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PMCA1-4及其A端和C端剪接变异体在成年大鼠前庭组织中的表达
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作者 罗蜜 褚汉启 +5 位作者 陶雁玲 周良强 陈金 刘云 杜智会 陈请国 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期202-206,共5页
目的研究质膜钙ATP酶异构体1-4(plasma membrane Ca^(2+)-ATPase 1-4,PMCA1-4)在成年大鼠前庭组织的分布部位,及其A端和C端剪接变异体的表达类型。方法选择8周龄健康SD大鼠,解剖出内耳器官行前庭切片,同时取前庭椭圆囊斑和球囊斑提取总... 目的研究质膜钙ATP酶异构体1-4(plasma membrane Ca^(2+)-ATPase 1-4,PMCA1-4)在成年大鼠前庭组织的分布部位,及其A端和C端剪接变异体的表达类型。方法选择8周龄健康SD大鼠,解剖出内耳器官行前庭切片,同时取前庭椭圆囊斑和球囊斑提取总RNA。通过免疫荧光方法检测PMCA1-4在成年大鼠内耳前庭组织的表达部位,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PMCA1-4的A端和C端剪接变异体在成年大鼠前庭组织的表达类型。结果球囊和椭圆囊荧光染色切片中,于毛细胞和支持细胞的胞体外侧膜可见PMCA1表达,毛细胞纤毛中可见PMCA2强表达,毛细胞和支持细胞的胞体外侧膜可见PMCA3弱表达,PMCA4几乎不表达。4种PMCA亚型在球囊表达的剪接体分别为PMCA1x/b、PMCA2w/b、PMCA3z/(a,b)和PMCA4x/b,它们在椭圆囊的表达类型与球囊相同。结论PMCA1-4在成年大鼠前庭器官的表达部位存在差异,这4种PMCA亚型的剪接体类型也各不相同。这种差异性可能是为了满足前庭组织和亚细胞结构域对Ca2+调节的特殊需求。 展开更多
关键词 质膜钙ATP酶异构体1-4 球囊 椭圆囊 前庭毛细胞 剪接变异体
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Ca_v1.3钙离子通道在成年大鼠耳蜗的表达 被引量:1
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作者 陈金 周良强 +7 位作者 褚汉启 陈请国 杜智会 祁繁 刘云 孙彦博 李鹏军 冰丹 《听力学及言语疾病杂志》 CSCD 北大核心 2017年第6期630-633,共4页
目的观察Ca_v1.3钙离子通道蛋白在成年大鼠耳蜗组织中的表达和分布,探讨其在听觉生理和病理中的作用。方法 35只成年SD大鼠随机分为A组(5只,分离耳蜗冰冻切片)、B组(10只,取耳蜗全部软组织及肾组织)、C组(20只,分离耳蜗基底膜、血管纹... 目的观察Ca_v1.3钙离子通道蛋白在成年大鼠耳蜗组织中的表达和分布,探讨其在听觉生理和病理中的作用。方法 35只成年SD大鼠随机分为A组(5只,分离耳蜗冰冻切片)、B组(10只,取耳蜗全部软组织及肾组织)、C组(20只,分离耳蜗基底膜、血管纹及螺旋神经节),采用免疫荧光染色方法检测Ca_v1.3钙离子通道蛋白在耳蜗组织中的分布,采用免疫印迹技术(Western blot,WB)以及逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR)检测Ca_v1.3钙通道蛋白在耳蜗组织中的表达。结果免疫荧光显示Ca_v1.3钙通道蛋白主要分布在成年大鼠耳蜗毛细胞、血管纹细胞,螺旋神经板缘细胞、螺旋韧带、螺旋神经节、螺旋凸;RT-PCR以及Western blot的结果显示Ca_v1.3钙离子通道蛋白在耳蜗组织和肾脏中有均表达,其中耳蜗基底膜上最多,螺旋神经节次之,耳蜗侧壁血管纹的表达量与前两者相比相对较少。结论本研究初步揭示了Ca_v1.3钙离子通道蛋白在成年SD大鼠耳蜗中的表达具有一定的组织特异性,为进一步研究Ca_v1.3钙离子通道蛋白在听觉生理和病理中重要的作用提供了理论依据。 展开更多
关键词 耳蜗 Cav1.3钙离子通道 大鼠
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Downregulation of Inwardly Rectifying Potassium Channel 5.1 Expression in C57BL/6J Cochlear Lateral Wall 被引量:3
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作者 潘春晨 褚汉启 +9 位作者 赖彦冰 孙彦博 杜智会 刘云 陈金 童婷 陈请国 周良强 冰丹 陶雁玲 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2016年第3期406-409,共4页
Age-related hearing loss(AHL) is one of the most common sensory disorders among elderly persons. The inwardly rectifying potassium channel 5.1(Kir5.1) plays a vital role in regulating cochlear K~+ circulation whi... Age-related hearing loss(AHL) is one of the most common sensory disorders among elderly persons. The inwardly rectifying potassium channel 5.1(Kir5.1) plays a vital role in regulating cochlear K~+ circulation which is necessary for normal hearing. The distribution of Kir5.1 in C57BL/6J mice cochleae, and the relationship between the expression of Kir5.1 and the etiology of AHL were investigated. Forty C57BL/6J mice were randomly divided into four groups at 4, 12, 24 and 52 weeks of age respectively. The location of Kir5.1 was detected by immunofluorescence technique. The m RNA and protein expression of Kir5.1 was evaluated in mice cochleae using real-time polymerase-chain reactions(RT-PCR) and Western blotting respectively. Kir5.1 was detected in the type Ⅱ and Ⅳfibrocytes of the spiral ligament in the cochlear lateral wall of C57BL/6J mice. The expression levels of Kir5.1 m RNA and protein in the cochleae of aging C57BL/6J mice were down-regulated. It was suggested that the age-related decreased expression of Kir5.1 in the lateral wall of C57BL/6J mice was associated with hearing loss. Our results indicated that Kir5.1 may play an important role in the pathogenesis of AHL. 展开更多
关键词 presbycusis Kir5.1 cochlea C57BL/6J
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