耐受乙醇乳酸菌诱变的研究

以面包乳杆菌(Lactobacillus crustorum D2-5)和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum D5-5)为研究对象,分别选取不同浓度乙醇胁迫处理后,进行诱变育种,探究经乙醇胁迫后乳酸菌诱变育种的耐受性;根据最佳诱变剂量的条件,确定最佳诱变方法;以乙醇胁迫处理后乳酸杆菌的生长曲线,验证乙醇胁迫后乳酸菌诱变菌株的耐受性。结果表明:添加与乳酸菌悬浮液等体积的1%硫酸二乙酯(DES)化学诱变效果最佳,最适诱变时间为40 min,乙醇胁迫过程中诱变菌株的生长速率有所提高,以体积分数8%乙醇胁迫为例,24 h时,D2-5菌落总数的对数值由6.2提高至7.3,D5-5菌落总数的对数值由6.9提高至7.1。说明诱变育种有助于乳酸杆菌乙醇胁迫耐受性的提高,并获得乙醇耐受特性较好的菌株D2-5。

新疆哈族奶酪中产蛋白酶非发酵剂乳酸菌的筛选及其系统发育分析

以采集10份新疆塔城地区哈萨克族牧民自制的奶酪为原料,用改良的ROGOSA和MRS两种培养基对其分离纯化,共筛选出43株菌种,其中球菌32株,杆菌11株。对筛选出的菌株进行产蛋白酶和菌株自溶能力测定,结合生理生化特性和16S r DNA序列同源分析和建立系统发育树分析,对挑选出的10株优势菌进行了菌株分子生物学鉴定,鉴定结果表明:菌株R6-6自溶度最高,为42.32%;而自溶度最低的菌株为R4-4,达到6.21%;菌株R2-2、R4-2、R4-7为表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis);菌株R3-5、R10-6为乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici);菌株R3-2为戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus);菌株R6-6为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei);菌株R9-5、R9-6为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)。其中产蛋白酶的最优势非发酵剂乳酸菌(NSLAB)菌株为乳酸片球菌(P.acidilactici)。

新疆塔城牧区原料乳中酵母菌的分离鉴定

为研究新疆塔城牧区原料乳中酵母菌的分布情况,从该地区采集了7份原料乳样品,通过传统培养方法,采取形态学、生理生化特性鉴定、5.8S rDNA序列同源性分析相结合的方法,分离得到33株酵母菌,共鉴定出6个属8个种,其中20株库德毕赤酵母Pichia kudriavzevii(61%)为优势菌株;2株发酵毕赤酵母Pichia fermentans(6%);3株美极梅奇酵母Metschnikowia pulcherrima (9%);2株乳酸克鲁维酵母Kluyveromyces lactis (6%);2株马克思克鲁维酵母Kluyveromyces marxianus(6%);2株胶红酵母Rhodotorula mucilaginosa(6%);1株葡萄有孢汉逊酵母Hanseniaspora uvarum(3%);1株单孢酿酒酵母Kazachstania unispora(3%)。研究表明,该地区原料乳中的酵母菌多样性较好,有其独特的酵母菌资源,这为研究本地区的微生物资源提供了基础资料。

哈萨克族传统奶酪中NSLAB的分离鉴定

以12份新疆塔城地区哈萨克族传统奶酪为原料,采用ROGOSA和MRS两种培养基分离纯化,共筛选出38株菌种,其中球菌29株,杆菌9株。结合其酸化能力、自溶度、生理生化试验进行筛选,利用16S r DNA分析鉴定。结果表明:24 h酸化能力最弱的菌株为2-4,仅为1.57°T;4-10自溶度最低,为4.09%。经生理生化及16S r DNA基因序列分析鉴定,5-2、8-4、5-4、7-1为乳酸片球菌,4-10、8-7为戊糖片球菌,1-2、2-4、3-5为表皮葡萄球菌,11-1为干酪乳杆菌,11-3、11-6为鼠李糖乳杆菌。新疆塔城地区哈萨克族传统奶酪中优势NSLAB菌株为乳酸片球菌。