绞股蓝皂苷脑干缺血性损伤保护作用及机制探讨

目的：探讨绞股蓝皂苷对脑干缺血性损伤的保护作用及其作用机制。方法：建立犬脑干缺血模型。在缺血前３ｈ，经十二指肠灌注给予绞股蓝皂苷０．１５ｇ·ｋｇ－１。观察脑干听觉诱发电位（ＢＡＥＰ）及病理（光镜及电镜）恢复率、磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）和ＳＯＤ活性的动态变化。结果：在基底动脉夹闭后１，３，６及１２ｈ，绞股蓝皂苷组ＢＡＥＰ及病理恢复率逐渐升高，ＰＬＡ２活性逐渐降低（晚期突出），ＳＯＤ活性逐渐升高（早期明显），与缺血组比较，均有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论：绞股蓝皂苷对犬脑干缺血有较好的保护作用，其机制可能与升高ＳＯＤ活性及降低ＰＬＡ２活性有关，早期以升高ＳＯＤ活性为主。

一种简易的平行板流动腔系统的应用

为了解切应力对培养内皮细胞的生物学作用,我们建立了一种简易的平行板流动腔系统,通过本系统可以产生0∽48dyn/cm2的稳定层流切应力,应用本系统观察了切应力对内皮细胞形态、纤维状肌动蛋白(F-actin)及球状肌动蛋白(G-actin)的影响,结果发现在12h作用时间内,12、24、48dyn/cm2切应力作用下,可见细胞中央顺细胞长轴排列的应力纤维(F-actin)逐渐演变为顺血流方向排列,F-actin的含量逐渐增多,G-actin含量逐渐减少,而细胞形态无显著改变。表明这种简易平行板流动腔系统培养的内皮细胞受到的切应力作用是确实可靠的。

切应力对内皮细胞组织因子表达上调的影响及其作用机制

研究切应力对内皮细胞组织因子表达的影响及其作用机制。利用原位杂交和免疫组织化学观察组织因子基因、Sp1和Egr 1的mRNA转录及蛋白表达。切应力作用采用平行板流动腔系统给予。结果发现 ,在静置培养内皮细胞中 ,组织因子基因mRNA及蛋白表达极低 ,促凝活性也低。Sp1蛋白表达在胞核较高 ,Sp1mRNA表达在胞浆较高。Egr 1在胞核和胞浆均无表达或表达极低。在切应力 (1.2、2 .4及 4 .8Pa)作用后 ,内皮细胞胞浆组织因子基因mRNA转录和蛋白合成及组织因子促凝活性升高 ,与对照组比较均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。Sp1和Egr 1基因mRNA转录和蛋白合成均有增加 (P <0 .0 5 ) ,但以Egr 1增加更显著 (P <0 .0 5 ) ,其变化趋势与组织因子基因mRNA转录、组织因子基因蛋白合成、组织因子促凝活性的变化趋势相同。结果提示 ,切应力是内皮细胞组织因子基因表达上调的触发因素之一 ,其触发机制与转录因子Egr 1和Sp1介导有关。

绞股蓝皂甙对犬脑干缺血性损伤的保护作用

用基底动脉结扎法造成犬脑干缺血.在缺血前3h十二指肠灌注给予绞股蓝皂甙(150mg·kg^（-1）).脑干缺血后6h的观察表明,绞股蓝皂甙减轻神经元缺血性损害(光镜及电镜),改善脑干听觉诱发电位(BAEP)的异常变化,降低缺血导致的磷脂酶A_2(PLA_2)活性升高,增强超氧化物岐化酶(SOD)活性.结果表明绞股蓝皂甙对脑干缺血性损伤有保护作用,其机制可能与其拮抗自由基和钙相关性损伤有关.

硫代磷酸酯寡核苷酸的合成及其对内皮细胞组织因子(Tissue factor,TF)基因表达及TF促凝活性的作用

为合成与 TF基因启动子区切应力反应元件 ( Shear stress responsive element,SSRE)形成三链 DNA的硫代磷酸酯寡核苷酸 ( Triple helix- forming phosphorothioate oligodeoxynucleotides,TFO- ps) ,探讨其对内皮细胞TF基因表达及 TF促凝活性的影响。我们设计反向 TFO ( T2 1GTa)序列 ,采用固相亚磷酰胺三酯固相法合成TFO。在 TFO的 3′末端进行硫代磷酸酯修饰。应用电泳迁移分析 ( Electrophoretic mobility shift assays,EMSA)观察寡核苷酸和硫代脱氧寡核苷酸的亲和性。在 ECV3 0 4内皮细胞株观察 γ- 32 P标记硫代磷酸酯 TFO的细胞摄取及其对 TF基因表达的影响。结果显示 ,TFO- ps( T2 1Gta- ps)与靶序列能形成三链 DNA,其 Kd值为 3 .6× 10 - 1 0 M。在内皮细胞株 ECV3 0 4细胞 ,TFO- ps( T2 1GTa- ps)的细胞吸收率为 11.65 % ,主要分布在核沉淀 ,约占吸收总量的77.2 5 % ,显著降低内皮细胞 TF基因 m RNA表达及 TF蛋白合成的平均光密度 ( AOD)值 ,显著降低 TF的促凝活性。以上结果表明 ,TFO- ps( T2 1GTa- ps)具有较好的抗凝活性 ,其机制与抑制

组织因子、Egr-1及Sp1在大鼠狭窄颈动脉内皮细胞的表达

目的研究在体动物颈动脉狭窄处内皮细胞组织因子基因的切应力性表达规律及其机制。方法实验分为对照组和颈动脉狭窄组,套扎法建立左颈总动脉狭窄模型,狭窄组又分为0.5 h1、h3、h6、h、12 h1、d、3 d和7 d8个时间点,术后不同时间点用原位杂交和免疫组织化学法,检测组织因子、Egr-1和Sp1的mRNA和蛋白表达,用图像分析系统测定内膜平均灰度,进行统计学分析。结果对照组内皮细胞组织因子、Egr-1及Sp1的mRNA转录和蛋白合成弱;狭窄30 min后,与对照组比较内皮细胞胞质组织因子基因mRNA转录和蛋白合成升高(P<0.05),内皮细胞胞核和胞质Egr-1和Sp1基因mRNA转录和蛋白合成均增加(P<0.05),但以Egr-1增加更显著(P<0.05),其变化趋势与组织因子基因mRNA转录及蛋白合成的变化趋势相同。组织因子基因mRNA转录和蛋白合成于6 h达到峰值,Egr-1基因mRNA转录和蛋白合成于3 h达到峰值,Sp1基因mRNA转录和蛋白合成于1 h达到峰值,与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。结论颈动脉狭窄时,切应力能够诱导动脉狭窄处内皮细胞组织因子基因表达,其表达与内皮细胞转录因子Egr-1和Sp1介导有关。

形成三螺旋DNA的寡核苷酸抑制内皮细胞组织因子基因的表达

为探讨形成三螺旋DNA的寡核苷酸是否对切应力诱导内皮细胞组织因子基因表达有抑制作用 ,针对内皮细胞组织因子基因启动子内切应力反应元件 ,设计反向脱氧寡核苷酸序列T2 1GTa,采用固相亚磷酰胺三酯固相法合成脱氧寡核苷酸。在脱氧寡核苷酸的 3’末端进行硫代磷酸酯修饰。应用电泳迁移分析观察寡核苷酸和硫代脱氧寡核苷酸的亲和性。在ECV30 4内皮细胞株观察γ 32P标记硫代磷酸酯三螺旋DNA寡核苷酸的细胞摄取及其对组织因子基因表达的影响。结果发现 ,硫代磷酸酯寡核苷酸T2 1GTa ps与靶序列能形成三链DNA ,其Kd值为 3 .6× 1 0 1 0 mol L。在内皮细胞株ECV30 4细胞 ,三螺旋DNA寡核苷酸 ps (T2 1GTa ps)的细胞吸收率为 1 1 .65 % ,主要分布在核沉淀 ,约占吸收总量的 77.2 5 % ,显著降低内皮细胞组织因子基因mRNA表达及组织因子蛋白合成的平均吸光度值 ,显著降低组织因子的促凝活性。此结果提示 ,硫代磷酸酯寡核苷酸T2 1GTa

动脉壁切应力在颈动脉狭窄中的作用

颈动脉分叉部动脉粥样硬化梗阻性疾病的起始与进展的血液动力学机制,在过去数十年被广泛研究。注意力集中在发现斑块最多的颈动脉球部或窦部。本文作者综述了颈动脉分叉部复杂的局部血液动力学改变,也包括了血液动力学改变所引起的特殊的细胞生物学反应的主要进展。这对于我们理解颈动脉窦部粥样硬化的血液动力学机制,改善血管内微创治疗与非创伤性治疗具有一定意义。

氟桂嗪对犬脑干缺血性损伤的保护作用

我们建立了犬脑干缺血模型，以ＢＡＥＰ和组织病理（光镜和电镜）改变作指标，观察了氟桂嗪（ＦＮＺ）对脑干缺血性损伤的保护作用。结果发现，对照组ＢＡＥＰ和病理恢复率分别是３５．７％和３２．１％，而ＦＮＺ保护组的恢复率分别是６９．６％和６４．３％，两组间有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。表明ＦＮＺ对犬脑干缺血确有较好的保护作用。

急进高原对脑血流动力学的影响研究

目的:观察急进高原对脑血流动力学的影响。方法:对某部新兵110例在进高原前后1～2天,采用Companion彩色经颅多普勒超声诊断仪,检测并记录基底动脉(BA)、椎动脉(VA)、大脑中动脉(MCA)、大脑前动脉(ACA)、大脑后动脉(PCA)收缩期峰流速(Vs)、舒张期末峰流速(Vd)、平均峰流速(Vm)、脉动指数(PI)和阻力指数(RI)等血流动力学指标。结果:(1)脑前循环血流量指标中,双侧MCA的Vm值显著增加,RACA的Vs值显著降低(P<0.01),双侧ICA和双侧MCA的Vd值显著增加(P<0.05,P<0.01);(2)脑后循环血流量指标中,BA的Vm值显著增加,双侧VA及RPCA的Vs值显著降低,RVA和BA血管的Vd显著增加(P<0.05,P<0.01);(3)前后循环的脑血管顺应性及灌注均增加,外周阻力均降低(P<0.01)。结论:急进高原者通过前后循环脑血流、脑血管壁顺应性及外周阻力的变化,可增加脑血管的远端血流灌注,代偿高原低压性缺氧导致的低氧血症。

抑制脑血栓形成的硫代磷酸酯脱氧寡核苷酸的亲和性研究

目的为抑制脑血栓形成,合成与TF基因启动子区切应力反应元件(SSRE)形成三链DNA的硫代磷酸酯寡核苷酸(TFO)。方法设计TFO序列14条,采用固相亚磷酰胺三酯固相法合成TFO。硫代磷酸酯修饰在TFO的3'末端进行。应用电泳迁移分析(EMSA)观察寡核苷酸和硫代脱氧寡核苷酸的亲和性。结果在设计合成的14条寡核苷酸中,与靶序列能形成三链DNA的TFO只有T21GTa、T14GTa和T15GTa,其Kd值分别为3.6×10-10、1.0×10-9和1.0×10-8(M),经硫代磷酸酯修饰后分别为:2.3×10-9、3.8×10-9和1.5×10-8。结论硫代磷酸酯修饰的T21GTa-ps、T14GTa-ps和T15GTa-ps能够与TF基因启动子SSRE的3个位点形成三链DNA。

海风藤、氟桂嗪和绞股蓝皂甙对犬脑干缺血保护作用的对比研究

结扎犬脑基底动脉后６ｈ，发现脑干听觉诱发电位ＢＡＥＰ，各波的峰潜伏期（ＰＬ）及峰间期（ＩＰＬ）明显延长（Ｐ＜０．０１）；脑干神经元形态结构发生缺血性改变（光镜及电镜），脑干组织ＰＬＡ２活性升高５．８倍（Ｐ＜０．０１），超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性降低５８．８％（Ｐ＜０．０１）。海风藤３００ｍｇ·ｋｇ－１、氟桂嗪１ｍｐ·ｋｇ－１、绞股蓝皂甙１５０ｍｇ·ｋｇ－１，分别于结扎脑基底动脉前３ｈ经十二指肠造瘘管给药，皆能缩短ＰＬ及ⅠＰＬ的延长（Ｐ＜０．０１），明显减轻神经元形态结构的缺血性改变，三者作用相当。与缺血组相比较，三药分别使ＰＬＡ２活性降低８０．２％。７４．２％和７２．４％（Ｐ＜０．０１），使ＳＯＤ活性升高２．１、１．９５和１．８４倍（Ｐ＜０．０１）。上述结果提示三药抗脑缺血损伤的作用与其降低ＰＬＡ２活性和增强ＳＯＤ活性有关。

3条硫代寡核苷酸的亲和性与内皮细胞吸收的比较研究

目的研究硫代寡核苷酸的亲和性及其在内皮细胞株的吸收与亚细胞分布。方法 利用电泳迁移分析法检测硫代寡核苷酸的亲和性;将同位素标记的硫代寡核苷酸与ECV304细胞直接孵化,24 F后测定内皮细胞的吸收率及亚细胞分布。结果3条硫代寡核苷酸(T21GTa、T14Gta及T15Gta)的亲和性(Kd值)分别为2.3×10-9、3.8×10-9及1.5×10-8(M).细胞吸收率分别为11.9％、10.8％、11.1％,核沉淀放射活性分别为77.25％、76.75％、69.32％。结论3条硫代寡核苷酸能够与内皮细胞TF基因SSRE的3个Egr-1/Spl位点结合,具有较好的透膜性、耐酶性及稳定性,能够透过内皮细胞膜和核膜,抵达核内靶基因部位。

犬脑干缺血时BAEP动态变化及海风藤的保护作用

犬脑干缺血时ＢＡＥＰ动态变化及海风藤的保护作用李黔宁王东武郑健赵士福岳桂明邓志宽何英（第三军医大学新桥医院，重庆６３００３７）本文观察了犬基底动脉结扎后脑干听觉诱发电位（ＢＡＥＰ）的动态变化并探讨了海风藤（ＰＷ）对脑干缺血的早期保护作用。Ｔａｂ．Ｐｅ...

皮质梗死后胚胎脑细胞和组织移植研究方法

胚胎脑组织块或细胞移植至皮质梗死区后,可以利用行为学试验检查移植大鼠的皮质高级感觉运动复合功能改善;应用形态学方法研究移植物的成活及其与宿主皮质各功能区建立的传入和传出纤维联系;利用电生理功能和递质分泌功能检查,判断移植物新生纤维的电生理功能和递质分泌功能。这些方法对于进一步研究胚胎脑细胞和组织块移植治疗皮质梗死具有重要的意义。

历史课堂教学贯彻新课改理念之我见

新课程改革的学科课程目标围绕知识与技能、过程与方法、情感态度与价值观三个维度展开，强化学生的创新精神、团队精神及合作探究能力，突出对学生一般能力的培养，不再刻意追求学科体系的逻辑严密、完整。基于对课程目标的上述理解，我们认为中学历史课堂的教学行为方式也应随之改变。以下就如何在历史课堂教学中贯彻新课改理念谈谈本人的一些看法。