骨髓活检的价值

1、涂片、印片、吸取标本切片和活检这4种方法各有其优点和不足之处,国外各实验室亦无统一的常规,而按需要选择运用.在选择时,下列几点可作参考:(1)在可识别切片中大多数的但不是全部骨髓细胞,(2)由于涂片有被外周血稀释的可能,因此再障的诊断还需要组织学证实,(3)铁含量估计虽然在吸取标本切片中较为精确,但在5μ切片中没有铁颗粒,只能认为铁减少(并非没有),因此需同时作涂片,(4)淋巴增生性疾患的亚型分类需要切片,(5)转移性肿瘤在切片中更易发现.2、是否需要作塑料包埋塑料包埋虽然优点很多,但一般实验室难以作为常规.制作良好的石蜡切片,仍然可以解决多数问题。

恶性组织细胞病

恶性组织细胞病的细胞形态多变,没有特异性的抗原,表达的抗原多数是激活抗原,免疫遗传表现17P^+。它与噬血性组织细胞增生的鉴别极为困难。经治疗有缓解6年以上者。

骨髓微环境基质细胞研究的近况

造血微环境包括骨髓的结构部分、非结构细胞成分和体液因素,这3方面协同维持正常的造血功能。微环境的主要核心是骨髓基质细胞。以下介绍有关骨髓基质细胞研究的某些进展。

原位杂交技术在血液学中的应用

原位杂交技术(in situ Hybridizafion, ISH)是近代分子生物学和传统形态学的聚点.它在病理领域中的潜力并不亚于免疫细胞化学.ISH的原理是运用Southern或Northern的核酸杂交,在保留细胞形态的基础上,检测特定的核酸碱基程序.在血液学中,可以认为是随Romanowsky染色、细胞化学、免疫和凝集素(lectin)细胞化学之后的第4代染色方法.经典的ISH是用同位素(~3H、^(35)S或^(32)P)标记探针,将它与粘贴在玻片上的细胞中的DNA或RNA进行杂交,以后用自显影方法,显示探针,以细胞核或胞浆内的的银颗粒数作半定量分析,目前此种ISH已有完整步骤的经验介绍,并已开始用生物素标记探针进行杂交,再用ABC法显色。

骨髓活检

1.骨髓活检的适应症在干抽时,必须作骨髓活检。在任何需作骨髓穿刺检查的病例,都可以作骨髓活检。骨髓活检不单可以协同涂片作出诊断,在下列疾病中还可以提供一些信息,供临床治疗时的参考: (1) 再生障碍性贫血:由于涂片可能受外周血稀释的影响,活检组织切片中估计造血成分的数量较为正确,有些情况。

胸腺凋亡细胞DNA裂解的TUNEL原位标记

运用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT介导的荧光素 dUTP 缺口末端标记法(TUENL对糖皮质激素诱导的实验性胸腺细胞凋亡的组织切片进行标记,选择性地显示了凋亡细胞,表明 TUNEL 可在细胞水平对组织切片中的凋亡进行检测。对细胞凋亡的判定,需结合细胞的形态结构特点,与坏死进行鉴别。

酸处理后甲基绿—派洛宁染色法——增殖型和分化型细胞的区别染色

0.12N HCl酸解后,再经甲基绿一派洛宁染色可以区别增殖型细胞和分亿型细胞,前者细胞核为绿色,后者紫红色,此法不须特殊仪器设备,试剂易得,是一个可为基层单位应用的组织化学方法。

白血病细胞的Ki-67表达与细胞周期的关系

用ABC方法检测白血病细胞Ki-67阳性率,并与同时用流式细胞仪检测的DNA倍体、S+G_2M细胞比例作比较,发现Ki-67阳性率与S+G_2M细胞比例关系十分密切;二者与DNA倍体之间都有非常显著关系。在白血病各亚型中,Ki-67阳性率与S+G_2M细胞比例表现一致。白血病组高于对照组;急性白血病组高于慢性白血病组;急性淋巴细胞白血病组高于急性非淋巴细胞白血病组。急性白血病中,治疗前Ki-67阳性率和S+G_2M细胞比例在缓解组低于未缓解组。因此,可以认为用ABC方法检测Ki-67阳性率与用流式细胞仪测定DNA单参数一样,作为白血病诊断、分析及预后判断的指标,而且更方便、价廉。

血清癌胚抗原在胃癌诊断中的意义

经病理确证的49例胃癌病人进行了手术前血清癌胚抗原(CEA)水平的检测。其中包括8例早期及41例晚期胃癌。49例胃癌CEA阳性率为44.9%(22/49),晚期胃癌阳性率为46.3%;早期胃癌为37.5%,阳性病例中77.3%患者的CEA水平在15～20μg/L,平均为17.1μg/L(正常值<15μg/L);仅4例CEA明显升高,平均为95.25μg/L结果提示只有CEA明显升高才对胃癌具有诊断价值。实验还提示血清CEA水平与肿瘤部位以及浸润深度关系不大,而与肿瘤大小,组织分化程度以及是否累及血管、淋巴管有密切关系。

胃癌癌胚抗原的免疫组化及血清检测

报告９４例胃癌癌胚抗原的免疫组化研究，其中４５例既做免疫组化同时又作术前血清癌胚抗原检测，并对２１例胃癌病人作了随访。结果提示早期胃癌的５年生存率为８３．３％（５／６）；晚期胃癌的５年存活率为３３．３％（１／１５）；血清癌胚抗原浓度轻度升高或组织内癌胚抗原染色为（－）或（＋）时有较好的预后。而当血清癌胚抗原浓度明显升高＞８０ｇ／ｍｌ或组织内癌胚抗原表达为强阳性（＋＋）特别是（＋＋＋）时其术后存活率明显降低。而且通过２种方法的比较研究，癌胚抗原免疫组化显色方法比血清癌胚抗原检测更显敏感，Ｐ＜０．０１，可作为推测胃癌预后的１项指标。

核仁形成区相关嗜银蛋白在白血病中的变化

用计算机辅助医学显微图像分析仪定量检测106例初发白血病患者骨髓细胞的核仁形成区相关嗜银蛋白(Ag-NORs),并与同标本中的抗人增殖细胞Ki-67阳性率、S+G2M细胞比例,DNA倍体进行比较,发现Ag-NORs与Ki-67阳性率。S+G2M细胞比例有相关关系,与DNA倍体无显著相关关系。Ag-NORs在白血病组高于正常对照组:急性白血病组高于慢性白血病;急性淋巴细胞白血病高于急性非淋巴细胞自血病;急性早幼粒细胞白血病最低。在慢性白血病中,慢性粒细胞白血病显著高于慢性淋巴细胞白血病;早幼粒细胞白血病缓解期显著低于治疗前,复发时又显著增高。结果显示:Ag-NORs可以和Ki-67免疫标记、细胞流式仪一样,作为白血病诊断,病情监测及预后判断的一项参考指标。

白血病细胞Ki－67表达及临床意义

用ＡＢＣ方法检测白血病细胞Ｋｉ－６７阳性率。观察ＨＬ－６０细胞株用维甲酸前后Ｋｉ－６７阳性率的变化和各种类型的白血病患者的Ｋｉ－６７阳性率与临床预后的关系，发现加维甲酸后的白血病细胞株的总Ｋｉ－６７较加药前明显降低，并以Ｇ０／Ｇ１期降低更为明显。白血病组的Ｋｉ－６７阳性率显著高于正常对照组；急性白血病组显著高于慢性白血病组；急淋组高于急非淋组；治疗前急性白血病组中Ｋｉ－６７阳性率，缓解组稍高于未缓解组；死亡组高于缓解组。作者认为，用ＡＢＣ方法检测白血病细胞Ｋｉ－６７阳性率可以更进一步观察细胞周期中增殖细胞比例的变化，并作为白血病临床研究的一项指标。

维甲酸治疗APL后骨髓组织的变化

目的探讨维甲酸 (ATRA)治疗急性早幼粒细胞白血病 (APL)后骨髓组织形态学变化。 方法 30例APL病人的骨髓活检标本 ,分成治疗前、ATRA治疗后与化疗后三组 ,分别观察其骨髓造血功能与造血微环境的变化。结果APL经传统方法化疗后骨髓正常造血功能受到抑制 ,骨髓间质也受到很大的损害 ,表现为间质支架的塌陷 ,出血 ,骨髓坏死 ,结构脂肪的消失。APL经ATRA治疗后骨髓造血组织增生活跃 ,骨髓间质变化轻微。 结论ATRA治疗APL后并不抑制骨髓的造血功能 ,造血微环境保持良好 ,有利于治疗后正常造血功能的重建与修复。

检测造血细胞原癌基因表达的原位杂交法

随着分子生物学研究的发展,核酸杂交技术已开始应用到细胞形态学诊断学上。用已知的癌基因片段(基因组DNA、cDNA或RNA)

骨髓增生异常综合征骨髓活检评分体系的建立及其临床意义

目的建立骨髓增生异常综合征(MDS)骨髓组织学评分体系,为临床的诊断和动态监测疾病的变化与预后的判断提供参考指标。方法运用HE染色和Gomori网状纤维染色观察149例骨髓组织学改变;用免疫组化的方法标记MPO、CD235、F8、CD42b、CD61和CD34。通过评分方法将MDS骨髓活检多种病变特点数字化,每1例MDS骨髓活检均可得到一个综合性的数字。结果建立了MDS骨髓活检评分体系,该评分体系涵盖了MDS骨髓活检8个方面形态学变化。MDS骨髓活检评分与正常骨髓活检评分比较,当评分≥5时,两者有显著性差异(P<0.001)。MDS骨髓活检评分与MDS发展来的白血病的骨髓活检评分比较,当评分≥9时两者差异非常显著(P<0.001)。结论运用数字评分方法设计了半定量MDS骨髓活检评分体系,适用于常规骨髓病理检查。该体系运用于MDS的骨髓活检诊断,当评分≥5时,结合骨髓涂片及抗原异常表达可作出MDS的诊断;评分增高,提示MDS向白血病发展的危险性增高。当评分≥9时,提示已进入早期白血病阶段。

多发性骨髓瘤增殖与凋亡的研究

目的了解多发性骨髓瘤（multiplemyeloma，MM）中瘤细胞凋亡与增殖之间的关系及最终造成浆细胞数目异常增多，形成MM的发病机制。方法运用末端脱氧核着酸转移酶介导的脱氧尿毒三磷酸缺口末端标记（TUNEL）技术，结合HE形态和免疫组化结果，半定量分析12例MM中瘤细胞的凋亡与增殖的情况。结并MM瘤细胞增殖水平低，凋亡水平也低于常见人类肿瘤的平均凋亡水平，在瘤细胞聚积成给节或弥漫浸润时，给节中无TUNEL阳性标记细胞，瘤细胞的凋亡与增殖之间呈正相关（P＜0.05）。结论在MM中，造成瘤细胞数量异常增多形成肿瘤的重要原因是凋亡的减少。

整合素在胃癌中的表达及意义

应用LSAB免疫组化方法检测35例胃癌组织及邻近正常胃粘膜x4、β1、β4亚单位整合素的表达状况。结果发现：1．胃癌组织中整合素的表达程度明显高于正常胃粘膜组，35例胃癌中x4阳性13例（37．10％），β1阳性33例（94.3％），β4阳性20例（57.1％）；2．三亚单位尤其是x4和β4表达与胃癌临床病理特征密切相关。结果提示：x4、β1的高表达或β4的低表达．可能在胃癌浸润和转移过程中发挥着重要作用．预示该癌组织有高侵袭倾向。

94例胃癌癌胚抗原的分析在诊断和预后中的意义

观察９４例胃癌病人手术切除的肿瘤组织癌胚抗原（ＣＥＡ）免疫酶标的表达，检测４５例胃癌病人术前血清ＣＥＡ浓度，并随访２１例术后的胃癌病人。结果提示：血清ＣＥＡ水平与肿瘤生长部位及浸润深度关系不大，但与肿瘤大小、组织类型及血管和淋巴管是否累及有关。４５例胃癌病人同时进行组织及血清ＣＥＡ的比较性研究，发现免疫组化ＣＥＡ表达的阳性率要比血清ＣＥＡ检测的阳性率高得多（Ｐ＜０．０１）。２１例胃癌病人的随访，早期胃癌５年生存率为８３．３％（５／６），晚期胃癌为３３．３％（５／１５），血清ＣＥＡ浓度轻度升高或免疫酶标弱阳性预后较好；血清浓度明显升高的２例，于５年内死亡；肿瘤组织内ＣＥＡ呈强阳性者，术后生存率低，免疫组化强度与肿瘤预后呈明显正相关（Ｐ＜０．０５）。通过两种方法比较研究提示：血清浓度明显升高特别是组织内ＣＥＡ表达强阳性，具有估计预后的意义；且ＣＥＡ免疫组化显色比血清检测更为敏感（Ｐ＜０．０１），可作为推测胃癌预后的一项指标。