大鼠侧脑室及鞘内注射孤啡肽对痛反应及电针镇痛的影响

孤啡肽（orphaninFQ，OFQ）是最近发现的一种门肽，为阿片受体家族中一个新成员—“孤儿受体”（orphareceptor）的内源性配基。OFQ在痛觉调制中的作用与内阿片肽明显不同。本实验在大鼠电刺激甩尾测痛模型上，观察了侧脑室（ICV）及鞘内注射（IT）OFQ对伤害性电刺激引起的痛反应及电针镇痛的影响。结果发现，大鼠ICV及IT0．1μg（0.055nmol）OFQ对痛反应无影响，而1.0μg（0.55nmol）的OFQ可明显降低痛阈；但两种剂量的0FQ阴无论是脑室还是鞘内给药，均可对抗电针镇痛；采用反义核苷酸技术阻断OFQ受体合成，大鼠痛阈升高，此时再给予OFQ，则电针镇痛效应无明显改变。表明OFQ对基础痛阈的影响与剂量有关：小剂量无影响，大剂量使痛阈降低。但无论对基础痛阈有无影响，OFQ均对抗电针镇痛。

合成胸腺素α_1的生物活性研究

利用固相多肽合成中的 Boc和 Fmoc途径分别合成了胸腺素α1 (S- Tα1 )。后者的合成产率 (去保护基后粗肽量 /理论量 )为 80 % ,大于前者的 64.2 %。在 Fmoc方法合成中 ,用 Fmoc- Asn(Trt)上羟基树脂 (HMP树脂 )提高了合成产率。经 FPLC纯化后 ,Tα1 用 HPLC、毛细管电泳、等电聚焦电泳鉴定纯度均一 ;质谱和 N端序列分析证明其符合理论值。Tα1 活性测定 ,表明 S- Tα1 能提高淋巴细胞对丝裂原刺激的增殖反应 ,增强 NK细胞杀伤活性 ,具有增加淋巴细胞产生 IFN- γ的作用 ,我们的合成产物与国外对照品 Z- Tα1 呈现相仿的活性。此工作为进一步研究 Tα1

人抑胃肽溶液构象的荧光光谱学研究

运用荧光光谱方法研究了用固相合成法得到的人抑胃肽 (GIP- 4 2 )及其类似物的内源荧光特性、I-动态荧光淬灭以及与 bis- ANS结合的荧光。结果表明 :GIP- 4 2在溶液中具有一定的构象 ,其 Trp残基荧光被 I-淬灭的结果表现为双相 ,淬灭常数分别为 11.5L/ mol和 1.2 L/ mol;GIP-4 2肽中有一疏水区能与探针 bis- ANS结合 ;在 N-端 17个残基除去后所得到的 2 5肽 (GIP- 2 5)分子中 ,Trp残基更多地暴露在水溶液中 ,更易被 I-淬灭。同时其分子中 bis- ANS结合区的疏水性很弱 ,提示 N-端 17肽对于维持人 GIP- 4 2具有活力必需的构象十分重要。此外 ,人 GIP- 4 2中的 His残基被修饰后并不改变肽中色氨酸残基的微环境的极性 ,但降低

完整乙肝病毒Dane颗粒标志物preS1蛋白检测药盒的研制

乙肝病毒表面抗原的ｐｒｅＳ１主要存在于含ＤＮＡ的４２ｎｍ乙肝病毒颗粒表面，可作为完整病毒颗粒存在的标志。我们在筛选到抗ｐｒｅＳ１单抗的基础上，研制出ｐｒｅＳ１蛋白的检测试剂盒。经实验证实，ｐｒｅＳ１蛋白与ＨＢＶ－ＤＮＡ之间有很好的相关性，符合率为８０％。该试剂盒具有专一性强，重复性及稳定性好，操作简便等优点，可以作为检测乙肝病毒复制的一个血清学指标。对正确判断病人是否带有乙肝病毒颗粒和确定乙肝感染病程具有重要的参考价值。

丁型肝炎病毒抗原肽的合成及应用

本研究设计并用固相法合成了丁型肝炎病毒与蛋白上的二个抗原肽,肽的纯度达到高压液相鉴定均.两种复肽均具有丁肝病毒抗原活性,在抗HDVELISA检测中有应用价值,混合包被的效果更佳.

点突变p53肽诱导肽特异性CTL的研究

目的探索点突变ｐ５３肽诱导细胞免疫应答的可能性，为其作为肽疫苗用于肿瘤免疫治疗提供实验依据。方法人工合成小鼠点突变ｐ５３肽Ｐ１３２Ｆ（ＬＮＫＬＦＦＱＬ，１３２Ｃｙｓ→Ｐｈｅ突变），与不完全弗氏佐剂（ＩＦＡ）或ＲＩＢＩ佐剂（ＲＡＳ）混合，皮下免疫Ｃ５７ＢＬ／６小鼠，分离脾细胞体外用肽再刺激，诱导细胞毒Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ），并以５１Ｃｒ释放法检测其杀伤活性。结果Ｐ１３２Ｆ肽加上ＩＦＡ或ＲＡＳ免疫小鼠，均能诱导肽特异性ＣＤ８＋ＣＴＬ；低剂量重组白细胞介素２（ｒＩＬ－２）能增强肽免疫效果。结论所用突变的ｐ５３蛋白具有免疫原性。

Antagonistic effect of orphanin FQ on opioid analgesia in rat

目的：研究孤啡肽（ＯＦＱ）对痛与阿片镇痛的影响．方法：脑室（ｉｃｖ）与鞘内（ｉｔｈ）给药，以大鼠甩尾模型测痛．结果：小剂量ＯＦＱ（０１μｇ）ｉｃｖ及ｉｔｈ给药对痛反应均无影响；较大剂量ＯＦＱ（０５－１０μｇ）可使痛反应增强．ＯＦＱ１－１０（ＯＦＱ的一个片段）ｉｃｖ对痛反应无影响．μ受体激动剂芬太尼（１μｇ）、δ激动剂ＤＳＬＥＴ（５μｇ）ｉｃｖ或ｉｔｈ给药，以及κ激动剂Ｕ５０４８８Ｈ（１μｇ）ｉｔｈ给药，可使痛阈明显增加．０１μｇ或１μｇＯＦＱ与上述药物合用后，痛阈增加明显减少（除鞘内与ＤＳＬＥＴ合用外）．结论：ＯＦＱ可增强大鼠的痛反应，在脑内对抗由μ和δ受体介导的阿片镇痛，在脊髓对抗由κ和μ但不是由δ受体介导的镇痛．

点突变p53抗原肽的预测及其与MHCⅠ类分子的结合

目的从肿瘤抗原的全长氨基酸序列中预测肿瘤抗原肽，据此指导肿瘤肽疫苗的设计和制备。方法采用基序（ｃｏｎｓｅｎｓｕｓｍｏｔｉｆ）预测法，经计算机ＰＥＰＭＯＴＩＦ软件预测含点突变的小鼠ｐ５３蛋白肽，并建立一个计分系统来估测预测肽与ＭＨＣⅠ类分子结合的可能性，进一步通过ＭＨＣⅠ类分子－肽结合试验和ＭＨＣⅠ类分子－肽结合稳定性试验检测它们与ＭＨＣⅠ类分子的结合力和亲和力。结果预测了３条肽，其中ｍｐ５３Ｐ１３２Ｆ（ＬＮＫＬＦＦＱＬ）能与Ｈ－２Ｋｂ结合而不与Ｈ－２Ｄｂ结合；ｍｐ５３Ｐ２４６Ｓ（ＭＧＧＭＮＲＳＰＩＬ）和ｍｐ５３Ｐ２７０Ｃ（ＧＲＤＳＦＥＶＣＶ）既不与Ｈ－２Ｋｂ结合也不与Ｈ－２Ｄｂ结合。肽与ＭＨＣⅠ类分子之间的结合与用计分系统计算的肽积分高低有关，即高分值的肽能与相应的ＭＨＣⅠ类分子结合。结论计算机ＰＥＰＭＯＴＩＦ软件配合肽计分是简便有效的ＭＨＣⅠ类分子结合肽预测法。