不同实验室间测定单胃动物饲料样品总能的一致性及可加性研究

本研究旨在比较不同实验室间测定饲料总能(GE)的变异程度及可加性,为饲料有效能值的准确测定提供参考。试验分为2个部分。内容一:考察饲料的上样量对氧弹热量计测定GE值的影响,采用单因素完全随机设计,6个饲料原料分别为玉米、豆粕、小麦麸、大豆油、菜籽粕、棉籽粕,10个饲粮上样量共计5个处理,分别设为0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 g,每个处理4个重复。内容二:考察实验室间测定饲粮GE的变异及可加性。采用单因素完全随机设计,共6个实验室,每个实验室对各样品测定4个重复。结果表明:6个饲料原料及10个饲粮GE的测定值均随上样量的增加而呈显著线性和二次曲线增加(P<0.05)。0.2 g上样量的GE测定值均显著低于0.4~1.0 g上样量相应的GE测定值(P<0.05)。在0.6~1.0 g上样量间,样品GE测定值相对差异较小。在6个实验室对比中,96个测定数据中的91个的|Z|<2。h统计量表明,实验室2的测定结果偏低,而实验室5的测定结果偏高。k统计量表明,实验室5和6的测定变异相对较大。总体上,GE测定的重复性变异系数、实验室间变异系数及再现性变异系数不超过0.64%。配对t检验表明,实验室1、3、5和6对10个饲粮GE的计算值与测定值差异不显著。而实验室2和4对10个饲粮GE的计算值与测定值差异显著(P<0.05)。6个实验室内饲粮的GE测定值对计算值的线性回归模型与Y=X重叠。由此表明,氧弹热量计测定GE的上样量应在0.6 g以上。6个实验室间测定饲粮GE值呈现较好的一致性(94.8%的满意度),实验室间的变异系数均较低。4个实验室测定饲粮GE的可加性高,2个实验室的可加性稍低。

4个实验室间测定猪饲料酶水解物能值的差异及可加性研究

本试验旨在比较4个实验室间测定猪饲料酶水解物能值(EHGE)的差异及可加性,为仿生消化法测定猪饲料的有效能值提供参考。采用单因素完全随机设计,在4个实验室内采用生长猪仿生消化方法测定6个饲料原料和由这些饲料原料配制的8个饲粮的EHGE。每个样品在各实验室设5个重复,每个重复1根消化管。结果表明:除实验室1测定的饲粮5的|Z|比分值在2~3外,其余样品的|Z|<2,且4个实验室对每个样品EHGE测定值在h统计量基线两侧均有分布,这表明4个实验室对饲料原料和饲粮EHGE测定值结果均与实验室间的平均值偏差小。4个实验室对每个样品EHGE测定值的k统计量均在2以内,表明实验室间的测定值差异不大。在4个实验室中,仅大麦、豆粕的EHGE测定值在实验室间不存在显著差异(P>0.05),而其他4个饲料原料和饲粮的EHGE测定值在实验室间均有显著差异(P<0.05),但实验室间测定值的平均相对偏差在0.23%~0.99%。实验室间除小麦麸EHGE测定值的变异系数(CV)稍大(重复性CV、实验室间CV和再现性CV分别为1.57%、1.18%和1.97%)以外,其他5个饲料原料和8个饲粮的EHGE测定值的重复性CV、实验室间CV和再现性CV分别在0.33%~0.53%、0.12%~0.91%和0.35%~1.01%。配对T检验表明,实验室1的8个饲粮EHGE计算值的平均值显著低于测定值的平均值(P<0.05),但两者相差仅为0.09 MJ/kg DM。实验室2、3、4的8个饲粮EHGE计算值的平均值与测定值的平均值差异不显著(P>0.05)。4个实验室内饲粮EHGE计算值与测定值间的相关系数均大于0.99(P<0.01)。在8个饲粮EHGE测定值对计算值的线性回归模型中,实验室1、3和4的回归直线与Y=X重叠,而实验室2回归直线的斜率与1有显著差异(P<0.05),截距与0有显著差异(P<0.05)。上述结果表明,4个实验室间测定猪饲料EHGE测定值呈现较小的差异和满意的可加性,可为猪饲料数据库的完善提供稳定的技术支撑。

基于套算法和消化率计算法估测肉鸭饲料原料代谢能的比较研究

本试验旨在研究2种计算方式对肉鸭饲料原料代谢能(ME)的影响,为采用生物学法测定肉鸭饲料原料ME时选择合适的计算方式提供参考。本研究分为2个试验。试验一:采用绝食法分5个批次测定肉鸭内源能损失的变异,同时通过排空强饲法测定10个肉鸭饲料原料配制的试验饲粮的ME,并通过2种公式计算各待测饲料原料的ME,公式1(套算法)根据基础饲粮、试验饲粮的ME及试验饲粮中基础饲粮的比例计算待测饲料原料的ME;公式2(消化率计算法)通过待测饲料原料的能量消化率乘以待测饲料原料的总能得出ME。试验二:以试验一中的10个肉鸭饲料原料配制10种验证饲粮,采用排空强饲法测定其ME,同时根据饲粮中各原料的比例及试验一中2种计算方式得出的原料ME计算饲粮的ME,比较饲粮ME计算值与实测值的差异。结果显示:1)在内源粪排泄量及内源能损失的差异上,1~3批次显著地低于4~5批次(P<0.05),内源粪排泄量与内源能损失变异系数分别在8.21%~12.20%和9.37%~15.35%变化;2)在2种计算方式间,玉米及棉籽粕的表观代谢能(AME)和真代谢能(TME)均有显著差异(P<0.05);3)根据公式1和公式2得出的饲料原料AME计算出的10个验证饲粮的AME中,计算值均显著高于实测值(P<0.05),但饲粮AME实测值对计算值的回归与Y=X均无显著差异(P>0.05)。根据公式1和公式2计算的饲料原料TME获得的10个饲粮的TME计算值中,分别有7和9个饲粮的实测值与计算值相差在400 kJ/kg以内;根据公式1和公式2计算的饲料原料TME获得的饲粮TME计算值与实测值均无显著差异(P>0.05),且饲粮TME实测值对计算值的回归与Y=X均无显著差异(P>0.05)。综上可知,TME比AME具有更好的可加性,且采用消化率计算法获得的肉鸭饲料原料的ME更为准确。

硒蛋白Sep15基因克隆、定点突变及其原核表达

克隆鉴定猪硒蛋白Sep15基因(Sep15),将其突变实现原核表达,为以猪为模型研究Sep15功能奠定基础。实验以RT-PCR从猪脾总RNA扩增出含开放阅读框(ORF)至poly(A)共1230 bp的Sep15cDNA,3'-非翻译区Sec插入元件为2型,489 bp的ORF及对应氨基酸序列与人相应序列的相似度分别为85.1%和92.7%,ORF含一个硒代半胱氨酸(Sec)密码子TGA,定点突变为半胱氨酸(Cys)的TGC后,经载体pET30转入大肠杆菌BL21(DE3),0.4 mmol/L IPTG诱导表达3 h获得融合表达产物;该产物在Western blot检测中与人Sep15 Sec下游肽段的商品化多抗产生特异性免疫印迹。猪Sep15被首次成功克隆并鉴定,其Cys突变体的原核表达产物与人Sep15 C-端抗体存在交叉免疫反应。