两种石斑鱼及其杂种子代的分子鉴定

针对在分类上存在混淆的点带石斑鱼和斜带石斑鱼,在形态学基础上,运用mtDNA Cytb基因扩增序列分析、RAPD、AFLP等分子标记技术对两种石斑鱼的遗传关系进行了研究.研究结果表明:(1)点带石斑鱼与斜带石斑鱼的分化已达到种间水平,mtDNA Cytb基因序列相似度为94.4%,AFLP扩增片段的遗传相似率为0.753 9;(2)两种石斑鱼存在杂交现象,RAPD、AFLP的扩增谱图中均获得亲本与子代的特异性条带,父本对杂交子代的遗传影响略大于母本;(3)AFLP标记在点带和斜带石斑鱼及其杂交子代中的遗传符合孟德尔遗传规律,可用于构建两种石斑鱼的遗传连锁图谱.研究结果将对两种石斑鱼种质资源的保护及人工繁育的可续性提供重要参考.

鱼类MHC基因的研究进展

MHC是高度多态的基因群,广泛分布于各种脊椎动物体内,其除了具有免疫功能外,还在其它许多方面起作用.由于MHC基因的多态性,使其在脊椎动物的遗传、进化、行为、保护及生态等许多方面的研究倍受关注.综述了自鱼类MHC基因的研究起步以来,国内外有关该基因的研究报道,包括其结构、功能和遗传特性等,并对其在鱼类种群遗传学及遗传育种中的应用前景做了展望.

赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)MHC IIB基因的克隆与表达多态性分析

主要组织相容性复合体（Major histocompatibility complex，MHC）是脊椎动物体内重要的非特异性免疫基因之一。为了研究赤点石斑鱼的MHC基因的结构与表达特性，本研究运用RACE，Realtime PCR及SSCP等技术，首次成功克隆获得赤点石斑鱼（Epinephelus akaara）非特异性免疫因子MHC IIB基因的4个cDNA全序列，序列全长为1195～1355bp，含有3’UTR、启动子、多肽结合区（β1）、IGC区（β2）、跨膜区、胞质区和5’UTR区，编码区大小为750bp。氨基酸序列分析发现赤点石斑鱼MHC IIB分子具有经典MHC蛋白分子的空间结构，在多肽结合区存在极其丰富的变异，β1区由1个α螺旋与4个反向平行的β折叠构成多肽结合区，β2区由多个β折叠构成2个反向平行的三明治结构。利用SSCP技术研究了赤点石斑鱼MHC IIB的表达多态性，发现其在头肾、心、肝等12个组织器官中均能有效表达，表达多态性也异常丰富。此外，根据MHC IIB分子中相对保守的IGC区氨基酸序列构建了脊椎动物的系统进化树，也表明了该分子的IGC区氨基酸序列可以作为研究鱼类物种间进化关系的良好标记。

斜带髭鲷野生与养殖群体遗传结构的ISSR分析

采用ISSR分子标记技术,对斜带髭鲷3个群体(柘林湾人工繁育群体、厦门湾人工繁育群体和厦门近海捕捞野生群体)的遗传多样性水平和群体遗传结构进行了研究.筛选出17个ISSR引物对3个群体共54个样品进行扩增,共得到145个清晰的扩增位点,其中多态性位点80个,多态位点百分率为55.17%.Popgene分析结果表明:厦门野生群体的遗传多样性水平最高(PPB=51.72%,h=0.182 6,I=0.271 9),略高于其他2个人工繁育群体的遗传多样性水平.群体间的Nei’s遗传分化系数和基因流分别为:0.087 6和5.209 8.表明斜带髭鲷3个群体的遗传分化尚未达到种群的分化水平.本文通过对斜带髭鲷野生群体及人工繁育群体遗传结构和遗传多样性水平的研究,为其种质资源的科学管理提供理论依据.

6种鱼类肌肉组织肌苷酸的检测分析

采用高效液相色谱技术，在国内首次测定了条纹斑竹鲨（Chilocsyllium plagiosum）、大黄鱼（Pseudosci—aena crocea）、鳜（Siniperca chuatsi）、青石斑鱼（Epinephelus awoava）、牙鲆（Paralichthys olivaceus）和乌塘鳢（Bostrichthys sinensis）等6种鱼类新鲜和冻存肌肉组织中肌苷酸含量。结果表明：（1）不同鱼类肌肉组织中肌苷酸质量比不同，牙鲆新鲜肌肉组织中肌苷酸质量比最高，为4．214mg／g，其余5种鱼类为2，365～3，634mg／g。（2）10d冻存试验中，经～70℃超低温冻存，6种鱼类冻存肌肉组织中肌苷酸质量比均高于新鲜肌肉组织，大黄鱼肌肉组织冻存1d肌苷酸质量比达最大值，鳜肌肉组织冻存10d肌苷酸质量比呈上升态势未出现最大值，其余5种鱼类肌肉组织肌苷酸质量比均在冻存第5天达到最大值。长时间的冻存将会降低食用鱼肉中肌昔酸质量比，导致鲜味下降，但经1周左右短时间的冻存后可明显提高鱼肉中肌苷酸质量比，增加鲜味，提高食用价值。

厦门近海横带髭鲷野生群体遗传结构分析

采用RAPD和ISSR分子标记技术对厦门近海横带髭鲷野生群体46个个体进行遗传多样性分析.在RAPD分析中筛选出31个随机引物,共扩增产生235个可统计的条带,其中多态性条带106个,多态位点百分率为45.11%,Shan-non′s遗传多样性指数为0.243 0;在ISSR分析中筛选出16个ISSR引物,共扩增产生119个可统计的条带,其中多态性条带76个,多态位点百分率为63.78%,Shannon′s遗传多样性指数为0.348 9.与其它鱼类横向对比显示,厦门近海横带髭鲷野生群体的遗传变异处于中上水平,具有较高的遗传多样性.

基于线粒体DNA细胞色素b序列分析3个条纹斑竹鲨群体的遗传结构和遗传分化

测定和分析了广东、福建、海南3个不同地理群体共71尾条纹斑竹鲨Chiloscyllium plagiosum的线粒体细胞色素b(mtDNA cyt b)全序列。结果表明,条纹斑竹鲨cyt b基因全长1146bp,具15个单倍型。较低的核苷酸多样性(π=0.00254)及单倍型多样性(h=0.7195)提示条纹斑竹鲨线粒体DNA的进化速率较慢。各群体内的Tajima’s D检验的结果均不显著(P>0.10),表明各群体进化过程中未出现扩张和持续增长,群体大小维持稳定。NJ树和单倍型网络图结果表明较早出现的是广东群体,福建群体较晚出现。通过计算其遗传距离值、估算其基因流(Nm)及进行AMOVA分析,均显示福建群体与海南和广东群体的分化最远,而海南及广东群体间分化不明显。研究表明距离隔离是条纹斑竹鲨福建、广东和海南群体遗传分化的重要因素。

赤点石斑鱼MHC IA基因的克隆与表达多态性分析

采用RACE技术,成功克隆获得赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)非特异性免疫因子MHC IA基因的4个cDNA全序列,序列全长为1 680bp,含有3′UTR、启动子、多肽结合区(α1)、IGC区(α2)、跨膜区、胞质区和5′UTR区,编码区大小为1 074～1 080bp,共编码357～359个氨基酸,推测蛋白质分子质量约41.66ku.氨基酸序列分析发现赤点石斑鱼MHC IA分子具有经典MHC蛋白分子的空间结构,在多肽结合区则存在极其丰富的变异.利用Real time PCR和SSCP技术研究了赤点石斑鱼MHC IA的组织表达特异性和表达多态性,发现其在头肾、心、肝等12个组织器官中均能有效表达,在头肾,脾,胸腺等免疫组织表达量不仅高,表达多态性也异常丰富,而在与外界环境接触较多的鳃、肌肉、肠等组织表达较弱.此外,根据MHC IIB分子中相对保守的IGC区氨基酸序列构建了脊椎动物的系统进化树,也表明了该分子的IGC区氨基酸序列可以作为研究鱼类物种间进化关系的良好标记.

赤点石斑鱼ICLP基因的克隆和序列分析

MHC class II invariant chain-like proteins（ICLP）因子与免疫反应密切相关，其参与对抗原的处理，保证多肽不被进一步降鹪为氨基酸．通过RACE反应获得赤点石斑鱼ICLP2cDNA全序列，全长1837bp，包括44bp的5’UTR区，861bp的开放阅读框以及932bp的3’UTR区．编码286个氨基酸，推测的蛋白质分子量为31878u．对赤点石斑鱼10个组织的1CLP2基因进行PCR扩增和测序，结果表明赤点石斑鱼ICLP2基因的表达不存在组织特异性．此外，氨基酸序列同源比对的结果表明。赤点石斑鱼与其它16种脊椎动物ICLP2的相似度在25％～78％之间．与狼鲈和鳜鱼ICLP2因子的同源程度最高，分别为78％和74％．根据ICLP的氨基酸序列构建的脊椎动物系统进化树，表明了该分子的氨基酸序列可以作为研究鱼类物种间进化关系的良好指标．

“非理性”的理性——重读表现主义戏剧《从清晨到午夜》

出纳员盗取银行金钱邀一阔太太与其私奔被拒,《从清晨到午夜》的故事自此开始。然而剧作家凯泽并未按照传统的人物命运安排,围绕主人公如何陷入困境并解决困境的情境模式进行创作,而是另辟蹊径,构建出一个个互不相关的场面,以此来塑造和表现出纳员“新人”的形象以及成为“新人”路径的破灭。该剧作无论是在创作方式还是剧作内容上都是非理性的,剧作家通过创作一个“非理性人”的非理性行为和心理,传递清醒的理性意识和思想,非理性与理性形成巨大张力,更凸显“非理性”背后的理性存在。

情感教育在初中生物学课堂教学中的渗透

初中阶段的情感变化极具过渡性和可塑性,这也决定了加强其情感教育的必要性。生物学知识与人类生活密切相关,生物学课堂教学更应当重视对学生的情感教育和科学素养的形成。

“细胞核是遗传信息库”的教学设计

摘要在“细胞核是遗传信息库”一节教学中，充分利用现代多媒体教学等直观手段以及学生间的合作交流、动手操作等方式，做到动与静结合、宏观与微观结合、形象生动、重点突出、最终易化难点。

枫桥经验视域下对城市社区网格化管理数字化转型研究

自20世纪60年代诸暨市枫桥镇基层干部实践创造“枫桥经验”以来,基层社区不断探索社会治理新方法,社区网格化管理新模式应运而生。然而,近年来,随着人们的生活质量不断提高,人们的需求也日渐丰富,传统的网格化管理已经不能满足日益复杂的社会治理问题,出现了众多问题。与此同时,大数据、云计算、人工智能等数字技术的不断更新发展,给基层社区网格化创新发展提供了契机。本文从“枫桥经验”视域出发,运用马斯洛需求层次理论和公共服务理论,通过分析诸暨江新社区在数字化网格管理转型中的创新之处,以此对城市社区实现数字化网格管理转型提出政策建议。

基于DEM的涑水河流域土壤多样性研究

以涑水河流域所经过的六个县为例,基于DEM数据、土壤图,运用GIS提取了不同地貌下的土壤分类图,并采用Fragstats软件,计算出土壤多样性、丰富度、均匀度指数,分析土壤类型的分布特征。以土壤类型为标准对土壤多样性进行了分析研究,讨论了不同地形地貌土壤多样性状况。结果表明:土壤丰富度指数从高到低依次为丘陵、平原、洼地、低山区、中山区、高山区,土壤丰富度指数与海拔的变化呈抛物线状态,与面积变化趋势不一致;在平原和丘陵区引起成土因素的变化较其它地貌多,土壤丰富度指数最高;多样性指数从高到低依次为平原、洼地、高山区、丘陵、中山区、低山区;均匀度指数从高到低依次为高山区、洼地、平原、中山区、丘陵、低山区,土壤多样性指数与均匀度指数的变化趋势不一致。