固相萃取结合高效液相色谱法快速筛查市售奶茶饮品中胭脂树橙

文章建立了固相萃取-高效液相色谱法对市售奶茶饮品中天然色素胭脂树橙进行定性和定量检测。试样经5%氨水乙醇提取2次后,通过Agilent Bond Elut Plexa PAX固相萃取小柱富集净化,洗脱液经氮吹浓缩后采用DIKMA Diamonsil C18(4.6 mm×200 mm,5μm)色谱柱分离,乙腈∶2%乙酸水(80∶20)等度洗脱,458 nm波长检测,外标法定量。结果表明,降红木素和红木素在0.50~50.00 mg/kg范围内线性良好(R2≥0.9997),定量限均达到0.50 mg/kg,试样的低中高3水平添加回收率分别为92.37%~104.92%和92.73%~102.11%,相对标准偏差(RSD)≤5.57%。通过对比色谱峰光谱吸收辅助定性降红木素和红木素的不同构型,该方法简便易操作,准确性高,适用于市售奶茶中胭脂树橙的批量检测。

Plcd1转基因小鼠的制备

通过制备Plcd1转基因小鼠研究Plcd1基因功能.首先逆转录PCR获得约2.2kb的Plcd1基因全长,T载体克隆后测序验证;以pMD19-T-Plcd1为模板,通过设计引物及PCR扩增引入酶切位点,与pEF6/V5-His同时进行酶切、连接,构建pEF6/V5-His-Plcd1表达载体;经真核表达验证后,酶切获得目标片段,显微注射681枚受精卵,在82只仔鼠中获得转基因阳性首建鼠15只,其中13只稳定遗传并建系.PLCD1-HIS融合蛋白在睾丸组织中表达,在皮肤组织中无表达.Plcd1转基因小鼠为Plcd1功能研究奠定了基础.

5种不同遗传背景绿色荧光蛋白(GFP)基因导入系小鼠的培育

通过反复回交——筛选目的基因的手段,将C57BL/6-Tg(UBC-GFP)30Scha/J转基因小鼠的绿色荧光蛋白基因(GFP)分别向BABL/C、CBA/J、DBA/2J、AKR/J、FVB/J等品系小鼠导入,得到了5种不同遗传背景且带有GFP基因的导入系小鼠.冰冻组织切片等方法显示GFP导入系小鼠的皮肤、肝、肾、心、肺等均有不同程度的绿色荧光蛋白表达,不同遗传背景对GFP的组织表达谱、血液生理指标及繁殖性能未见影响.本实验采用基因导入法培育了5种新的带有GFP导入系小鼠,这些不同遗传背景的基因导入系小鼠为移植生物学研究提供了材料.

Vill转基因小鼠的制备

目的通过制备Vill转基因小鼠研究该基因的功能。方法与结果首先由RT-PCR方法获得全长约2 605 bp的Vill基因;经T载体克隆测序验证后,以克隆载体pMD19-T-Vill为模板,设计引物并引入酶切位点,将PCR扩增产物与pEF6/V5-His-LacZ同时进行酶切、连接,构建表达载体pEF6/V5His-Vill;经真核表达验证后,酶切获得含Vill基因的显微注射DNA构件;显微注射390枚受精卵后,在出生存活的77只仔鼠中获得转基因阳性G0代小鼠19只,其中16只能够稳定遗传并建系,转基因阳性小鼠外观未有明显改变。结论 Vill转基因小鼠为该基因的功能研究准备了实验材料。

三例眼部突变小鼠的培育及特征分析

目的筛选培育眼部突变表型小鼠,为人类相关疾病的研究提供材料。方法采用N-乙基-N-亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea,ENU)诱变处理G0代小鼠,繁育获得G1代,筛选眼部突变表型个体,进行遗传力试验、临床诊断及病理学观察。结果本实验繁殖G1代小鼠2782只,经筛查获得眼部突变表型小鼠65只,可稳定遗传小鼠3例,分别表现为:角膜混浊、小眼球和虹膜异常等特征。角膜混浊者其角膜症状严重程度差异较大,角膜病变部位明显增厚,部分伴有新生血管;小眼球者睑裂较小,甚至上下眼睑粘连,外观眼球不可见,病理学检查可见内有发育异常的小眼球;虹膜异常者可见瞳孔偏大,明显偏离中心位置,偏向位置不定,对光无反射,病理学观察可见虹膜晶状体粘连、虹膜缺损,严重者伴有视网膜异常等。结论本实验成功培育了3例眼部突变表型小鼠,为人类相关疾病的研究提供良好的材料。

HILIC-MS/MS结合酶解-QuEChERS净化法测定含鸡源成分中成药中利巴韦林及其代谢物总残留

目的建立亲水作用色谱-串联质谱(HILIC-MS/MS)结合酶解-QuEChERS净化法测定含鸡源成分中成药中利巴韦林及其代谢物总残留。方法样品中加入^(13)C_(5)利巴韦林内标,1%乙酸乙腈超声提取,在37℃下经酸性磷酸酶酶解,经QuEChERS净化萃取包净化后用Waters ACQUITY UPLC BHE HILIC (2.1 mm×100 mm, 1.7μm)色谱柱分离,以5 mmol/L乙酸铵(含0.2%甲酸)-乙腈为流动相梯度洗脱,在电喷雾正离子电离多反应监测模式下监测,内标法定量。结果乌鸡白凤丸、复方鸡内金片中利巴韦林含量在1.0~100μg/kg之间时,相关系数大于0.999,方法检出限为0.3μg/kg,定量限为1.0μg/kg,日内回收率为95.47%~100.75%,日内精密度RSD为0.53%~2.76%,日间回收率为94.47%~101.11%,日间精密度RSD为1.00%~2.33%。结论该方法快速简便,线性范围宽,重复性好,可用于含鸡源成分中成药中利巴韦林及其代谢物总残留的定性及定量检测。

羊乳对小鼠肠道微生物的影响

以小鼠为模式动物,研究羊乳对小鼠肠道微生物菌群的影响,选取36只SPF级小鼠进行试验,试验分为对照组A、试验组B,C。组A采用蒸馏水喂养,组B,C在喂养所用蒸馏水中按体积分别加入30%,60%的羊乳;喂养周期均为20周。第20周最后1天,取小鼠直肠部位粪便进行高通量测序。结果显示:摄入羊乳的小鼠的肠道菌群发生了变化,菌群多样性得到提升,其中拟杆菌门(Bacteroidetes)、拟普雷沃氏菌属(Alloprevotella)、乳酸菌属(Lactobacillus)、普雷沃氏菌属(Prevotella_9)、Faecalibacterium属的相对丰度显著提高,厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌属(Bacteroides)、另枝菌属(Alistipes)、脱硫弧菌属(Desulfovibrio)、Allobaculum属、链球菌属(Streptococcus)的相对丰度显著降低。羊乳的摄入增加了小鼠肠道微生物多样性,在一定程度上改善了小鼠肠道环境。

一测多评法同时测定芍药汤中6种成分

目的建立一测多评法同时测定芍药汤(白芍、黄连、当归等)中阿魏酸、甘草苷、盐酸小檗碱、大黄素、芍药苷、黄芩苷的含量。方法将芍药汤分别制成标准汤剂、配方颗粒,分析采用ACE Excel C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-水(含0.1%磷酸),梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长230 nm。以阿魏酸为内标,计算其他5种成分的相对校正因子,测定含量。结果6种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9990),平均加样回收率97.48%~101.36%,RSD 0.62%~1.97%。一测多评法所得结果与外标法接近。配方颗粒中各成分含量低于标准汤剂中。结论该方法稳定可靠,可用于芍药汤的质量控制。

液相色谱串联质谱法测定鸡蛋中利巴韦林及其代谢物总残留的不确定度评定

为提高鸡蛋食品安全检测结果准确性,建立了一种液相色谱串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)测定鸡蛋中的利巴韦林及其代谢物总残留量的不确定度数学模型。依据SN/T4519-2016《出口动物源食品中利巴韦林残留量的测定》中的方法,对整个检测过程进行了不确定度评定。不确定度分量主要来源有测量的重复性、回收率、样品的称量、样品前处理稀释和定容、标准溶液配制、标准曲线拟合及仪器测定引入。经评定鸡蛋中利巴韦林及其代谢物总残留量结果为X=(9.94±0.88)μg/kg,k=2;其中标准曲线拟合过程中引入的不确定度分量影响最大。

高效液相色谱法测定果汁饮料中山梨酸含量的不确定度评定

目的 评定高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定果汁饮料中山梨酸的不确定度.方法 采用HPLC法测定果汁饮料中山梨酸,确认不确定度的来源和大小,合成不确定度,计算扩展不确定度.结果 果汁饮料中山梨酸的含量为94.90 mg/kg,扩展不确定度为5.86 mg/kg(P=95%,k=2).结论 标准物质与标准曲线拟合对不确定度的影响较大,样品制备(称量、溶液定容)、回收率、样品测量(仪器测定、测量重复性)和峰面积对不确定度的影响较小.

落实政策暖人心

山西省长治市李高乡主显堂,已有近百年的历史,后被粮站占用,经市、县政府的努力,排除重重具体困难,去年8月12日,终于归还给教会。又经政府支持,修葺一新。今年4月19日举行复堂庆典。

自适应视频内容的隐密信道方案

文章提出了一种自适应视频内容的隐密信道方案。该方案从视频图像纹理估计和视频帧间运动估计两个方面对原始视频内容进行了复杂度分析,选择视频序列中那些复杂度高的图像区域作为待隐密的候选载体集合;隐密通信信道依赖于临时共享密钥从候选集合中随机采样;构建的隐密信道容量自适应于集合中载体复杂度;结合了视频量化压缩编码过程,将事先置乱的密信嵌入在载体图像的离散余弦变换(Discrete Cosine Transform,DCT)/量化系数上,形成含密的视频数据流。最后,方案提出了共享密钥的算法,解决了密信提取需要原始载体的问题,接收端则根据临时共享密钥对视频进行解码,在不影响视频正常播放的同时正确提取出密信。该方案的优点是隐密信道的容量随着视频内容的变化而自适应地变化,密信散布在复杂度高的视频序列图像区域,隐蔽性高。同时,嵌/解密过程和视频压缩编/解码相结合,保证了密信的嵌入不明显改变视频的传输码流长度。实验结果表明,方案有较小的误码率和失真率,但是隐密传输的可靠性和安全性较高。

基于WSR三位一体背景下高校研究型实验室安全管理研究

针对实验室开放创新出现的新问题,在高校分析研究型实验室安全特点的基础上因地制宜,以物理-事理-人理方法论(简称“WSR”)管理新思路,形成了以“人理”为主导的三方面协作安全管理模式,明确了实验室安全管理的操作流程,构建了一套基于WSR三位一体的高校实验室安全管理运作模式,使实验室管理更有针对性、时效性、可操作性。

发酵槐米液中有效成分检测方法的建立

目的建立利用高效液相色谱法(HPLC)测得槐米发酵液中芦丁和槲皮素含量的方法。方法采用发酵法提高槐米中的芦丁和槲皮素含量。采用色谱柱为Phenomenex Gemini 5μC18 110A(250 mm×4.6 mm I.D.,5μm);流动相为甲醇(B)-水(A)(0.05%甲酸)的溶剂系统线性梯度洗脱[0 min→15 min→20 min→25 min→26 min→36 min,甲醇-水(0.05%甲酸)比例为35:65→50:50→55:45→60:40→35:65→35:65];流速1.0 m L/min,槲皮素的检测波长254 nm,芦丁的检测波长为257 nm,柱温25℃。结果芦丁和槲皮素在0.031~1 mg/m L质量浓度范围线性关系良好(R12=0.9997,R22=0.9991);精密度RSD分别为芦丁0.997%,槲皮素0.392%;稳定性RSD分别为芦丁0%,槲皮素0.05%;重复性RSD分别为芦丁1.405%,槲皮素1.649%;平均加样回收率分别为芦丁93.90%,RSD 1.55%,槲皮素为98.55%,RSD 1.65%。3批槐米供试品溶液中芦丁的含量为(19.9199±0.1436)mg/g,槲皮素的含量为(0.6501±0.0089)mg/g。结论检测方法准确可靠、简便,适用于槐米发酵液中芦丁和槲皮素的含量测定。

纳豆菌发酵槐米提高芦丁和槲皮素含量及体外活性的研究

槐米（[1]）（Flos Sophorae Immaturus）为豆科植物槐树（Sophora japonica）的干燥花及花蕾,是药食同源的一种药材,其中芦丁和槲皮素是主要药用成分,具有清热,凉血,止血的功效,主要用于降低人体血脂和胆固醇,治疗高血压、心血管疾病等多种疾病[2]。本研究将纳豆菌和槐米共同发酵,通过单因素实验、正交试验获得最佳发酵条件提高芦丁、槲皮素及总黄酮的含量,