基于文献计量学的桃红四物汤临床应用研究现状分析

目的:整理总结桃红四物汤在现代临床的研究应用情况,为其临床合理应用与药理作用机制研究提供参考。方法:采用文献计量学方法,检索CNKI、Pubmed.万方等数据库截止2020年8月的临床研究文献,以“桃红四物汤”“临床”为主题进行高级检索。按条件筛选后,以文献来源、发表年代、文献类型、论文类型为分类依据进行分类,并导入VosviewerJNLP进行可视化分析。结果:经筛选后共纳入498篇文献进行分析。发表时间方面,自2010年起文献逐渐增多,在2018年达到峰值:研究类型方面,随机对照临床试验类最多,占74%;文献来源方面,包括期刊论文和学位论文,期刊论文占85%,学位论文占15%;关键词共现分析中,“黄褐斑”“月经不调”“深静脉血栓”“中医药疗法”“中西医结合疗法”“活血化瘀”出现的频次较高;治疗疾病方面,骨科中骨折的临床研究最多,其次是妇科疾病的月经不调。结论:桃红四物汤的临床应用受到现代医家的广泛关注,但临床研究的质量不高,有待于开展规范、大样本的临床研究,为该经典名方制剂的临床适应症提供科学证据。

基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap/MS和网络药理学的桃红四物汤促进骨折愈合潜在药效物质及作用机制研究

目的:探究桃红四物汤促进骨折愈合的潜在药效物质及作用靶点和通路。方法:采用UPLC-Q-Exactive Orbitrap/MS技术,结合对照品比对与文献数据,对桃红四物汤化学成分进行鉴定。通过中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)及SwissADME数据库,筛选活性成分。运用TCMSP数据库和SwissTargetPrediction数据库查找成分靶点;通过OMIM、Gene Cards数据库查找疾病靶点;采用String数据库和Cytoscape软件构建蛋白质相互作用网络;利用MetaScape数据库进行GO功能和KEGG通路富集分析;绘制与骨折愈合相关性大的通路的成分-靶点-通路图,通过网络节点度值筛选核心成分和关键靶点。使用AutoDockTools软件对桃红四物汤的核心成分与关键靶点进行分子对接验证。结果:质谱鉴别出桃红四物汤49个成分,主要为苯丙素、苯肽、苯乙醇苷、黄酮、萜、香豆素、有机酸类化合物。网络药理学预测出桃红四物汤促进骨折愈合的主要通路为AGE-RAGE、PI3K-Akt、EGFR、MAPK、IL-17通路,核心成分为槲皮素、没食子酸、咖啡酸、绿原酸、阿魏酸、苦杏仁苷、芍药苷、梓醇,关键靶点为PTGS2、MAPK1、EGFR、BCL2、VEGFA、CASP3、IL6、MMP2。分子对接结果显示,槲皮素、芍药苷、苦杏仁苷与PTGS2、IL6结合活性强。结论:桃红四物汤可通过多成分、多靶点、多通路的综合作用促进骨折愈合,该研究可为其临床应用奠定科学基础。

经典名方散偏汤化学成分分析及其干预偏头痛的作用机制预测与实验验证

目的:探究散偏汤治疗偏头痛的潜在药效物质基础和作用机制。方法:根据超高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱质谱二级碎片裂解信息结合文献,对散偏汤化学成分进行鉴定。通过ADME值筛选活性成分;运用Swiss Target Prediction数据库预测活性成分靶点;通过OMIM、GeneCards、TTD数据库筛选疾病靶点;采用STRING数据库和Cytoscape软件构建PPI网络,并筛选核心靶点;采用Metascape进行生物富集分析;通过AutoDock Tools软件进行分子对接验证;最后构建硝酸甘油致偏头痛模型,验证散偏汤通过TNF通路治疗偏头痛。结果:从散偏汤中共鉴定出35个化学成分。网络药理学预测散偏汤主要通过TNF、IL-17、cGMP-PKG等信号通路治疗偏头痛;并发现柚皮素、木犀草素、藁本内酯等是治疗偏头痛的主要核心成分。散偏汤可抑制偏头痛大鼠血清中TNF-α、MMP3、MMP9、NF-κB1、NF-κB α的升高。结论:散偏汤通过多成分、多靶点、多通路改善偏头痛,为该方剂的临床应用、制剂研发和药效研究奠定科学基础。

基于“成分群协同”与“生物过程网络”解析桃红四物汤抗血栓作用机制

目的 通过重启随机游走(random walk with restart,RWR)算法解析桃红四物汤药味配伍、成分群协同抗血栓作用的生物过程网络与关键成分群,揭示其“多成分-多靶点-多途径”抗血栓作用机制。方法 结合文献和课题组前期研究基础,通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、本草组鉴(HERB)等4个数据库,获取桃红四物汤活性成分、成分群及对应靶标基因;在人类基因数据库(Genecards)、人类孟德尔遗传综合数据库(OMIM)等4个数据库收集血栓相关基因;首先将血栓相关基因、中药和成分群靶标基因导入Metascape平台进行生物过程富集,采用Cytoscape 3.9.1软件将血栓生物过程进行聚类,初步分析桃红四物汤中药配伍、成分群协同抗血栓作用;进一步整合RWR算法、Pearson相关性分析与Z得分显著性分析,定量分析复方、单味药与成分群对血栓生物过程网络影响的相关性及显著性,筛选成分群协同抗血栓的关键生物过程、关键成分群;最后构建桃红四物汤抗血栓关键生物过程网络,分子对接筛选核心成分与核心靶点。结果纳入桃红四物汤9类成分群,血栓生物过程聚类为4类,桃红四物汤抗血栓生物过程显著性影响大小依次为氧化应激>炎症反应>细胞内信号传导>细胞活化,氧化应激与炎症反应是其抗血栓的关键生物过程;黄酮类、有机酸类、生物碱类、苯乙醇苷类、萜类、香豆素类、苯酞类是其协同抗血栓的关键成分群;生物网络构建与分子对接筛选出10个核心靶点(TNF、HMGB1、NLRP3、PARP1、PPARA、GAPDH、MMP9、IFNG、IL17A、HRAS)、6个核心成分(川芎哚、儿茶素、绿原酸、毛蕊花糖苷、羟基红花黄色素A、芍药苷)。结论 通过整合生物过程网络和机器学习算法,定量解析桃红四物汤成分群协同抗血栓的关键生物过程和核心成分、靶点,为其临床应用和基础研究提供参考。

基于Box-Behnken设计-响应面法与质量综合评价优化经典名方桃红四物汤煎煮工艺

目的遵古优化和科学评价桃红四物汤(Taohong Siwu Decoction,TSD)的煎煮工艺,为其经典名方中药复方制剂研究奠定基础。方法以指纹图谱概貌结合多指标定量为综合评价,采用Box-Behnken设计-响应面设计对加水量、浸泡时间、煎煮时间、煎煮次数进行优化。指纹图谱研究采用SunFire-C18色谱柱(150 mm×3.0 mm,3.5μm),流动相为乙腈-0.5%磷酸水溶液,体积流量为0.2 mL/min,柱温为25℃,检测波长为230 nm;建立HPLC指纹图谱,对色谱信息进行主成分分析,进一步建立UPLC多波长检测方法测定6个关键质控成分含量,计算各样品综合得分,通过响应面法进行工艺优化。结果建立了29个试验号TSD UPLC指纹图谱,选择16个共有峰,指认出地黄苷D、苦杏仁苷、羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸、藁本内酯共6个成分。主成分分析提取出4个主成分,综合得分结果显示15号工艺为最佳工艺。含量测定显示,地黄苷D、苦杏仁苷、芍药苷、阿魏酸、藁本内酯、羟基红花黄色素A 6种成分线性关系良好,综合得分结果显示,15号工艺为最佳工艺。进一步根据回归模型拟合,得到最优工艺为加水量9.90倍、浸泡时间0.58 h、煎煮时间1.19 h、煎煮次数1.60次,最终确定TSD煎煮工艺为加10倍量水,浸泡0.5 h,煎煮2次,每次1 h。结论指纹图谱质量概貌结合关键质控成分可作为TSD制备工艺的质量评控方法,得出的最佳煎煮工艺稳定可行,可用于经典名方TSD复方制剂进一步研究开发。

基于特征图谱与5种成分含量的经典名方桃红四物汤量值传递分析

目的探索桃红四物汤(Taohong Siwu Decoction,TSD)药材-饮片-水煎液-基准样品的全过程质量传递规律,为其经典名方制剂质量控制研究提供基础。方法制备15批TSD水煎液、基准样品,建立水煎液、基准样品超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)特征图谱,并采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法测定5种指标性成分的含量,计算各成分在药材-饮片-水煎液-基准样品传递过程中的转移率。结果15批TSD水煎液和基准样品的特征图谱,相似度均>0.9,共归属20个共有峰,经与对照品比对指认出11个色谱峰,分别为没食子酸、地黄苷D、苦杏仁苷、绿原酸、芍药苷、羟基红花黄色素A、阿魏酸、毛蕊花糖苷、槲皮素、苯甲酰芍药苷、藁本内酯。5种成分在水煎液、基准样品中的质量分数分别为地黄苷D 0.26~0.46、0.11~0.30 mg/g,阿魏酸0.33~0.51、0.09~0.18 mg/g,芍药苷1.07~2.43、0.48~1.49 mg/g,苦杏仁苷1.66~2.31、0.60~1.58 mg/g,羟基红花黄色素A 0.98、0.26~0.44 mg/g。药材至饮片、饮片至水煎液、水煎液至基准样品的平均转移率分别为地黄苷D101.50%、55.44%、64.11%;阿魏酸94.31%(当归药材至饮片)、93.91%(川芎药材至饮片)、37.24%、35.61%;芍药苷111.55%、72.80%、63.48%;苦杏仁苷117.34%、91.78%、64.60%;羟基红花黄色素A 93.64%、60.23%、34.19%。结论采用UPLC特征图谱结合5种成分的HPLC含量测定,分析TSD药材-饮片-水煎液-基准样品的量值传递规律,为TSD经典名方制剂开发和质量控制提供科学基础。

基于化学特征与核心功效分析经典名方桃红四物汤复方合煎与单煎差异研究

目的通过分析桃红四物汤(Taohong Siwu Decoction,TSD)合煎和单煎混合冻干粉之间化学成分、核心药效的差异性,探讨TSD经典名方制剂与单味药配方颗粒临床灵活应用的合理性。方法采用UPLC-Q-Exactive Orbitrap/MS对TSD基准样品合煎与单煎混合样品进行定性鉴定分析,同时测定合煎与单煎混合样品中9种指标成分的含量,比较单煎与合煎样品中成分的差异;并从调经止痛的核心药效建立大鼠急性痛经模型,对比评价二者药效差异。结果通过UPLC-Q-Exactive Orbitrap/MS技术分析初步鉴定并归属TSD合煎和单煎冻干粉中共有31种化学成分,在成分种类上无明显差异;进一步测定其中9种成分的含量,结果表明,单煎混合样品比较于合煎样品,芍药苷、芍药内酯苷、羟基红花黄色素A含量相对降低,而没食子酸、绿原酸、阿魏酸、洋川芎内酯I、5-羟甲基糠醛、毛蕊花糖苷含量相对升高,且对9种成分含量进行统计学分析表明二者之间含量未有明显差异(P>0.05),说明这些成分不受合煎与单煎体系的影响;干膏得率结果表明,单煎混合样品的平均干膏得率与合煎样品差异不大。调经止痛核心药效实验结果表明,与模型组相比,合煎与单煎混合样品组均能延长大鼠扭体潜伏期、降低扭体次数,显著降低血清中前列腺素F_(2α)(prostaglandin F_(2α),PGF_(2α))、前列腺素E_(2)(prostaglandin E_(2),PGE_(2))、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)与子宫组织中Ca^(2+)、内皮素-1(endothelin 1,ET-1)、NO水平(P<0.05),改善子宫上皮细胞炎症、水肿等病理变化,具有一定的缓解痛经作用,合煎和单煎混合样品在功效上未见显著差异。结论 TSD复方合煎与单煎基准样品在化学成分种类、含量及核心药效上均未见明显差异,为其复方制剂与单味药配方颗粒制剂的临床合理应用与评价提供参考依据,也进一步为实现在古代经典名方基础上随证加减单味药配方颗粒的临床个性化用药方式提供研究基础。