关于实验动物福利伦理实践中主体责任的思考

在实验动物福利伦理实践中,3R原则是其核心内容。作为这一实践活动主体的实验动物工作者在其中发挥主导作用,应承担起相应的主体责任。本文从主体责任的提出、贯彻福利原则的需要、福利伦理技术方法的需要、开发福利新产品的需要、福利伦理相关政策执行的需要以及设立实验动物纪念日和纪念碑以体现主体责任等几个方面阐述了主体责任在实验动物福利伦理实践中的作用、实现途径和意义。

实验用鹌鹑遗传检测方法的初步建立

目的建立封闭群实验用鹌鹑微卫星DNA遗传检测方法。方法通过文献检索,筛选鹌鹑微卫星位点,利用种间转移法,在鹌鹑近缘物种—鸡和鸭筛选适合鹌鹑的微卫星DNA位点。提取鹌鹑肝组织DNA作为模板,并通过PCR扩增以及琼脂糖凝胶电泳技术,对相应的位点进行筛选。最后根据所选微卫星位点扩增情况、等位基因数目和多态性等,筛选出适用于鹌鹑遗传质量检测的微卫星位点组合并建立检测方法。结果初步确定适用于封闭群实验用鹌鹑遗传检测的23个微卫星位点组合。结论初步建立了实验用鹌鹑的遗传质量检测方法。

应用微卫星位点分析3个封闭群比格犬群体遗传结构

目的采用比格犬微卫星位点对多地小型比格犬群体进行遗传检测和群体结构分析,并评价所选位点是否适用于封闭群比格犬遗传质量控制。方法选取前期验证的微卫星位点20个,采用其已优化的PCR条件,对来自3个公司(西安、北京和江苏)的小型比格犬群体进行PCR扩增和STR扫描,经基因分型后计算群体遗传参数并进行群体遗传结构分析。结果西安、北京和江苏三地小型比格犬群体在20个微卫星位点的平均有效等位基因数分别为5.45、6.80、6.10,平均杂合度为0.5852、0.6538、0.6631,香农指数为1.1774、1.3844、1.3498,多态性信息含量分别为0.5397、0.6147、0.6181,说明三群体遗传多态性信息丰富,群体遗传多样性高。所选20个微卫星位点既能反映群体多态性,又能体现各群体的特征。结论3个比格犬群体的多态性较高,达到了封闭群要求。所选20个微卫星位点比较适合用于比格犬遗传质量检测。

长爪沙鼠脑缺血和听觉障碍模型研究进展

目前分布在世界各地的实验动物长爪沙鼠均源自中国。早在1930年代,野生长爪沙鼠经人工驯养后被引入医学研究。时至今日,长爪沙鼠已经成为一种公认的“多功能实验动物”,被广泛应用于脑神经、寄生虫和微生物、肿瘤等研究领域。长爪沙鼠具有独特的脑底动脉解剖学特点,例如先天性Willis环缺失。因此,用单侧颈总动脉结扎的简易手术操作既可以构建脑缺血或脑缺血再灌注损伤模型,还可以实现同体对照。长爪沙鼠的这一解剖特点不仅增加了脑缺血的敏感性,也易于诱导耳蜗缺血。因此,长爪沙鼠在制备听觉障碍模型中也发挥重要作用。长爪沙鼠脑缺血模型和听觉障碍模型的发病过程和病理表现均与人类患者有诸多相似之处。科学家们利用长爪沙鼠构建了脑缺血模型、脑缺血再灌注损伤模型、耳蜗缺血模型、人工耳蜗植入模型、感音性神经性耳聋模型等,均取得显著成效。本文重点阐述当前长爪沙鼠脑缺血模型和听觉障碍模型的创制方法和评价指标,讨论各种造模方法的优缺点及其应用进展,以期为长爪沙鼠在这两个重要领域的应用提供理论依据和借鉴。

Big-BALB/c小鼠亚系选育前后的抗体制备效率比较研究

目的比较利用BALB/c和Big-BALB/c(简称B-BALB/c)两种亚系小鼠制备鼠痘及鼠肝炎单克隆抗体的效率,为今后通过杂交瘤进行体内诱导单克隆抗体制备时实验动物的选择提供参考。方法从常规繁育的BALB/c小鼠群体中选择4周龄体重超过正常动物5%(后期选种标准为超过10%)的个体进行选种并单独繁育,经10代选育制备B-BALB/c小鼠亚系。选择10~11周龄、雌雄各半的BALB/c小鼠和B-BALB/c小鼠各40只,分别接种用液体石蜡预处理后的鼠痘单克隆抗体杂交瘤细胞株G23或鼠肝炎单克隆抗体杂交瘤细胞株Y15,然后通过体内诱生法获取含单克隆抗体的小鼠腹水,利用间接ELISA法检验抗体效价,按照品系、性别和接种杂交瘤类型对小鼠进行分组,分析腹水产量、抗体效价和抗体产量以评估两种亚系小鼠的抗体制备效率。结果经10代选育后获得的10周龄雄性和雌性B-BALB/c小鼠体重分别比同周龄BALB/c小鼠增加了22.3%和12.8%。抗体制备过程中,B-BALB/c小鼠的耐受力比BALB/c小鼠更好,能够适应二次腹水采集;与BALB/c小鼠相比,B-BALB/c小鼠腹水产量和抗体效价均显著提高,尤以杂交瘤细胞株G23接种组更明显(均P<0.0001)。接种杂交瘤细胞株G23或Y15后,B-BALB/c小鼠的平均抗体产量(14.99×10^(4)U和33.22×10^(4)U)高于BALB/c小鼠(5.33×10^(4)U和19.31×10^(4)U)(均P<0.01)。接种杂交瘤细胞株G23后,B-BALB/c小鼠的平均单位体重的抗体产量(0.55×10^(4)U/g)高于BALB/c小鼠(0.23×10^(4)U/g)(P<0.0001)。接种杂交瘤细胞株Y15后,雌性B-BALB/c和BALB/c小鼠的单位体重抗体产量高于同亚系的雄性B-BALB/c小鼠(均P<0.01)。结论B-BALB/c小鼠在单克隆抗体体内诱导制备中可作为BALB/c小鼠的替代选择,能够达到减少实验动物使用数量、降低人力成本并提高抗体制备效率的目的。

西江航运干线整治工程通航安全影响与对策研究

西江航运干线是全国家高等级航道网的“两横”之一,承担着重要的水运通道任务,具有独特的通航特征,“十四五”时期广西内河航道提升工程建设需求大,项目建设多,航道整治工程往往位于航道航行繁忙的区域或通航环境条件不佳的位置,航道整治施工期间存在较大的船舶通航安全隐患。针对广西西江航运干线的通航特征与内河整治工程施工期间的通航安全风险点,开展整治工程通航安全影响与对策分析研究,并选取典型案例的具体做法提炼有益经验,对未来该地区内河到整治施工期间的通航安全保障具有重要的指导示范意义。

基于主题意义探究的初中英语整本书阅读教学实践

英语整本书阅读是实施课内外阅读相结合策略,提高学生英语核心素养的有效途径之一。整本书主题意义的探究有利于帮助学生开阔视野、提升思维品质、丰富文化体验,并助力其塑造良好品格和形成正确的价值观。以《秘密花园》(The secret garden)为例,教师可以引导学生通过主题导读,确定主题意义的方向;深度研读,挖掘主题意义的内涵;读后活动,丰富主题意义的表达来探究整本书的主题意义。

大学生红色文化认同及其对阅读意愿的影响

从文化认同的视角把握大学生对红色文化认同的感知水平,以期为强化大学生阅读红色文献的意愿提供数据参考。本文基于对高校大学生的调研,通过量表问卷进行实证研究,从情感承诺和行为承诺两个维度分析大学生的红色文化认同及其对阅读意愿的影响。结果发现,大学生的红色文化认同程度较高且具有层次特征;大学生红色文化认同水平存在群体差异,年级和政治面貌的影响显著;在控制个体特征后,大学生的红色文化认同对其阅读意愿具有显著的正向影响。

麦麸发酵前后不同存在形态酚类物质中酚酸含量的变化及其抗氧化活性分析

以小麦麦麸为培养基,采用三株泡盛曲霉进行固态发酵,分别提取并采用高效液相色谱法测定麦麸发酵前后不同存在形态(游离型、酯苷结合型、糖苷结合型、碱解束缚型和酸解束缚型)的酚类物质中酚酸的含量,并通过DPPH自由基清除试验、还原力试验以及抗脂质过氧化试验,研究这些酚类物质的抗氧化活性。结果表明:未经过发酵的麦麸,束缚型酚酸在总酚酸含量中约占总量的80%,其酚酸类成分主要包括对香豆酸、阿魏酸、丁香酸、对羟基苯甲酸、咖啡酸、绿原酸、没食子酸、香草酸和肉桂酸等。发酵后的麦麸,游离型酚类物质的含量显著提高。抗氧化试验的结果显示,麦麸中碱解束缚型的酚类物质和发酵后麦麸的游离型酚类物质的抗氧化性较强。试验结果说明泡盛曲霉能促使被束缚的阿魏酸游离出来,使游离型酚类物质的含量及抗氧化性显著提高;而且抗氧化活性与酚酸的种类及含量有关,咖啡酸、丁香酸和阿魏酸含量高的酚类物质,其抗氧化性也较强。

我国部分小麦地方品种Waxy基因多样性研究

利用2对STS引物、1对SSR引物和1对基因特异引物分析了1 739份中国小麦地方品种Waxy基因的变异情况。检测出Wx-A1基因缺失突变材料3份,Wx-B1基因缺失突变材料25份,Wx-D1基因缺失突变材料3份。利用SDS-PAGE方法对以上Waxy基因突变材料在蛋白质水平上进行鉴定,验证了Waxy分子标记在种质资源研究中的有效性。向育种家推荐一批具有不同Waxy基因缺失的地方种质,并提供了全部品种的缺失类型。

点云模型的双边滤波去噪算法

提出一种特征保持点云模型光顺去噪算法。该算法首先为每个采样点建立k-邻域并估算法矢,然后以该点处的微切平面为视平面,设计一个双边滤波器。算法充分考虑了模型表面法向的变化和邻域点间的距离同噪声之间的关系,通过调整采样点在法向的位置,来实现一个局部的光顺去噪过程。实验结果表明算法简单高效,同时较好地保持了模型的特征。

沙拉沙星分子印迹聚合物的制备及其吸附特性

以沙拉沙星为模板分子、甲基丙烯酸为功能单体和乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂合成了分子印迹聚合物 ,并用平衡吸附实验研究了其吸附性能。结果表明 :该聚合物对沙拉沙星有较高的亲和性和选择性 ,解离常数Kd=7.2 6× 10 - 7～ 2 .19× 10 - 5mol L。

绞股蓝多糖对2型糖尿病大鼠血糖的影响及其机制初步研究

为研究绞股蓝多糖对实验性2型糖尿病大鼠血糖、血脂的影响及其可能的机制,采用Wistar大鼠高脂高糖饲料结合小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型。通过测定空腹血糖(FBG)和葡萄糖耐量,观察灌胃给予绞股蓝多糖对糖尿病大鼠的治疗作用,同时测定大鼠的血清胰岛素(Ins)、总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)及部分抗氧化系统相关指标。结果给予绞股蓝多糖后FBG明显降低,葡萄糖耐量曲线明显降低。此外,绞股蓝多糖可明显降低2型糖尿病大鼠的血清TC、TG、LDL和丙二醛水平,提高模型鼠的血清Ins、HDL、超氧化物歧化酶活性。说明绞股蓝多糖对实验性糖尿病大鼠有明显的降血糖、降血脂作用,其作用可能与增加Ins水平,增强抗氧化能力有关。

绞股蓝多糖的抗肿瘤作用及其机制研究

通过建立小鼠移植瘤模型,采用荷瘤小鼠抑瘤率检测绞股蓝多糖对小鼠肉瘤S180的体内抗肿瘤作用;采用MTT法检测绞股蓝多糖对体外培养的肿瘤细胞增殖的抑制作用。此外,采用比色法测定了绞股蓝多糖对巨噬细胞吞噬率和产生细胞因子NO的影响;采用ELISA法测定了绞股蓝多糖对巨噬细胞产生IL—1β和TNF—α的影响。绞股蓝多糖可明显抑制移植性动物肿瘤S180的生长,并呈明显的剂量依赖关系;经绞股蓝多糖刺激后,小鼠巨噬细胞对中性红的吞噬功能明显的增强,并能显著刺激巨噬细胞分泌NO、TNF—α和IL—1β。为绞股蓝多糖的进一步开发提供了实验数据。

红景天苷对LPS诱导大鼠心肌损伤的保护作用及机制研究

研究红景天苷(Salidroside)对脂多糖(LPS)致大鼠心肌损伤的保护作用及机制。雄性清洁级SD大鼠50只,随机分组,分为对照组(NS)10只、LPS模型组(10 mg/kg)10只、红景天苷小剂量(Sal 5 mg/kg)组10只,红景天苷中剂量(Sal 20 mg/kg)组10只,红景天苷大剂量(Sal 50 mg/kg)组10只。腹腔注药后6 h测定左心室收缩压(LVSP)、左心室内压上升及下降最大变化速率(±dp/dtmax)等心功能指标。采用ELISA法和Western blot法测定TNF-α、Toll样受体4和核因子κB蛋白表达。结果显示:与对照组比较,LPS可明显抑制大鼠左室功能,显著增加大鼠心肌TNF-α、TLR4和NF-κB的表达。而与模型组比较,红景天苷可剂量依赖性地下调心肌TLR4、NF-κB及TNF-α表达,改善大鼠左室功能。可见,红景天苷对LPS诱导的大鼠心肌损伤具有一定的保护作用,其机制与抑制TLR4-NFκB-TNFα炎症信号转导通路密切相关。

长爪沙鼠脑底前后交通动脉变异类型分析

目的解剖观察成年长爪沙鼠脑底动脉前后交通支的缺失变异类型。方法选用128只成年长爪沙鼠,脑缺血死亡或乙醚麻醉处死后,解剖后在镜下对其脑底表面的动脉及前后交通支进行了观察。结果所解剖的长爪沙鼠存在7种前交通支的变异类型和5种后交通支变异类型。其中,前交通支缺失的类型占总数的46·1%,后交通支的缺失类型占总数的85·2%,两者同时缺失的概率为39·27%,与单侧结扎的方法制备脑缺血模型的成模率相近。结论长爪沙鼠的脑底动脉前后交通支存在多种变异,尤其是某些个体存在完整的后交通支。

莪术醇抑制人结肠癌SW1116细胞增殖及相关机制的研究

观察莪术醇对人结肠癌SW1116细胞生长及肿瘤细胞凋亡的影响,以探讨其可能的机制。用不同浓度的莪术醇处理SW1116细胞,MTT检测莪术醇对SW1116细胞生长增殖的抑制作用;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率;比色法测定Caspase-3酶活性;Western blot法检测Bcl-2、Bcl-XL的蛋白表达。莪术醇能以时间、剂量依赖性的关系抑制人结肠癌SW1116细胞的增殖,并诱导凋亡;莪术醇与SW1116细胞作用48h和72h后Caspase-3酶活性显著增强;同时,莪术醇处理SW1116细胞后,Bcl-2和Bcl-XL蛋白表达下调。说明莪术醇可抑制人结肠癌SW1116的增殖,诱导其凋亡,机制可能与调节Caspase-3、Bcl-2/Bcl-XL表达水平有关。

兽医在实验动物工作中的主要作用

全面概述了兽医在实验动物工作中的作用,重点阐述了兽医在实验动物设施建设、运行与管理中的作用,包括兽医在实验动物设施设计、设施运行管理及国内、国际的实验动物认证中发挥的重要作用。同时阐明了兽医工作在实验动物健康保障和护理、运输管理、动物实验的设计与实施、实验动物福利监督与管理、生物安全的评价与管理中的作用以及兽医对实验动物各种药品和废弃物管理中的作用。

长爪沙鼠自发性糖尿病模型近交系培育及其生物学特性的研究进展

长爪沙鼠是具有糖尿病潜质的实验动物,但普通群体中糖尿病发病率很低,远远不能满足研究需求。我们在前期进行长爪沙鼠近交系培育过程中偶然发现其中一个分支具有高血糖的特性,因此对其进行了定向培育。经过20代全同胞近亲繁殖,获得一个自发性Ⅱ型糖尿病模型近交系,该品系动物具有空腹血糖升高、糖耐量受损、胰岛素抵抗、多器官病变和多个糖尿病相关基因表达异常等糖尿病典型特征,其糖尿病特征模型比率达到60%左右。我们利用该模型进一步开展发病机制研究,发现肥胖型糖尿病和非肥胖型糖尿病具有脂肪组织分布和细胞大小水平等多方面的差异。这些研究结果证明糖尿病长爪沙鼠近交系是理想的Ⅱ型糖尿病模型,将为糖尿病发生机制、脂肪组织在糖尿病发生中的作用、糖尿病敏感药物筛选等诸多糖尿病相关的研究提供新材料和新思路。

莫西菌素的研究进展

从20世纪40年代以来,每5年就有一种新的抗寄生虫药开发上市,每种新药的药效提高近50%[2].因此,使用剂量从Phemothiazine(1940s)的60 mg/kg到Oxfendazole (1970s)的5 mg/kg.但是,阿维菌素类药物的发现(Burg et al,1979)[1],使抗寄生虫药的药效比同时代的药提高了25倍,使用剂量从mg/kg级降到μg/kg级,开辟了抗寄生虫药的新纪元.