情况。方法:利用荧光定量聚合酶链反应方法检测比较39例不同临床分型MG患者和10例正常人胸腺组织的AGAmR-NA表达情况。结果:MG患者和正常人胸腺组织中AGA基因mRNA的表达水平分别为0.67±0.14和0.61±0.08,差异有统计学意义(P<0.05)。不同临床分型的MG患者之间胸腺组织中AGAmRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MG患者胸腺组织中AGA基因的转录水平表达异常,其可能是MG的致病基因或相关基因。

胸腹腔镜联合Ivor Lewis术与McKeown术治疗胸中下段食管癌近期疗效的比较

目的比较胸腹腔镜联合Ivor Lewis术与McKeown术治疗胸中下段食管癌的临床近期疗效。方法采用随机分组的方法,将120例胸中下段食管癌的患者均分为2组,分别行Ivor Lewis术与McKeown术,比较两组患者的手术指标、治疗后两组患者的淋巴结清扫及转移情况、两组患者的术后并发症和术后6个月复发情况、两组患者治疗前后的生活质量。结果两组患者接受不同的治疗后,其淋巴结清扫及转移情况的差异有统计学意义(χ~2=76. 13,P=0. 00)、术后并发症和术后6个月复发情况差异有统计学意义(χ~2=55. 24,P=0. 00)、生活质量差异显著(χ~2=79. 63,P=0. 00);造成两组患者间淋巴结清扫及转移情况差异、术后并发症和术后6个月复发情况差异和生活质量差异显著的主要原因在于:Ivor Lewis组和McKeown组的疗效差异。结论 Ivor Lewis术与McKeown术对于治疗胸中下段食管癌均有一定疗效,McKeown术的治疗效果相对更好,并发症发生率更低。

放疗及胸腺瘤切除术治疗重症肌无力并胸腺瘤的疗效

目的观察放疗联合胸腺瘤切除术治疗重症肌无力(MG)合并胸腺瘤的临床疗效,并分析预后。方法选择2015年1月—2016年12月收治的58例MG合并胸腺瘤患者,将其随机分为两组,每组各29例。对照组采用胸腺瘤切除术治疗,研究组则联合放疗与胸腺瘤切除术治疗,评价临床疗效,比较治疗前后的抗体指标。结果比较临床疗效,研究组总有效率为89.7%(26/29),高于对照组的72.4%(21/29),差异具有统计学意义(P<0.05)。经不同方式治疗后,研究组的抗体指标均优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 MG合并胸腺瘤,放疗联合胸腺瘤切除术治疗,可取得满意疗效。

内分泌激素对重症肌无力患者胸腺细胞增殖、凋亡及Bcl-2表达的影响

目的探讨重症肌无力（MG）的发病机制，为临床治疗提供一定的实验理论依据。方法将制备的MG患者胸腺细胞悬液分为对照组和实验组培养72h后，流式细胞术分析胸腺细胞Bcl-2分子的表达；MTT法测定细胞增殖、流式细胞术分析其凋亡的情况。结果雌、孕激素培养组胸腺细胞Bcl-2的表达率比空白对照组显著降低（P〈0．05）；雌、孕激素对细胞的增殖有明显抑制作用（P〈0．05），诱导其凋亡。结论雌、孕激素抑制MG患者胸腺细胞Bcl-2的表达，而且抑制胸腺细胞的增殖，诱导其凋亡；提示体内雌激素、孕激素水平变化与MG患者病情变化有一定联系。

脓毒血症应用丙氨酰谷氨酰胺双肽强化早期肠内营养治疗

目的探讨脓毒血症患者应用丙氨酰谷氨酰胺双肽强化早期肠内营养治疗的临床疗效,为临床应用提供参考。方法随机抽取2017年2月至11月门诊中脓毒血症患者128例,随机分为试验组和对照组,各64例。两组都给予补液及机械通气等常规治疗,同时采取针对性的抗感染治疗,和早期的肠内营养治疗。试验组在此基础上加入丙氨酰谷氨酰胺双肽静脉滴注治疗2周。比较两组治疗前后营养相关蛋白[转铁蛋白(TF)、血红蛋白(Hb)、白蛋白(ALB)]、代谢指标[血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、乳酸(Lac)]、凝血功能相关指标[血小板计数(PLT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)]、免疫指标[免疫球蛋白(Ig)G、IgA、IgM]及治疗前后序贯器官衰竭评分(SOFA评分)。结果治疗后,两组TF、Hb、ALB水平高于治疗前(P <0. 01),Scr、BUN低于治疗前(P <0. 01),Lac比较无统计学差异(P> 0. 05);且试验组TF、Hb、ALB水平高于对照组(P <0. 01),Scr、BUN低于对照组(P <0. 01)。治疗后,试验组PLT高于治疗前(P <0. 01),PT、APTT低于治疗前(P <0. 01);对照组治疗后PLT高于治疗前(P <0. 01),APTT低于治疗前(P <0. 01),PT治疗前后无统计学差异(P> 0. 05);且两组治疗后PLT、PT、APTT比较差异有统计学意义(P <0. 01)。治疗后,试验组IgG水平高于治疗前(P <0. 01),IgM水平低于治疗前(P <0. 01),IgA治疗前后无统计学差异(P> 0. 05);对照组IgG、IgA、IgM水平治疗前后无统计学差异(P>0. 05);且两组治疗后IgG、IgM水平比较差异有统计学意义(P <0. 01)。两组治疗后SOFA评分均低于治疗前(P <0. 01);且试验组低于对照组(P <0. 01)。结论脓毒血症患者应用丙氨酰谷氨酰胺双肽强化早期肠内营养治疗具有较好的临床疗效,可有效改善免疫功能、降低病死率。