GC-MS对不同产地多花黄精生药材挥发性物质差异性研究

目的:研究不同产地多花黄精生药材中挥发性物质组成和相对含量,并进行差异性分析。方法:对湖北赤壁、湖北随州、湖北恩施、湖南岳阳、湖南邵阳、湖南娄底、安徽金寨、安徽青阳和安徽霍山所产多花黄精生药材挥发性物质进行GC-MS分析并结合NIST 11数据库进行检索比对,通过主成分分析法进行PCA得分图和PCA载荷图分析。结果:从9个不同产地的多花黄精中鉴定出67个化合物。不同产地多花黄精挥发性物质组成差异性较大,但湖北赤壁、湖北随州、湖北恩施和湖南岳阳所产多花黄精挥发性物质较为一致,湖南邵阳和湖南娄底所产多花黄精挥发性物质较相似;安徽金寨、安徽青阳和安徽霍山所产多花黄精挥发性物质区分度不大。结论:产地区域和环境影响多花黄精生药材挥发性物质生成和积累。

拟南芥AtMYB50和AtMYB61蛋白的原核表达研究

文章提取拟南芥植株总RNA,通过RT-PCR扩增出AtMYB50与AtMYB61基因cDNA片段,连接到pEASY-Blunt载体上,转化到Trans1-T1感受态细胞内,筛选阳性单克隆进行菌落PCR鉴定并测序验证;利用限制性内切酶双酶切重组载体获得含有黏性末端的目的基因片段,并对原核表达载体pET-32a+和pGEX-4T-1进行完全双酶切,连接目的基因片段后获得重组原核表达载体,将重组原核表达载体转化至大肠杆菌原核表达菌株BL21(DE3);IPTG诱导表达获得目的蛋白,并对蛋白表达条件(诱导时间、诱导温度及IPTG浓度等)进行优化,鉴定表达蛋白水溶性。

气质联用法研究多花黄精药材炮制过程中挥发性物质的变化

为比较多花黄精药材在炮制过程中挥发油化学组成及含量变化,探究炮制对多花黄精药材挥发性成分的影响,采用水蒸气蒸馏法对不同多花黄精药材炮制样品的挥发性成分进行提取,使用气相色谱质谱联用仪对挥发油化学组成进行分析,数据库对比分析多花黄精药材炮制前后的挥发性成分变化,并通过主成分分析法进行PCA得分分析。结果表明,挥发性成分中共鉴定出115种成分,炮制后小分子醛酮类挥发性物质含量明显降低,9次蒸晒炮制后有机酸成为主要挥发性成分,糠醛类等有害物质在炮制后含量升高,PCA得分显示多花黄精炮制过程中挥发性成分差异显著。可见传统炮制工艺对黄精的减毒增效有一定的效用,但因毒副产物的产生,炮制工艺应进一步优化。

多花黄精从生粉到九蒸九晒过程中多糖的变化

[目的]选取浙江丽水和安徽青阳2个产地的多花黄精3年生以上块茎,研究其在九蒸九晒过程中多糖的变化。[方法]参考药典中黄精多糖硫酸-蒽铜测定法。[结果]生黄精中多糖的含量最高,到三蒸三晒剧烈下降,此后到九蒸九晒中间数次反弹,但总体呈缓慢下降趋势。两组多糖均值相关性显示,不同品种的九蒸九晒过程中多糖变化反应一致性良好。对试验数据采取可重复双因素方差分析显示,10个处理间多糖含量差异达到极显著水平,2个品种间也达到了极显著水平。品种和处理的交互作用对多糖的影响也达到极显著水平。[结论]该试验结果为炮制中药或临床上对黄精多糖含量提出要求时提供参考,并为研究不同产地或不同黄精品种间多糖含量差异提供试验启发。

不同产地黄精中重金属含量差异以及限量标准

对15个不同产地黄精进行8种重金属元素检测,比较不同产地差异,并与现行标准比较,衡量是否超标。称取样品用硝酸消解,赶酸,定容,过滤,仪器采用ICP-MS和ICP-OES。每种重金属在15个地区的分布中均呈现极显著差异,对比药典委员会对重金属限定,As和Cu元素均未超标,各有4个产地的Cd和Pb超标;对比各国家中草药重金属限定,As依然没有超标,但Cd与除了ISO的其他国家相比,10个产地不同程度超标;Pb超4国标准;对比唯一能查到Cr标准的加拿大和美国,Cr元素15个产地均超标;从食品角度,绝大多数产地的黄精As、Cd、Cr、Pb、Cu、Zn很可能已危害人体健康。不同种植环境极大影响黄精中重金属富集并且多地多种重金属均超标。

离子色谱法检测土壤中草甘膦

[目的]利用草甘膦易溶于水的特点,建立一种离子色谱法测定土壤样品中草甘膦残留量的方法。[方法]结合影响草甘膦检测精确度的单因素试验,确定测定土壤中草甘膦残留量的最佳离子色谱检测方法,并对该方法的准确性和精密度进行验证。[结果]测定的草甘膦浓度在0.10~2.00mg/L线性关系良好,相关系数(r)为0.9997;其定性检出限(LOD)和定量检出限(LOQ)分别为0.05mg/L(S/N>3)、0.10mg/L(S/N>10);通过连续进样测得其保留时间、峰面积和峰高的相对标准偏差(RSD)分别为0.09%、0.84%和0.50%;在0.50~2.00mg/L加标范围内,土壤中草甘膦的平均回收率为106%~113%。[结论]相对于常用的液相色谱检测法,此法无需柱前或柱后衍生、萃取、浓缩等繁琐步骤,前处理方法简单高效。该方法的回收率和精密度较好,受其他离子干扰小,且简单、快速,可满足对土壤草甘膦残留检测的要求。

黄精多糖与积雪草苷对糖尿病斑马鱼尾鳍再生的药效学研究

目的 通过建立和使用斑马鱼2型糖尿病模型,探讨黄精多糖与积雪草苷对2型糖尿病斑马鱼尾鳍再生的促进作用。方法 首先对药物进行毒性分析,得出最佳给药浓度范围;通过显微注射链脲佐菌素方法构建斑马鱼2型糖尿病模型,切断斑马鱼尾鳍,经不同给药浓度干预后,测定斑马鱼空腹血糖水平并观察尾鳍再生情况;通过实时定量PCR(qRT-PCR)检测黄精多糖、积雪草苷及联合用药对斑马鱼尾鳍再生相关基因mRNA的表达水平。结果 各给药组均可有效降低斑马鱼空腹血糖水平,且能上调骨再生相关基因的表达,其中积雪草苷高浓度组对成纤维细胞生长因子的表达上调具有显著差异(P<0.01)。结论 黄精多糖、积雪草苷及其联合给药的高浓度组可有效降低斑马鱼空腹血糖水平且具有促进尾鳍再生的效果,为治疗2型糖尿病和促进组织修复方面药物的开发提供理论依据。

常见茶叶中14种元素含量分析及重金属风险评价

采集传统名茶地标产品样品各3种为实验样品,通过ICP-OES和ICP-MS对样品进行K、Ca、Mg、Mn、B、Cu、Fe、Ni、Zn、Cr、Co、Cd、As、Pb等14种元素的含量测定。利用单因素方差分析、主成分分析、污染评价等方法,对茶叶无机元素含量进行分析和污染评价,并对污染来源进行了研究。结果表明,不同产地茶叶样品中的K、Ca、Mg、Mn、Fe等元素含量差异较大;食品及茶叶安全限量元素Cd、Cr、Pb、As等实测值均未超过国家标准限值;部分元素之间具有正相关性,如Cu与Cd, Cu与Ni, As与Ni两两之间关联性较强;从主成分分析看出Cu、Cd、As和Ni为PC1代表因子,K和Fe分别为PC2和PC3的代表因子,PC1主要代表了金属冶炼、工业排放和垃圾焚烧等方面的贡献,PC2和PC3分别代表了肥料施放和茶叶加工等方面的贡献。