亚硝基胍-紫外复合诱变选育高产衣康酸菌株

为提高土曲霉KYK-031发酵生产衣康酸能力,对出发菌株开展诱变育种和高产能力选育研究。采用亚硝基胍(NTG)和紫外(UV)复合诱变方法,通过平板初筛和摇瓶复筛,筛选衣康酸高产突变株。结果表明,亚硝基胍在500μg/mL浓度下的最佳诱变时间为40 min,15 W紫外诱变的最佳诱变时间为2 min,亚硝基胍-紫外复合诱变后筛选得到一株衣康酸高产菌株KYK-1035,摇瓶发酵产量为73.7 g/L,比出发菌株(41.8 g/L)提高了76.3%,糖酸转化率为63.4%。采用亚硝基胍-紫外复合诱变,提高了出发菌株诱变的正突变率,为衣康酸发酵继续放大和工业化生产奠定了基础。

酿酒酵母中与钙离子稳态调控因子ScRCH1细胞质膜定位相关的转录因子基因的筛选检测

酿酒酵母细胞中ymr034c基因与白念珠菌的Carch1基因同源,CaRCH1与白念珠菌对钙离子、锂离子和硝唑类药物的耐受性相关。因此,把ymr034c命名为Scrch1。前期研究结果显示,在胞外高钙离子胁迫条件下,ScRCH1定位于细胞质膜上。为了研究Scrch1基因表达的调控机理,通过荧光显微镜技术对酵母细胞基因组中编码转录因子的223个单基因缺失菌株进行了筛选,分别检测了ScRCH1-GFP融合蛋白在它们中的亚细胞定位情况。结果发现,钙离子处理后,ngg1、hal9、crz1、ada2和swi6五个转录因子基因的缺失造成ScRCH1-GFP没有细胞质膜定位,而ino2基因的缺失导致ScRCH1-GFP在不经钙离子处理的条件下即定位到细胞质膜上。

读写结合,提高学生的写作能力

语文是基础教育中的一门重要学科，而作文教学又是语文教学中的重要组成部分。因此改进作文教学，大面积提高学生作文能力是语文教学的关键。我在语文教学中不断实践、探索，感到有几点做法对提高学生的写作能力很有帮助。

浅谈小学语文中的识字教学

识字是阅读、写作的基础，是语文教学的～项重要任务。准确把握识字的学习目标，全面理解其任务要求，对于指导识字、改进识字，提高识字教学效率，对于提高学生的识字能力，进而提高学生的语文素养，意义是非常深远的。学生要尽早、尽快、尽可能多的认识汉字，以便及早进入汉字阅读阶段，从而满足学生阅读的需要，丰富其精神生活，促进思维的发展。因此，教师要根据学生认识事物的规律、学习语文的规律和汉字本身的规律，教给学生识字方法，培养识字能力。在识字教学中，必须讲求识字方法，提高识字能力。在识字方法上要注意字的音、形、义结合，学和用结合。

紫外-氯化锂复合诱变选育高产维生素K_(2)(MK-7)菌株

作为一种新兴的功能性保健食品,维生素K_(2)受到人们越来越多的关注。传统的诱变育种技术是国内外提高菌种产量和性能的重要手段。以本实验室一株产维生素K_(2)(MK-7)的纳豆芽孢杆菌KVK-09为出发菌株,通过对紫外和氯化锂诱变致死率和正突变率的考察,确定紫外-氯化锂复合诱变的最佳诱变条件为紫外照射30s,氯化锂浓度为0.4%。紫外-氯化锂复合诱变后经过摇瓶初筛和复筛,采用高效液相色谱(HPLC)进行检测并筛选突变株。筛选得到一株维生素K_(2)(MK-7)高产菌株KVK-2694,摇瓶发酵水平达到78μg/mL,是出发菌株(43μg/mL)的1.81倍。采用紫外-氯化锂复合诱变,提高了诱变菌株的正突变率,可以有效提高维生素K_(2)(MK-7)的产量,突变菌株KVK-2694遗传稳定性良好,为工业化生产和应用奠定了良好基础。