目的探究HBsAg对外周血中浆样树突状细胞(pDC)环鸟甘酸-腺苷酸(cGAMP)激活IFN基因刺激蛋白(STING)通路表达IFNα的影响。方法收集2016年2月—12月于徐州医学院附属医院感染性疾病科门诊及住院的慢性HBV感染者及体检的健康成年人外周静...目的探究HBsAg对外周血中浆样树突状细胞(pDC)环鸟甘酸-腺苷酸(cGAMP)激活IFN基因刺激蛋白(STING)通路表达IFNα的影响。方法收集2016年2月—12月于徐州医学院附属医院感染性疾病科门诊及住院的慢性HBV感染者及体检的健康成年人外周静脉全血,分离提取外周血单个核细胞(PBMC)。分别在PBMC中加STING激动剂cGAMP培养后,ELISA法检测培养上清IFNα、IFNβ和TNFα水平。健康成人PBMC和HBsAg预先孵育后加入cGAMP刺激,收集上清检测IFNα。磁珠分选法从PBMC中去除pDC,加cGAMP培养后ELISA检测上清IFNα水平。健康成人PBMC中加入HBsAg和/或cGAMP刺激后采用流式细胞术计数检测pDC频数。计量资料2组间比较采用独立样本t检验。结果cGAMP体外刺激慢性HBV感染者的PBMC产生的IFNα水平显著低于健康对照,差异有统计学意义(469.72±18.95 vs 599.90±84.06,t=4.868,P=0.001)。健康人PBMC与HBsAg共培养后以cGAMP刺激产生IFNα明显低于未加HBsAg组(448.5±52.0 vs 571.0±30.8,t=4.500,P=0.011)。与未去除pDC的PBMC相比,cGAMP刺激去除pDC的PBMC分泌IFNα水平明显降低(164.50±40.73 vs 339.50±35.33,t=6.482,P=0.001)。与cGAMP刺激后的健康成人PBMC相比,pDC在HBsAg预先孵育后再以cGAMP刺激的PBMC中的频数明显降低(0.12%±0.04%vs0.24%±0.04%,t=5.176,P=0.014)。结论HBsAg对cGAMP激活pDC中STING通路表达IFNα有抑制作用。展开更多
文摘目的探究HBsAg对外周血中浆样树突状细胞(pDC)环鸟甘酸-腺苷酸(cGAMP)激活IFN基因刺激蛋白(STING)通路表达IFNα的影响。方法收集2016年2月—12月于徐州医学院附属医院感染性疾病科门诊及住院的慢性HBV感染者及体检的健康成年人外周静脉全血,分离提取外周血单个核细胞(PBMC)。分别在PBMC中加STING激动剂cGAMP培养后,ELISA法检测培养上清IFNα、IFNβ和TNFα水平。健康成人PBMC和HBsAg预先孵育后加入cGAMP刺激,收集上清检测IFNα。磁珠分选法从PBMC中去除pDC,加cGAMP培养后ELISA检测上清IFNα水平。健康成人PBMC中加入HBsAg和/或cGAMP刺激后采用流式细胞术计数检测pDC频数。计量资料2组间比较采用独立样本t检验。结果cGAMP体外刺激慢性HBV感染者的PBMC产生的IFNα水平显著低于健康对照,差异有统计学意义(469.72±18.95 vs 599.90±84.06,t=4.868,P=0.001)。健康人PBMC与HBsAg共培养后以cGAMP刺激产生IFNα明显低于未加HBsAg组(448.5±52.0 vs 571.0±30.8,t=4.500,P=0.011)。与未去除pDC的PBMC相比,cGAMP刺激去除pDC的PBMC分泌IFNα水平明显降低(164.50±40.73 vs 339.50±35.33,t=6.482,P=0.001)。与cGAMP刺激后的健康成人PBMC相比,pDC在HBsAg预先孵育后再以cGAMP刺激的PBMC中的频数明显降低(0.12%±0.04%vs0.24%±0.04%,t=5.176,P=0.014)。结论HBsAg对cGAMP激活pDC中STING通路表达IFNα有抑制作用。