HIV-1 env蛋白的制备活性鉴定与快速检测方法的建立

目的制备具有生物活性的HIV-1 env蛋白,利用量子点的特殊光学性能结合免疫分析技术,建立快速、简便的免疫凝集分析检测HIV-1gp41抗体方法。方法以HIV-1 env基因质粒为模板,采用体外快速翻译系统(RTS)线性模板试剂盒制备线性模板,用RTS100试剂盒合成env蛋白,用磁珠法纯化蛋白,用Western Blot方法鉴定蛋白活性。纯化后的HIV-1 env蛋白采用量子点标记,与样品液中的抗HIV-1gp41抗体进行免疫反应,根据量子点的荧光信号的变化,定量检测样品液中抗gp41抗体的浓度。结果体外快速翻译系统表达出相对分子量约为97KD的env蛋白;Western blotting证实纯化后的蛋白具有生物活性,量子点标记的env蛋白与山羊抗HIV-1gp41抗体发生了免疫凝集反应,使量子点发生荧光淬灭,荧光信号强度与抗体浓度呈负相关。结论HIV-1 env蛋白可采用RTS系统进行大量表达,分离纯化后的env蛋白具有生物学活性,建立的量子点标记的免疫凝集反应方法检测HIV gp41结果准确,方法简便。

浅谈土工布在道路工程中的应用

文章对目前广泛用于土木工程领域的土工布的性能作了介绍,并就土工布在道路工程中的实际用途和达到的效果进行了论述。

阿魏菇多糖对四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用

目的考察阿魏菇多糖(pleurotus ferulae polysaccharide,PFP)对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法制备CCl4小鼠急性肝损伤模型,采用阿魏菇多糖(125、250和500 mg·kg-1)灌胃给药,利用试剂盒检测小鼠血清丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)活性,检测肝组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活力。HE染色观察肝组织病理学变化。结果阿魏菇多糖能够降低模型小鼠血清AST和ALT含量,增强肝组织SOD和GSH活力,降低肝组织MDA水平,显著改善肝组织结构,减少肝细胞坏死。结论阿魏菇多糖对CCl4致小鼠急性肝损伤有一定的保护作用。

浅谈土工布在道路工程中的应用

土工布也叫无纺布,广泛用于土木工程的各个领域。本文论述了在道路路面工程中土工布主要用于旧路面罩面,防止路面反射裂缝,延迟反射裂的发生和发展,从而养护维修沥青路面。

荧光磁性纳米粒子与PSA单链抗体复合探针对前列腺癌的靶向显像和治疗

目的:研究荧光磁性纳米粒子与前列腺癌特异性抗原(prostate cancer specific antigen,PSA)单链抗体片段结合的复合纳米探针作为前列腺癌核磁共振靶向显像剂与治疗剂的可行性。方法:荧光磁性纳米粒子(FMCNPs)与前列腺癌特异性单链抗体片段(ScFv)桥联制备成复合纳米探针(FMCNPs-ScFv),应用高分辨电镜、荧光光谱仪与磁强度计进行鉴定。将FMCNPs-ScFv与前列腺癌LNCaP细胞共培养,观察其进入癌细胞的靶向性;采用MTT法评价复合纳米探针的细胞毒性。建立裸鼠前列腺癌细胞移植模型,进行免疫组化和病理学鉴定;荷前列腺癌裸鼠尾静脉注射复合纳米探针,采用荧光成像系统观察纳米探针在裸鼠体内的分布消除过程;利用核磁共振观察复合纳米探针肿瘤靶向显像效果;给予体外磁场照射(100W功率)30min,观察肿瘤体积的变化。结果:成功制备复合纳米探针FMCNPs-ScFv;细胞培养实验显示复合纳米探针能够进入前列腺癌细胞质;在显像浓度范围内复合纳米探针细胞毒性很低,不影响细胞增殖。成功制备裸鼠前列腺癌模型。荧光成像系统显示复合纳米探针快速地在裸鼠各重要器官分布,并逐渐集中于肿瘤部位;核磁共振显示纳米探针在24h内能够清晰显示前列腺癌图像;体外磁场照射4d后,注射复合纳米探针的裸鼠肿瘤组织生长显著慢于对照裸鼠的肿瘤组织(P<0.05)。结论:制备的复合纳米探针FMCNPs-ScFv能有效地靶向前列腺癌组织,可用于前列腺癌的核磁共振成像,也能用于体外磁场作用下的肿瘤治疗。

黄花蒿提取物离体抑菌活性研究

采用滤纸片法和孢子萌发法,以黑曲霉、青霉、绵霉为供试菌种,对黄花蒿提取物的离体抑菌活性进行研究。结果显示:各类黄花蒿提取物的抑菌效果均随浓度的升高而增强;水提物对绵霉抑菌活性最高,最大抑菌圈直径达28.3 mm,最大孢子萌发抑制率为45.45%;50%乙醇粗提物对青霉和黑曲霉的抑菌效果最好,最大抑菌圈直径分别为15.6、14.5 mm,最大孢子萌发抑制率分别为31.58%、27.08%。

沉默BRCAA1基因对胃癌MGC-803细胞的抑制作用及其可能的机制

目的:研究沉默乳腺癌相关抗原1(breast cancer-associated antigen 1,BRCAA1)基因对胃癌细胞株MGC-803的抑制作用及其可能的机制。方法:构建BRCAA1基因shRNA载体,将构建的shRNA-BRCAA1质粒与阴性对照质粒shRNA-N转染胃癌MGC-803细胞,24 h后用荧光显微镜观察转染效率,实时定量PCR检测BRCAA1和GAPDH基因mRNA表达水平MTT法检测转染后24、48与72 h的细胞增殖水平,Annxin-V PE/7AAD检测转染24 h后的细胞凋亡水平,Western blotting检测转染48 h后细胞的凋亡相关蛋白表达水平。结果:BRCAA1 siRNA表达质粒转染MGC-803细胞24 h的转染效率为(81.2±2.6)%。转染后48 h MGC-803细胞的BRCAA1 mRNA水平下降了61.4%,MGC-803细胞增殖的抑制率达45.0%,转染siRNA细胞的凋亡率明显高于未转染细胞和对照质粒转染细胞[(14.4±1.6)%vs(5.4±2.0)%,(4.4±2.5)5,P<0.05]。转染siRNA细胞的凋亡相关蛋白Rb与Bax的表达量显著增加(P<0.05),Bcl-2的表达量显著减少(P<0.05)。结论: BRCAA1基因的沉默可有效抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖和诱导细胞凋亡,其机制与其促进Rb和Bax蛋白表达、抑制Bcl- 2蛋白表达有关。

高能复合射孔技术及其在低孔低渗储层中的应用研究

现阶段我国大多数油田在进行套井过程中通常都应用常规的聚能射孔,由于技术的滞后性,导致了对油田的地层孔隙度与渗透率的下降,所以要完善油田的开采效率,以及减少对油田的破坏程度,就要根据周围的地势环境进行新技术的开发利用,例如使用高能复合射孔技术应用在低孔低渗储层的油田中,不断推进油田的石油开采技能,从而增强开采效果及安全性能。

目标管理:水利企业的必然选择

由于长期受计划经济制约,水利企业发展速度缓慢,市场竞争力薄弱,经营效益不高。要改变这种状况,促进水利改革的深入,有必要进行现代企业制度建设,明确责、权、利的关系,推行目标管理,提高水利企业的科学管理含量。 一、目标管理的基本特征 改计划经济的传统管理为现代的科学的目标管理,就是以科学管理学说和行为科学理论为先导,以系统论、信息论、激励论、控制论为基础。

五年制高职教育“订单班”人才培养模式的探索与实施

五年制高职教育是我国职业教育体系中的组成部分，具有教育周期长、人才培养模式多变等特点，也是众多企业培养职业人才的重要选择。“订单班”教学和人才培养模式是五年制高职教育中的一个创举，既体现了校企合作的要求，也体现了人才技能培养的独特性。本文以上述话题为切入点，着重论述了五年制高职教育中“订单班”人才培养模式的意义和实施策略，并提出了一些建议。希望借助本文的浅薄阐释，能够为五年制高职教育“订单班”模式的应用提供参考。

中荷建筑节能合作新模式新技术

7月9日，由荷兰王国驻华使馆、北京建筑技术发展有限责任公司、荷兰国家应用科学研究院（TNO公司）主办的“中荷建筑能效研讨会暨中荷合作项目——北京建筑技术发展有限责任公司成立挂牌仪式”在北京举行。

乡镇“走读干部”现象的成因、危害和治理

"走读干部"是乡镇管理中存在的干部工作不良状态。文章从内部激励和外部激励两个方面提出治理措施,即加强对乡镇干部的思想教育工作;提升乡镇干部的需要层次,由低级需要向高级需要转变;加强社会舆论对于"走读干部"的关注;注重乡镇干部的心理调节;在干部评价体系中提高"群众口碑"的权重,提高基层干部的工作积极性,让"走读"变"住读";明确对"走读干部"的惩处措施,对基层领导干部的行为加强监管;"一把手"以身作则;等等。

啤酒花总黄酮对硫代乙酰胺所致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的探讨啤酒花总黄酮对硫代乙酰胺所致的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法采用硫代乙酰胺诱导小鼠急性肝损伤模型;采用试剂盒测定血清转氨酶、脂质过氧化酶、抗氧化酶;采用H&E和免疫组织化学法检测组织病理学的改变;采用Western blot法检测凋亡通路的表达。结果啤酒花总黄酮各组的小鼠血清中ALT酶以及AST酶的数量都显著性下降;啤酒花总黄酮不仅可以降低肝组织中脂质过氧化物的含量,还能够升高超氧化物岐化酶(superoxide dismutase,T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)的活力;通过免疫组织化学法得出的结果是啤酒花总黄酮可以显著性地抑制NF-κB受体阳性反应产物在肝细胞中的表达;通过Western blot法得出的结果是啤酒花总黄酮可以抑制Bax蛋白的表达,提高Bcl-2蛋白的表达。结论啤酒花总黄酮对急性肝损伤具有一定的保护作用。

高层建筑结构设计的若干问题探讨

针对目前高层建筑结构设计中普遍存在的几个问题进行讨论，应用结构设计理论和试算举例论证了在这些情况下如何进行安全、合理。

美国通用电气公司（GE）MS9171E型燃气轮机的技术特点

对安装在巴基斯坦ＵＣＨ联合循环电站３台１２０ＭＷＭＳ９Ｅ型燃气轮机（美国通用电气公司）制造的单轴重整气轮机）的压缩机、燃烧系统和透平等在结构上的独到特点进行分析介绍。

普通O形橡胶密封圈在超高压中的应用

普通O形橡胶密封圈如采用圆弧形挡圈且挡圈与密封面采用过盈配合 ,再稍微加大其压缩量 ,则普通O形橡胶密封圈便可在超高压中应用。

水泥混凝土路面早期裂缝产生的原因及防治措施

本文针对水泥混凝土路面在施工和运营过程中,出现裂缝问题的原因进行了详细的分析,旨在为解决这一技术问题提供参考依据。

GE公司200 MW270T357型蒸汽轮机的设计特点

介绍了GE公司设计制造的 2 70T357型蒸汽轮机的设计特点 ,与国产 2 0 0MW发电机组相比 ,该型蒸汽轮机在本体、汽封、润滑油系统、顶轴系统、盘车装置、液压控制系统上有较大的差别。

浅析砂土填筑路基技术

文章就砂土在筑路工程中的运用及砂土的特性进行了介绍,同时将砂土在路基施工过程中的大体工艺过程进行了说明,最后还就施工过程中存在的问题及解决的办法提出了建议。

消除现浇钢筋混凝土框架质量通病措施

通过现浇钢筋砼框架结构在施工中存在的质量问题，提出了预防措施及治理办法。