静脉注射脂多糖上调小鼠肺及肝CD14和Toll-like受体4表达

目的观察静脉注射脂多糖(lipopolysacchafide,LPS)致小鼠肺、肝组织及血液中LPS受体CD14、Toll-like receptor 4(TLR4)表达的变化.方法BALB/C小鼠随机分为5组,尾静脉注射LPS(7 mg/kg),分别于注后0、2、6、12和24 h取血及肺、肝组织.采用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)及Western Blot法分别检测肺和肝组织中CD14和TLR4 mRNA及蛋白表达,血清CD14(sCD14)蛋白表达.结果CD14和TLR4 mRNA在肺、肝组织中固有表达,LPS可使肺组织CD14和TLR4表达明显上调(P＜0.05),高峰出现在2-6 h(P＜0.05),24 h降至基础水平;而肝组织的变化明显滞后于肺,12 h达高峰(P＜0.05),24 h仍高于基础水平(P＜0.05).蛋白的变化与mRNA基本一致.血清CD14的表达则随时间延长而增加.结论LPS进入体内可诱导肺、肝和血液中内毒素受体CD14和TLR4的表达.不同组织中内毒素受体表达的时间差异表明肺是内毒素血症中较早受损的器官,肺组织损伤可能进一步引发肝损伤.

雷公藤多甙对急性移植物抗宿主病时小鼠T细胞及其亚群的影响

目的 :观察雷公藤多甙对急性移植物抗宿主病时小鼠脾、皮肤、肺、肠组织中T细胞及其亚群 (CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 细胞 )的影响 ,探讨雷公藤多甙对急性移植物抗宿主病的作用及机理。方法 :用直线加速器排空受鼠骨髓后注入供鼠骨髓与脾淋巴细胞的混合液 ,复制出急性移植物抗宿主病 (aGVHD)模型。观察雷公藤多甙、雷公藤多甙加环孢素A(CsA)、CsA加甲氨蝶呤对各组小鼠脾CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 细胞 (流式细胞仪检测 ) ,皮肤、肺、肠组织CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 细胞浸润情况 (应用免疫组化技术检测 )的影响。结果 :雷公藤多甙组小鼠脾、皮肤、肺组织CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 细胞明显低于异基因移植组 (P <0 0 5 ) ,而小肠组织CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 细胞变化不明显 (P >0 0 5 )。结论 :雷公藤多甙可降低脾T细胞及亚群数量 ,减少皮肤、肺的T细胞浸润 ,具有明显的抗aGVHD作用。

MAPK和NF-κB上调脂多糖诱导的小鼠肺微血管内皮细胞Toll-like受体4的表达

目的 观察MAPK和NF-κB在经脂多糖（LPS）诱导的小鼠肺微血管内皮细胞（PMVECs）Toll-1ike受体4（TLR4）表达增强中的作用。方法 分离培养PMVECs。不同浓度的LPS与PMVECs共培养2h，或与LPS（100μg/L）作用不同时间。用ELISA法检测培养上清液中TNF-α含量。分别用ERK抑制剂PD98059和P38MAPK抑制剂SB203580或NF-κB抑制剂PDTC进行干预。用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测TLR4和TNF-α mRNA。用Western-blot检测ERK／P38MAPK和核蛋白NF-κB的表达。结果 在LPS浓度为50～500μg／L时，作用于PMVECs 2h，或LPS100μg/L作用不同时间时，培养上清液中TNF-α含量呈剂量和时间依赖性显著增加（P〈0．01）。PMVECs表达TNF-α及TLR4mRNA增加，6h时达高峰。分别用上述抑制剂均可缓解上述变化，而同时联合使用PD98059和SB203580则进一步增强该抑制作用。上述抑制剂分别缓解LPS诱导的PMVECs表达ERK／P38MAPK和NF-κB蛋白增强。结论 MAPK和NF-κB上调给脂多糖诱导的小鼠PMVECs TLR4的表达。

银杏叶提取物对人工衰老大鼠肺肾功能的保护作用(英文)

背景:衰老大鼠静脉注射脂多糖后能导致肺损伤,进而发现随着肺损伤的进展,影响肾功能。银杏叶提取物具有一定的清除自由基、改善血液流变学和保护血管内皮细胞等功能。目的:研究人工衰老大鼠肺损伤后是否发生肾功能不全,以验证老年多器官功能不全的肺启动机制,并观察银杏叶提取物对其是否有保护作用。设计:以实验动物为观察对象的随机对照的实验。单位:中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系。材料:实验于2001-05/2003-01在中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系实验室完成。选用36只Wistar雄性大鼠。方法:给大鼠每天1次经腹腔注入D-半乳糖(50mg/kg),连续6周,复制衰老动物模型,再随机分为3组:对照组(静脉注射生理盐水);脂多糖组(静脉注射脂多糖,5mg/kg);银杏叶提取物+脂多糖组(注射脂多糖前7d开始,每天银杏叶提取物灌胃1次,31mg/kg)。各组大鼠在给生理盐水或脂多糖后2h或6h取血和肺、肾组织。主要观察指标:用比色法测定血中肌酐、尿素氮含量;血、肺、肾组织中丙二醛、NO2-/NO3-含量及谷胱甘肽过氧化物酶及Na+-K+-ATP酶活性的测定。结果:衰老大鼠在注射脂多糖后2,6h时已形成急性肺损伤。注射脂多糖后2h血中肌酐及尿素氮含量无明显升高,而6h时均显著升高,分别为(94.7±10.3)μmol/L,(11.4±1.9)mmol/L。在注射脂多糖后2h,血和肺组织中丙二醛犤(22.5±2.6)nmol/L,(25.8±2.9)μmol/g犦和NO2-/NO3-含量犤(58.5±6.8)mmol/L,(34.6±3.8)μmol/g犦均显著升高,而谷胱甘肽过氧化物酶犤(355.1±45.0)μkat/g犦及Na+-K+-ATP酶犤(886.3±97.2)nkat/g犦下降。上述指标的变化持续至观察的6h。而肾组织中上述指标仅在注射脂多糖后6h才有显著性变化。银杏叶提取物可显著缓解上述指标的变化。结论:脂多糖所致衰老大鼠的肺损伤可进一步诱导肾功能受损。银杏叶提取物对脂多糖诱发的衰老大鼠的急性肺损伤和由此诱导的肾功能受损有明显的保护作用。

衰老大鼠急性肺损伤诱导肾功能受损

目的 :观察衰老大鼠的急性肺损伤 (ALI)是否可进一步诱导肾功能受损。方法 :Wistar雄性大鼠 4 0只 ,复制成衰老模型 ,然后再随机分成对照组 (静脉注射生理盐水 ) ,ALI组 (静脉注射脂多糖 ,LPS)及LPS组 (左心室内注射LPS) ,后两组再分 2h及 6h组。每组 8只。注LPS后 2h或 6h收集血并取肺、肾。制备肺、肾组织匀浆待测。结果 :ALI组在注LPS后仅至 6h时血中肌酐 (Cr)、尿素氮 (BUN )含量才有显著升高 (均P <0 0 1)。而LPS组Cr、BUN含量均无显著升高。ALI组血中乳酸 (LD)、丙二醛 (MDA)及一氧化氮 (NO)含量在注LPS后 2h时均显著升高 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ;而肺组织中谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH -PX)及Na+ -K+ -ATPase活性均显著下降 (均P <0 0 1) ;上述变化持续至观察的 6h时。ALI组在注LPS后仅至 6h时 ,肾组织中MDA、NO含量才有显著升高 (均P <0 0 1)及GSH -PX、Na+ -K+ -ATPase活性显著下降 (P <0 0 1)。而在LPS组 ,除注LPS后 2h时的血中和 2h、6h的肺组织中NO含量显著升高 (均P <0 0 5 )及 2h时的肺组织中Na+ -K+ -ATPase活性显著下降 (P <0 0 5 )外 ,其它均无显著变化。结论 :给衰老大鼠静脉内注射 5mg/kg的LPS可致ALI,并可进一步诱导肾功能受损。

脂多糖致衰老大鼠急性肺损伤及心肌组织ATP酶等的变化

目的观察给衰老大鼠静脉或左心室内注入脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)后,是否发生急性肺损伤(acutelunginjury,ALI)以及心肌组织ATP酶等的改变情况。方法雄性Wistar大鼠40只复制成衰老模型。然后随机分成对照组(静脉注射生理盐水,n=8),ALI组(静脉注射5mg/kg体重LPS,n=16),及LPS组(左心室内注入相同剂量LPS,n=16)。注射后2h或6h收集血并取肺、心。制备肺、心组织匀浆。测肺湿/干重量比,用比色法测定蛋白、乳酸(LA)、一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)含量以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活性。结果ALI组大鼠在静脉注射LPS后2h,肺泡灌洗液中蛋白含量及肺湿/干重量比显著升高(P<0.01);血中LA、NO2-/NO3-和MDA含量也显著升高(P<0.01);同时,肺组织中NO2-/NO3-含量显著升高(P<0.01),而GSH-PX及Na+-K+-ATPase活性均显著下降(P<0.01)。上述变化持续至注射后6h时。但在心肌组织中,直至注射LPS后6h才出现MDA含量的显著升高(P<0.01),和GSH-PX、Na+-K+-ATPase及Ca2+-Mg2+-ATPase活性的显著下降(P<0.01)。而在LPS组,注射LPS后2h的血和2h、6h时的肺组织NO2-/NO3-含量均显著升高(P<0.05);注射后2h时肺组织中Na+-K+-ATPase活性显著下降(P<0.05)。其它指标无显著改变。结论给衰老大鼠静脉注?

高压氧对小鼠aGVHD时细胞因子浓度的影响

目的:观察异基因骨髓移植小鼠,经高压氧作用后,血清中促进aGVHD的细胞因子TNF-α、IL-2及抑制aGVHD的细胞因子IL-4、IL-10浓度及比值的变化,探讨HBO抗aGVHD机理,为HBO的临床应用提供实验依据。方法:复制aGVHD动物模型,经高压氧作用后,用ELISA法检测血清细胞因子浓度并计算比值。结果:经高压氧作用后,血清中细胞因子浓度及比值降低。结论:HBO可明显抑制aGVHD,提高aGVHD小鼠的生存率。

衰老大鼠急性肺损伤诱导肝功能受损的研究

目的 观察脂多糖 (LPS)致衰老大鼠的急性肺损伤 (ALI)是否可进一步诱发肝功能受损及银杏叶提取物 (GBE)对其是否有保护作用。方法 雄性Wistar大鼠 3 0只复制成衰老模型。再随机分成对照组 (静脉注射生理盐水 ) ;LPS组 (静脉注射LPS)及GBE +LPS组 (注LPS前 7天开始每天GBE灌胃 1次 )。注LPS后 2、6h收集血液并取肺、肝。制备肺、肝组织匀浆待测。结果 衰老大鼠在注射LPS后 2、6h时形成ALI。对照组注射LPS表明 ,2h血中总胆红素含量及谷丙转氨酶 (GPT)活性为(10 9± 0 6)mg/L、(2 6± 3 )U ,LPS 6h组为 (3 0 1± 2 1)mg/L、(88± 12 )U ,两组比较差异有显著性 (P均<0 0 0 1) ;对照组注射LPS表明 ,2h血和肺组织中每毫克蛋白中丙二醛 (MDA)含量分别为 (15 9±1 8) μmol/L、(18 8± 2 1)nmol,LPS 2h组为 (2 2 1± 1 9) μmol/L、(2 8 8± 3 1)nmol,两组比较差异有显著性 (P均 <0 0 0 1) ;而每毫克蛋白血和肺组织中超氧化物歧化酶 (SOD)活性对照组分别为 (2 5 5±2 6)mU/L、(3 6 1± 2 4)U ,LPS 2h组分别为 (2 0 6± 1 9)mU/L、(3 2 0± 2 7)U ,两组比较差异有显著性(P <0 0 1和 0 0 5 )。对照组注射LPS表明 ,2h时肺组织中每毫克蛋白中谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH PX)及Na+ K+ ATP酶活性?

银杏叶提取物对衰老大鼠急性肺损伤和肾功能受损的保护作用

目的 观察银杏叶提取物 (GBE)对脂多糖 (LPS)诱发的衰老大鼠急性肺损伤及由此而诱导的肾功能受损是否有保护作用。 方法 雄性Wistar大鼠 36只复制成衰老模型。再随机分成对照组 (静脉注射生理盐水 ) ;LPS组 (静脉注射LPS)及GBE +LPS组。注LPS或盐水后 2h或 6h ,收集血 ,并制备肺、肾组织匀浆待测。 结果 衰老大鼠在注LPS后 2h、6h时已形成急性肺损伤。注LPS后 2h血中肌酐及尿素氮含量无显著性升高 ,至 6h时均显著升高 ,分别由对照组的 (6 8 7±6 9) μmol/L及 (5 9± 0 6 )mmol/L升至 (94 7± 10 3) μmol/L及 (11 4± 1 9)mmol/L (均为P <0 0 1)。注LPS后 2h ,血和肺组织中丙二醛和NO2 -/NO3 -含量均显著升高 (均为P <0 0 1) ;而此时 ,肺组织中谷胱甘肽过氧化物酶及Na+ K+ ATPase活性均显著下降 (均为P <0 0 1)。上述指标的变化维持至 6h时。而注LPS后 2h时 ,肾组织中丙二醛及NO2 -/NO3 -含量和谷胱甘肽过氧化物酶及Na+ K+ ATPase活性均无显著性改变。但至 6h时 ,肾组织中丙二醛和NO2 -/NO3 -含量均显著升高 (均为P <0 0 1)。而谷胱甘肽过氧化物酶和Na+ K+ ATPase活性均显著下降 (均为P <0 0 1)。事先给予GBE可显著地缓解血、肺及肾组织中上述指标的变化 (P <0 0 5 )。