TN14003体外阻断SDF-1/CXCR4信号通路对骨关节炎患者软骨组织分泌基质金属蛋白酶3、9、13水平的影响

目的:探讨TN14003体外阻断基质细胞衍生因子-1/趋化因子受体-4(SDF-1/CXCR4)信号通路对骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者软骨组织分泌基质金属蛋白酶3、9、13(MMP-3、MMP-9、MMP-13)水平的影响,明确TN14003的作用机理和阻断效果。方法:对6例OA患者行膝关节置换术中采集透明软骨,切成3×3×3 mm3大小的软骨组织块(共140块),平均分为A、B、C、D四组进行体外培养,A、B、C三组分别加入TN14003、T140、AMD3100(使其在培养液中的最终浓度为1000 nmol/L),D组为空白对照组,四组培养液中均加入相同剂量SDF-1使其最终浓度为100 ng/ml,分别培养2、4、6、8、10天后取各组组织块培养液,采用ELISA检测培养液中MMP-3、MMP-9、MMP-13的含量。结果:相同时间点,MMP-3、MMP-9、MMP-13的分泌量A组低于B组(P<0.05),B组低于C组(P<0.05),C组低于D组(P<0.05);同一组内不同时间点,MMP-3、MMP-13的分泌量随时间而呈现总体降低趋势(P<0.05),MMP-9的分泌量随时间而呈现升高趋势(P<0.05)。结论:TN14003、T140、AMD3100均可阻断SDF-1/CXCR4信号通路,减低MMP-3、MMP-9、MMP-13的分泌,尤其以TN14003阻断效果最为确切。

三种携带GFP慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞的效果

背景:研究不同慢病毒对同一骨髓来源间充质干细胞的转染效果,筛选合适的细胞转染工具。目的:探究3种慢病毒对兔骨髓间充质干细胞转染效果的差异。方法:选择2周龄日本大耳白兔,髂骨穿刺抽取骨髓液,采用密度梯度离心法提取骨髓间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表面标志物表达。分别用p Tomo-GFP慢病毒、Ad-GFP慢病毒、lenti-GFP慢病毒转染骨髓间充质干细胞,流式细胞仪检测3种慢病毒的转染率。CCK-8法检测转染前后细胞生长活力变化。结果与结论:①培养出的细胞CD44阳性率为75.64%,CD34、CD45阳性率分别为6.14%、9.48%;②pTomo-GFP慢病毒转染后GFP表达率为2.64%、Ad-GFP慢病毒转染后GFP表达率为16.72%、lenti-GFP慢病毒转染后GFP表达率为45.24%;③各慢病毒对细胞生长存在一定影响。p Tomo-GFP、Ad-GFP在第1-8天对细胞生长潜伏期和对数生长期存在影响,可能对前期细胞活性造成一定干扰。短期内lenti-GFP对细胞生长影响不大,但第12天时出现了细胞生长情况变化,考虑对细胞远期活力存在影响;④选用lenti-GFP慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞能够在保证细胞正常生长的情况下提供最大的转染效率,适用于兔骨髓间充质干细胞的示踪及基因转染等相关研究。

T140体内靶向阻断SDF-1/CXCR4信号通路对SDF-1及MMPs的影响

目的:明确T140体内靶向阻断SDF-1/CXCR4信号通路对基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及基质金属蛋白酶(MMPs)的影响,探讨T140延缓软骨退变的作用。方法:健康9月龄雄性Hartley豚鼠36只,随机分成A组(实验组)、B组(实验对照组)、C组(空白对照组),每组12只。2、4、6、8、10、12周时,ELISA法测血清中SDF-1含量。12周时,RT-PCR法测关节软骨内基质金属蛋白酶(MMP-3、MMP-9、MMP-13)m RNA的表达。结果:A组血清中SDF-1含量逐渐降低,B、C组逐渐升高,同一时间比较,A组与B、C组有明显差异(P<0.05);A组MMP-3、9、13 m RNA的表达量低于B、C组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:T140靶向阻断SDF-1/CXCR4信号通路,减少血清中SDF-1的分泌并降低软骨内MMPs m RNA的表达量,从而减缓关节软骨的退变。

信号通路在骨性关节炎发病中的作用

骨性关节炎(osteoarthritis,OA)是一种多种原因导致关节软骨退变和继发性骨质增生为主的慢性滑膜关节疾病,其发病机制复杂多样,尚不完全清楚,目前对OA采取的治疗方法较多,但效果均不明显,只能短期缓解症状、改善关节功能,不能阻止OA的病理进程,更不可能逆转关节软骨的退变.目前国内外对信号通路与骨性关节炎的研究成为一个热点,大量研究证实骨性关节炎的发生、发展与SDF-1/CXCR4、MAPK、Wnt、OPG/RANKL/RANK等信号通路均有关系,但没有任何一条信号通路能完全解释骨性关节炎的发病机制,也不能靠阻断单一信号通路而达到治疗OA的效果,故而针对治疗OA发病机制的研究和新型药物的研制成为了目前研究的热点.就目前国内外关于信号通路在骨性关节炎发展中的作用进行综述,希望对骨性关节炎的研究和治疗提供理论依据.

T140靶向阻断SDF-1/CXCR4信号通路对豚鼠关节软骨Ⅱ型胶原蛋白及聚集蛋白聚糖的影响

目的:明确T140体内靶向阻断SDF-1/CXCR4信号通路对豚鼠关节软骨Ⅱ型胶原蛋白及聚集蛋白聚糖的影响,探讨T140减缓软骨退变的作用。方法:健康9月龄雄性Hartley豚鼠36只,随机分成A、B、C三组,A组为实验组,B组为实验对照组,C组为空白对照组,每组12只。于12周时,获取膝关节软骨,采用RT-PCR法检测Ⅱ型胶原蛋白(ColⅡ)及聚集蛋白聚糖m RNA的表达;Western blot检测ColⅡ含量。结果:RT-PCR检测结果显示A组Ⅱ型胶原蛋白及聚集蛋白聚糖的m RNA表达量高于B、C组,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot检测结果发现A组ColⅡ含量高于B、C组(P<0.05)。结论:T140于体内靶向阻断SDF-1/CXCR4信号通路,减少关节软骨Ⅱ型胶原蛋白及聚集蛋白聚糖的降解,进而减缓关节软骨的退变。

五种松质骨理化性质的比较

背景:研究表明,异种松质骨衍生骨移植修复材料具有骨缺损修复能力,但鲜有异种骨与人骨成分对比的报道。目的:分析猪、牛、人胫骨上端松质骨的化学成分、无机物相、钙磷含量、总蛋白质含量及形貌。方法:将普通猪、牛、版纳微型猪、年轻人、老年人胫骨上端松质骨片切成0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm大小的骨粒,根据不同的检测目的进行脱脂、干燥等预处理,采用傅里叶红外光谱、X射线衍射、等离子体发射光谱仪、扫描电镜、凯氏定氮法检测其化学成分、无机物相、钙磷含量、蛋白质含量,采用Nano Measurer 1.2与Photoshop cs6直方图功能分析电镜结果,测孔径与孔率。结果与结论:(1)5种松质骨的主要无机物相为羟基磷灰石,无机质成分主要为磷酸盐类与碳酸盐类;(2)牛松质骨中钙含量低于其余4种松质骨(P<0.05),年轻人松质骨磷含量高于猪、牛松质骨(P<0.01),普通猪与版纳微型猪松质骨中蛋白含量高于其余3种松质骨(P<0.05);(3)5种松质骨的孔径均值在400-600μm间,孔率在60%-70%间,并且以牛松质骨孔率最大;(4)结果表明,猪、牛松质骨在有机与无机物成分上与人骨存在一定的差异。

三维数字化技术在膝关节置换中的应用

目的对近年来三维数字化技术在膝关节置换术中的应用进展进行综述。方法广泛查阅国内外关于三维数字化技术在膝关节置换术中应用的研究文献,并进行分析总结。结果三维数字化技术能够获得精确的膝关节形态学、生物力学,并能够通过术前规划预测截骨量及假体型号大小,从而精确指导膝关节置换术。结论三维数字化技术应用于膝关节置换术能够减少手术误差,提高手术精度,改善临床效果。