牙龈卟啉单胞菌通过miR-21-5p/RASA1/ERK信号通路促进食管鳞癌自噬

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)促进食管鳞癌(ESCC)细胞自噬发生的分子机制。方法Pg感染siAtg7或氯喹(CQ)预处理的KYSE70细胞和KYSE140细胞,Western blot检测Atg7、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和p62蛋白,荧光共聚焦显微镜检测mRFP-GFP-LC3标记ESCC细胞自噬流,CCK-8法检测ESCC细胞活性,迁移小室检测ESCC细胞迁移及侵袭能力。miR-21-5p inhibitor、RASA1过表达或U0126分别阻断miR-21-5p/RASA1/ERK信号通路,如上检测自噬相关表型变化。免疫组化检测ESCC组织中Pg丰度和LC3蛋白表达,RT-PCR检测ESCC及其癌旁组织中miR-21-5p的表达,统计分析Pg、LC3和miR-21-5p相关性。结果Pg感染诱导KYSE70细胞和KYSE140细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达上调、p62蛋白表达下调,增加了mRFP-GFP-LC3标记细胞中的红色、绿色和黄色荧光斑点数目和荧光强度,同时促进KYSE70细胞和KYSE140细胞增殖、迁移和侵袭能力增加,上述Pg诱导的ESCC细胞表型改变被CQ或siAtg7预处理逆转。miR-21-5p inhibitor、U0126或RASA1过表达质粒的预处理,也同样逆转了Pg对ESCC细胞自噬的促进作用。Pg丰度与miR-21-5p、LC3蛋白表达呈正相关。结论Pg通过miR-21-5p/RASA1/ERK信号通路促进ESCC自噬发生。

共表达网络鉴定食管鳞癌中抗肿瘤细胞毒性分子

目的鉴定新的抗食管鳞癌(ESCC)免疫细胞毒性相关分子。方法基于ESCC转录组表达谱数据,利用CIBERSORT反卷积算法计算ESCC样本中免疫细胞构成比;通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)构建基因模块;计算免疫细胞构成比与细胞毒性基因、共表达网络模块的相关性,确定关键模块。通过基因的模块隶属度、基因显著性和预后相关性,鉴定关键基因。结果WGCNA方法共构建30个基因模块,其中white模块包含了本研究纳入的所有细胞毒性相关基因(GZMA、PRF1、GZMB和IFNG),将其作为关键模块。关键模块共包含18个关键hub基因,其中8个基因表达异常与ESCC患者预后相关。结论通过基因共表达网络方法,鉴定到8个ESCC细胞毒性相关基因。

牙龈卟啉单胞菌通过上调HIF-1α抑制食管鳞癌细胞铁死亡

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonasgingivalis,P.gingivalis)抑制食管鳞癌(esophagealsquamous cellcarcinoma,ESCC)细胞铁死亡的分子机制。方法采用铁死亡诱导剂RSL3处理P.gingivalis感染和未感染的ES CC细胞,检测细胞活力以及细胞内丙二醛(malondialdehyde,MDA)、活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)和谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathioneperoxidase4,GPX4)等铁死亡标志物的表达水平变化。采用免疫组化、qRT-PCR、Western blot、免疫荧光等方法检测94例ESCC患者食管癌组织和P.gingivalis感染ESCC细胞中缺氧诱导因子-1α(hypoxia-in duciblefactor-1α,HIF-1α)及其靶基因的表达水平。分别在细胞水平和裸鼠皮下荷瘤模型中检测HIF-1α抑制剂LW6和RSL3联用后P.gingivalis感染对ESCC细胞铁死亡的影响。结果与RSL3单独处理组相比,P.gingivalis感染后ESCC细胞存活率显著升高(均P<0.01),胞内ROS和MDA水平显著降低(均P<0.05),GPX4表达升高。ESCC患者肿瘤组织中P.gingivalis与HIF-1α的表达呈显著正相关。P.gingivalis感染后ESCC细胞中HIF-1α及其靶基因表达量显著升高。LW6在体外细胞水平和裸鼠皮下ESCC荷瘤模型中,均能抑制P.gingivalis感染诱发的HIF-1α表达上调,从而促进ESCC铁死亡。结论HIF-1α介导P.gingivalis感染诱导的ESCC铁死亡抗性发生,提示联合HIF-1α抑制剂和铁死亡诱导剂可能作为ESCC治疗的新策略。

理发记

我的头发很长,早晨当我迷迷糊糊梳理长头发时,我很发愁。因为每次梳头时头皮都会被揪得生疼,而且还会掉很多根头发。妈妈决定带我去剪掉我的长头发。我一脸不情愿地和妈妈走向了理发店,其实我挺害怕理发的,如果剪不好了就会很丑。进了理发店,阿姨先帮我洗了个头,然后轻轻地揉搓着我的头发,打消了我害怕的心理。洗完头,阿姨用吹风机吹了吹头发。没错,这个也不是多么可怕。阿姨拿起了大剪刀,这才是令我害怕的。