连接粘附分子-1在人角膜上皮中的表达(英文)

目的:检测连接粘附分子-1(junction adhesion molecule,JAM-1)在正常人角膜上皮各层中的表达及分布特点并与咬合蛋白(occludin)进行比较。方法:培养人角膜上皮细胞提取细胞总RNA。以逆转录后获得的cDNA为模板PCR扩增目的基因JAM-1及occludin。流式细胞仪检测JAM-1蛋白表达。双重免疫荧光观察JAM-1与occludin在正常人角膜上皮组织的原位表达。结果:通过RT-PCR在培养人角膜上皮细胞中检测到JAM-1与occludin扩增片段;流式细胞仪检测到JAM-1蛋白表达;双重免疫荧光结果显示occludin染色主要位于表层上皮层细胞之间;而JAM-1荧光染色不仅见于上皮表层,在整个上皮层细胞之间均可见其荧光反应。结论:Occludin主要位于正常人角膜上皮表层细胞之间,JAM-1在正常人角膜上皮的全层中均有表达。

连接黏附分子-1和咬合蛋白在人角膜上皮中的表达

目的检测咬合蛋白(Occludin)和连接黏附分子-1(junction adhesion molecule-1,JAM-1)在正常人角膜上皮各层中的表达。方法培养人角膜上皮细胞提取细胞总RNA,以逆转录后获得的cDNA为模板,PCR扩增目的基因JAM-1及Occludin。流式细胞仪检测JAM-1蛋白表达。双重免疫荧光观察JAM-1与Occludin在正常人角膜上皮组织的原位表达。结果RT-PCR在培养人角膜上皮细胞中检测到JAM-1与Occludin扩增片段;流式细胞仪检测到JAM-1蛋白表达;双重免疫荧光结果显示Occludin染色主要位于表层上皮层细胞之间;而JAM-1荧光染色不仅见于上皮表层,在整个上皮层细胞之间均可见其荧光反应。结论Occludin主要位于正常人角膜上皮表层细胞之间,JAM-1在正常人角膜上皮的全层中均有表达。

Reis-Bücklers角膜营养不良患者TGFBI基因突变

目的 探讨中国Reis Bücklers角膜营养不良患者的TGFBI基因的突变特征及其与临床表现的关系。方法 对于彼此无亲缘关系的两家系 10例患者及其家族中 2名正常成员进行基因分析。采取外周血 10ml,制备外周血白细胞基因组DNA,应用合成的特异性引物,聚合酶链反应(PCR)分别扩增TGFBI基因的第 4、12外显子,将基因产物进行直接测序,分析相应基因序列。结果两家系均呈现常染色体显性遗传。临床上表现为角膜上皮下及前弹力膜中细小的颗粒状混浊,随年龄增长而逐渐融合、扩大呈地图样外观,符合Reis Bücklers角膜营养不良地图型的诊断。基因序列分析呈现TGFBI基因第 124密码子第二个碱基G→T碱基点突变,导致精氨酸转变为亮氨酸(R124L)。结论 中国Reis Bücklers角膜营养不良患者两家系均呈现R124L基因突变,表现为Reis Bücklers角膜营养不良地图型改变。基因分析将为疾病的确诊提供可靠依据。