2021—2022年南京市野猪中8种病毒感染情况及PCV2全基因组遗传进化分析

野猪是多种重要动物疫病的天然宿主,为了解2021—2022年期间南京市野猪疫病感染情况、基因型及遗传变异特征,为野猪疫病的防控提供科学依据,在江苏省南京市共采集30头野猪的76份样品,其中30份全血样品、30份血清样品、6份粪便样品和10份组织样品(心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏组织的混合样品)用于开展猪瘟病毒(CSFV)、非洲猪瘟病毒(ASFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的病毒核酸及抗体检测。不同样品PCR检测结果显示,30头野猪中有12头PCV3阳性,阳性率为40%;PCV2阳性率为6.7%;其余病原核酸检测均为阴性。在PCV2检测阳性的野猪样品中成功获得2条PCV2全基因组序列,且均属于PCV2d基因亚型。血清抗体检测结果显示,野猪PCV3、PCV2、PRV gB、PRRSV、PEDV和FMDV A型抗体阳性率分别为53%、30%、30%、3.3%、3.3%和6.7%;所有野猪CSFV、ASFV、PRV gE抗体和FMDV O型抗体检测均为阴性。本研究揭示了南京市野猪携带或感染过多种重要病毒,需持续对野猪进行疫病监测,并研究野猪与家猪间的疾病传播规律。

孕妇风疹病毒IgG、IgM检测及意义

目的 :了解温州地区孕妇对风疹的免疫状态 ,探讨风疹病毒IgG、IgM检测对评估孕妇免疫状态及判断风疹宫内感染的作用。方法 :用ELISA法对 1471名产前检查孕妇检测风疹病毒特异性抗体IgG、IgM ,电镜检查和分子生物学法检查组织中病毒颗粒和病毒核酸。结果 :76 .0 7% (1119/ 1471)的孕妇具有免疫力 ,7.41% (10 9/ 1471)的孕妇为原发感染 ,14.14%的孕妇为易感者 ,2 .38% (35 / 1471)的孕妇IgG、IgM均呈阳性 ,其中 1例引产胎儿心肌细胞和 1例死胎的心肌、肝及脑细胞中均发现病毒颗粒。结论 :同时检测孕妇风疹IgG和IgM可以正确判断孕妇的免疫状态 ,对IgM阳性孕妇应进行连续多次检测 ,IgM持续呈阳性三个月以上的孕妇可大致确定为宫内感染。

专业学生乙肝感染状况及乙肝疫苗接种免疫效果观察

目的 :了解医学检验专业学生乙型肝炎病毒 (HBV)感染状况及接种酵母重组基因工程乙肝疫苗 (乙肝疫苗 )的免疫效果。方法 :对 115名医学检验专业学生进行乙肝血清标志物 (HBVM)检测 ,对 2 7名易感者接种乙肝疫苗并追踪免疫效果。结果 :对 HBV有免疫力的有 6 3人 (5 4.78% ) ,感染 19人 (16 .5 2 % ) ;易感者 33人 (2 8.70 % )。对 2 7名易感者全程接种乙肝疫苗后 ,发现乙肝表面抗体 (抗 - HBs)阳转率为 88.89% (2 4/ 2 7) ,2年后抗 - HBs阳性维持率 91.6 7%(2 2 / 2 7)。结论 :医学检验专业学生有乙肝病毒易感者 ,接种乙肝疫苗具有较好的免疫学效果。

风疹病毒宫内感染的实验诊断研究

目的:建立准确、快速的风疹病毒内感染实验诊断方法。方法:将疫苗株病毒稀释后接种Vero细胞,收集不同时段培养上清液和细胞,RT-PCR法检测风疹病毒RNA(培养RT-PCR法)。用直接RT-PCR法和培养RT-PCR检测可疑风疹病毒感染的胎儿组织和羊水标本。结果:直接RT-PCR法可检测模拟羊水标本中15 TCID50/ml风疹病毒RNA。培养RT-PCR法在10 TCID50的病毒感染后6h的V细胞和感染后24h的培养上清液中检出风疹病毒RNA。直接RT-PCR法和培养RT-PCR法检测4例足月产胎儿羊水均阴性;1例引产胎儿羊水直接RT-PCR法阴性,培养RT-PCR法在接种细胞后24h检出风疹病毒RNA。结论:培养RT-PCR法是一个快速、特异、灵敏的实验室诊断风疹病毒宫内感染的方法。

食管鳞癌雌激素受体α基因启动子甲基化异常

目的研究雌激素受体α(ERα)基因及启动子超甲基化与食管鳞癌的关系。方法用RT-PCR法检测2个食管鳞癌细胞系ERαmRNA表达情况,甲基化特异PCR技术(MSP)检测ERα基因启动子超甲基化,对超甲基化的细胞用脱氧胞苷(5-aza-dC)去甲基化后检测细胞ERαmRNA。MSP检测47份组织ERα基因启动子超甲基化。结果食管鳞癌细胞系存在ERα基因启动子甲基化及其引起的ERαmRNA表达缺失。57．4％(27／47)的原发性食管鳞癌细胞有ERα基因启动子区的超甲基化,其中女性患者ERα启动子超甲基化检出率73．7％(14／19),明显高于男性(15／28,53．6％,P<0．05)。结论ERα基因启动子超甲基化与食管鳞状上皮细胞癌相关。

学龄前儿童风疹疫苗免疫效果观察

目的 为有效地应用疫苗预防和控制学龄前儿童风疹。方法 对学龄前儿童接种风疹减毒活疫苗 ,并于 3年后进行免疫效果和流行病学效果观察。结果 儿童在接种BRDⅡ株风疹减毒活疫苗后 3年血清特异性IgG抗体阳性率为 83 5 0 % ,保护率为 97 94%。结论 对学龄前儿童接种风疹疫苗具有较好的免疫效果 ,应扩大对学龄前儿童和青少年的接种。

医学检验专业实验室生物安全教学的思考

医学检验专业学生在开始接触具有生物危险性物质时,普遍缺乏生物安全知识和自我保护意识;另外,目前仅临床微生物学和实验室管理学课程中涉及实验室生物安全和生物安全防护。鉴于学生将在今后的工作中长期接触各种未知病原体标本,建议开设实验室生物安全课程,加强对医学检验专业学生的实验室生物安全和防护教学。

临床微生物学基本技术标准化实验考核体系建设及应用

实验考核在临床微生物学检验教学中具有重要作用。标准化实验考核是公正、客观、科学考核学生学习效果、评价教学质量的重要手段。对临床微生物学基本技术进行标准化考核,可以促进学生的学习积极性,进一步规范基本技术,为后续学习夯实基础。

医学检验专业开设设计性实验的尝试和体会

观察在医学检验专业中开设设计性实验的可行性和效果。在微生物学实验中选择物理因素和化学因素两个实验作为设计性实验,并由学生自行设计和操作,取得较好效果。通过开设设计性实验可以激发学生学习的主动性、积极性,有利于培养学生的团结合作和创新精神。

微生物学专业英语教学尝试

微生物学专业英语教学在专业教育中具有重要的作用。通过对检验专业学生的微生物学专业英语教学进行尝试,作者认为微生物学专业英语的教学任务由专业课教师承担,有利于增强学生对学习专业英语的重视程度,提高教师的专业英语水平。

基础微生物学的实验教学改革探讨

实验教学是教学过程中的重要环节,笔者选择了基础微生物学中的部分实验,让学生自行设计实验并付诸实施,实践表明该法对培养和提高学生的自主性以及创新能力,具有不可忽视的作用。

以责任心和医德为出发点,激发学生学习兴趣

在临床微生物学实验教学中,以培养学生的责任心和高尚医德为出发点,促进学生进行自主性和开拓性的学习,激发他们的学习兴趣,并对培养学生的团队精神、创新思维能力及理论联系实际都有重要作用。

风疹病毒的研究进展

风疹病毒是风疹的病原体,因孕妇在早期感染后可引起胎儿感染,导致先天性风疹感染而受重视。近几年对病毒的研究在基因结构、复制和调节方面取得了较大的进展。该文就风疹病毒的基因组结构功能、复制调节等方面作简要的综述。

单价风疹、腮腺炎疫苗初种后的免疫持久性

目的 :评价国产单价风疹、腮腺炎疫苗初种 3年后的免疫效果。方法 :利用前瞻性的研究方法 ,以辖区内血清抗体阴性的 0～ 4岁小儿作为研究对象 ,根据是否接种腮腺炎和风疹疫苗分为接种组和对照组。在疫苗接种前和三年后各抽血一次 ,然后用 EL ISA方法检测接种前后血清中特异性抗体的浓度 ,并观察接种组和对照组这两种传染病的发病情况。结果 :腮腺炎接种组 10 2人 ,对照组 5 6人经过三年两个流行期后发病率分别为 0 .98% (1/10 2 )和 7.14 % (4/5 6 ) ;风疹接种组 95人 ,对照组 6 3人经过三年一个流行期后发病率分别为 3.16 % (3/95 )和 11.11% (7/6 3) ,均是接种组低于对照组 ,两组差异有显著性 (χ2 =4 .31,11.2 4 ,P均 <0 .0 5 ) ,腮腺炎和风疹疫苗的保护率分别为 86 .2 7%和 71.5 6 %。未接种组自然感染 (包括显性感染和隐性感染 )率较高 ,腮腺炎为 71.4 3%、风疹为 6 0 .32 %。结论 :国产单价腮腺炎和风疹疫苗有较好的免疫原性和三年以上的免疫持久性 ,可以作为目前我国 (包括广大农村 )预防腮腺炎和风疹的有利措施。其长期的免疫持久性和复种程序有待进一步研究。

地方土猪源副猪嗜血杆菌16SrRNA基因的分子鉴定及遗传进化分析

为研究地方土猪源副猪嗜血杆菌（Haemophilusparasuis，Hps）的分子遗传进化特性，应用PCR方法扩增河南地方分离株XY0501的16SrRNA基因，并进行遗传进化分析。结果显示，地方土猪源Hps的16SrRNA基因全长为822bp，与国内外参考菌株的核苷酸序列同源性为97．1％～99．3％；与血清5型参考菌株的核苷酸序列同源性高达99．3％；基于16SrRNA基因序列绘制的系统进化树显示，地方土猪源Hps与血清5型Hps参考株属于同一分支。研究结果证明，Hps可感染地方土猪并导致发病，感染来源有待进一步查明；16SrRNA基因在Hps的不同血清型中高度保守，且无品种差异。

新生仔猪急性腹泻疫情中5种病毒感染的分子检测

为查明河南省新生仔猪急性腹泻疫情的主要病因,研究分别应用RT-PCR和PCR方法对98个猪场送检的181份发病仔猪病料进行了猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(GARV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪伪狂犬病毒(PRV)的分子检测。结果显示,PEDV阳性检出率高达71.27%,与TGEV、GARV、CSFV和PRV的混合感染阳性检出率分别为2.76%、2.21%、56.91%和17.13%,与CSFV、PRV的三重混合感染阳性检出率为17.10%,而与TGEV、GARV的三重混合感染阳性检出率仅为0.55%;TGEV、GARV、CSFV和PRV的阳性检出率分别为5.52%、2.21%、69.06%和44.20%,CSFV和PRV的混合感染阳性检出率为32.04%;腹泻病原检测阳性猪场在河南省分布较为均匀,秋、冬季节比例较多,但春、夏季季节呈逐步上升趋势;规模化猪场阳性场所占比例远高于中小型猪场。研究结果证实新生仔猪急性腹泻疫情在河南全省猪场感染和流行极为普遍;季节性已日趋不明显;PEDV是引起此次疫情的最主要病因,但CSFV和PRV扮演着推波助澜的重要角色。

小牛血清甘油低温保存菌种方法介绍

目的 :寻求一种有效易行的菌种保藏方法 ,以适用于繁忙的实验室工作。方法 :选择 1989年 6月购自北京中国药品生物制品检定所的真空冷冻干燥菌株 2 8株 ,用小牛血清甘油液低温保存法与传统的半固体营养琼脂和血琼脂斜面法进行比较。结果 :球菌的复苏情况与杆菌相似 ,保存期 12个月复苏良好 ,生物学性状稳定。比较传统的半固体营养琼脂和血琼脂斜面法 ,大大延长细菌的保存期 ,特别是球菌可以从通常的血琼脂斜面液蜡的 4个月的 37.5 %提高到 14个月的87.5 % ,间隔半年时间冻融 6次以下对菌株继续低温保存影响不大。基质量少 (约 0 .4 m l)冻融时间短 ,菌体受伤程度低 ,有利复苏。复苏增菌不需另配营养基质 ,直接在小牛血清甘油液中进行 ,污染少 ,操作简便。结论 :小牛血清甘油保存菌种对大部分常用细菌保存期可达 12个月以上 ,而且球菌和杆菌差异不大 ,非常适合球菌的保存。

幽门螺旋杆菌对常见治疗药物的敏感性试验

目的:了解幽门螺旋杆菌(H.pylori)对不同种抗菌药物的耐药情况。方法:采用Kirby-Bauer法(以下简称K-B法)对92例H.pylori菌进行抗菌药物敏感实验。结果:H.pylori对甲硝唑敏感率达91.3%,对克拉霉素达92.3%,对阿莫西林达99.0%,对呋喃唑酮达99.0%,对阿奇霉素达95.6%,对左氧氟沙星达100%。结论:甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林仍是治疗H.pylori的首选药物,当以上药物耐药时,可以选用左氧氟沙星、呋喃唑酮、阿奇霉素来代替。