苦瓜籽核糖体失活蛋白的理化性质及生物活性

采用硫酸铵分级分离，假配基亲和层析和ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－１００分子筛层析等方法，从苦瓜籽中获得核糖体失活蛋白（ＲＩＰ）．经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＰＡＧＥ、ＩＥＦ和ＰＡＳ方法分析均表明为单一蛋白着色带或单一糖蛋白着色带．根据ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１５０分子筛层析结果计算其相对分子质量为３．０×１０４，经ＩＥＦ－ＰＡＧＥ结果计算其ｐＩ为８．９～９．０．对无细胞系统中蛋白质生物合成抑制活性明显，其ＩＣ５０为５．３×１０－ １０ ｍ ｏｌ／Ｌ左右．体外生物活性试验结果表明其对人肝癌细胞、Ｖｅｒｏ、ＳＰ２／０、３Ｔ３、Ｋｂ、Ｎａｖａｎａ 等肿瘤细胞株均表现有不同程度的抑制作用．而对完整细胞人胚肺二倍体细胞却毒性极小．因此，上述实验结果为该ＲＩＰ的进一步深入研究和有可能开发成免疫毒素的高效弹头药物提供了一定的工作基础．

苦瓜籽核糖体失活蛋白的基本性质研究

采用 Affi- Gel亲和层析和 Sephacryl S- 10 0分子筛层析等方法获得苦瓜籽核糖体失活蛋白 (RIP) ,经 SDS- PAGE,PAGE,IEF和 PAS方法分析均表明为单一蛋白着色带或单一糖蛋白着色带 .根据 SDS- PAGE测得表观分子量为 30 0 0 0 ,经 IEF- PAGE结果计算其 PI为 9.0 ,对无细胞系统中蛋白质生物合成抑制活性明显 ,其 IC50 为 5.3× 10 -10 mol/ L左右 .体外生物活性试验结果表明其对人肝癌细胞 ,Vero,SP2 / 0 ,3T3,Kb,Navana,S- 180等肿瘤细胞株和麻疹病毒均表现有不同程度的抑制作用 ,而对完整人胚肺二倍体细胞却毒性极小 .

熊猫豆β-D-半乳糖苷酶的基本性质研究

经硫酸铵分级分离 ,DEAE- cellulose5 2 ,CM- cellulose5 2和 Sephacryl S10 0 HR凝胶过滤层析方法从熊猫豆黄化苗中获得了一种β- D -半乳糖苷酶 ,活性收率为 8.0 % ,纯化倍数为 2 4 5 .经PAGE显示单一蛋白着色带 ,用 IEF- PAGE测定其 PI为 4 .1.SDS- PAGE显示 2条蛋白着色带 ,其相应分子量分别为 4 0 k D和 2 9k D.Sephadex G2 0 0层析法测得表观分子量为 6 8k D.以 ONPG和PNPG为底物测得该酶的表观 Km 分别为 3.0 2 mmol/ L和 0 .33mmol/ L.最适 p H为 4 .2 ,最适温度为 5 2℃ .以乳糖为底物测得表观 Km 为 4 3mmol/ L.Hg CI2 ,DTNB,NEMI,半乳糖和乳糖对酶表现出不同的抑制作用 .

复方中药对人癌细胞株SY5Y及A549抑制作用的研究

目的:研究复方中药Ⅰ号和Ⅱ号对人神经母细胞瘤细胞株SY5Y及人肺癌A549细胞株的影响。方法:采用MTT法观察药物对细胞的增殖抑制作用,流式细胞技术观察细胞周期变化,并且观察了细胞克隆形成率及细胞形态的变化。结果:两种复方中药都对这两种肿瘤细胞表现了不同程度的抑制作用,未观察到明显的细胞凋亡,细胞克隆形成率下降,细胞形态改变。结论:体外实验提示:复方中药Ⅰ号和Ⅱ号有抑癌作用。

观察两种复方中药对肿瘤细胞的增殖抑制作用

目的:本实验用流式细胞术等方法,观察复方中药溶癌I号、溶癌II号对Hela和SK两种肿瘤细胞株的增殖抑制作用。方法:先用MTT法观察药物对肿瘤细胞的增殖抑制作用,初步筛选药物作用的最佳浓度与时间,再用流式细胞仪分析细胞周期的变化,并观察药物对肿瘤细胞克隆形成率的影响。结果:两种复方中药均使肿瘤细胞的增殖受到抑制,使两种肿瘤细胞的克隆形成率均有下降,但细胞凋亡现象不明显。结论:说明复方中药溶癌I号、溶癌II号在体外对两种人癌细胞有明显的增殖抑制作用,有助于临床对恶性肿瘤的治疗。

一种抑制蛋白激酶CK_2活性的新多肽的分离和鉴别

从猪肾上腺髓质嗜铬细胞分泌颗粒裂解物中纯化出 3种新多肽 ,经N 末端降解分析和质谱测定 ,它们分别位于猪嗜铬颗粒蛋白A(CgA) 3 0 8— 3 2 4、3 0 8— 3 2 8及 3 0 8— 3 2 9肽段 ,具有相同N 端区 ,而C 端长度不同。合成的CgA 3 0 8— 3 2 4肽段 ,即GN 1 7在浓度低于 6μmol/L时即可竞争性抑制CK2 活性 ,IC50 为 5 0 μmol/L。