甲酸表面脱钙法在骨髓活检荧光原位杂交制片中的应用

目的对骨髓活检组织使用甲酸溶液进行表面脱钙,提高其石蜡切片荧光原位杂交检测的成功率,为骨髓内淋巴瘤的精确诊治及预后判断提供分子生物学依据。方法回顾性收集2015年1月至2022年5月间首都医科大学附属北京友谊医院病理科骨髓活检组织58例,其中套细胞淋巴瘤33例,弥漫大B细胞淋巴瘤21例,滤泡性淋巴瘤4例。根据常规制片前所用脱钙液和脱钙方式的不同,将实验分为3组:硝酸传统脱钙组(DG1)、硝酸表面脱钙组(DG2)和甲酸表面脱钙组(DG3)。其中DG2组和DG3组蜡块在荧光原位杂交制片前,需放入50%甲酸溶液中二次脱钙10 min,流水冲洗10 min。之后对3组蜡块进行连续切片,每例捞取组织面2张,分别用于苏木素和伊红染色和杂交检测。结果DG1组、DG2组和DG3组杂交的成功率分别为5.6%(1/18)、94.7%(18/19)和95.2%(20/21)。与DG1组相比,DG2组和DG3组杂交成功率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。DG2组和DG3组成功率之间差异无统计学意义(P>0.05)。DG2组13例MCL和1例FL、DG3组8例MCL和2例FL中的CCND1/IGH和BCL2/IGH融合探针检测均为阳性。DG1组1例DLBCL、DG2组5例DLBCL、DG3组11例DLBCL细胞内MYC基因均未出现异常断裂信号,表现为两个红绿融合的黄色信号。杂交成功的切片上组织结构完整,细胞轮廓清楚,信号定位准确。结论甲酸表面脱钙法脱钙速度快,荧光原位杂交检测成功率高,结果准确。甲酸代替硝酸,配制安全而且容易购买。该法在骨髓活检FISH制片中的应用具有重要的临床价值,应用前景广阔,值得推广。