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一种从RNA Blot杂交膜上脱除探针的改进方法
被引量:
2
1
作者
姚志海
叶志华
+4 位作者
梁建庆
张向阳
柳海林
杜纲国
高冬梅
《生物技术》
CAS
CSCD
2004年第4期28-30,共3页
目的 :探讨脱除RNABlot膜上的杂交探针的方法 ,解决杂交中RNABlot膜重复使用的问题。方法 :经NBT BCIP化学显色的RNABlot杂交膜先用二甲基甲酰胺在 6 0℃处理 90min ,然后用脱探针溶液 (5 0 %去离子甲酰胺、5 0mmol LTris -HClpH7 5、5 ...
目的 :探讨脱除RNABlot膜上的杂交探针的方法 ,解决杂交中RNABlot膜重复使用的问题。方法 :经NBT BCIP化学显色的RNABlot杂交膜先用二甲基甲酰胺在 6 0℃处理 90min ,然后用脱探针溶液 (5 0 %去离子甲酰胺、5 0mmol LTris -HClpH7 5、5 %SDS)在 80℃处理 90min ,经过处理的膜再次用于下一轮的杂交。结果 :用这一改进的方法 ,可以完全脱除杂交膜上的地高辛标记的cDNA探针 ,RNABlot膜可以重复杂交 5轮以上 ,杂交带仍然保持清晰锐利。结论 :该改进方法操作简便 。
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关键词
RNA
Blot膜
杂交
脱除
二甲基甲酰胺
地高辛标记
CDNA探针
下载PDF
职称材料
题名
一种从RNA Blot杂交膜上脱除探针的改进方法
被引量:
2
1
作者
姚志海
叶志华
梁建庆
张向阳
柳海林
杜纲国
高冬梅
机构
深圳市君轩生物技术有限公司
广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室
出处
《生物技术》
CAS
CSCD
2004年第4期28-30,共3页
基金
广东省科技攻关项目 (2KM0 2 50 4G0 )
文摘
目的 :探讨脱除RNABlot膜上的杂交探针的方法 ,解决杂交中RNABlot膜重复使用的问题。方法 :经NBT BCIP化学显色的RNABlot杂交膜先用二甲基甲酰胺在 6 0℃处理 90min ,然后用脱探针溶液 (5 0 %去离子甲酰胺、5 0mmol LTris -HClpH7 5、5 %SDS)在 80℃处理 90min ,经过处理的膜再次用于下一轮的杂交。结果 :用这一改进的方法 ,可以完全脱除杂交膜上的地高辛标记的cDNA探针 ,RNABlot膜可以重复杂交 5轮以上 ,杂交带仍然保持清晰锐利。结论 :该改进方法操作简便 。
关键词
RNA
Blot膜
杂交
脱除
二甲基甲酰胺
地高辛标记
CDNA探针
Keywords
RNA Blot
hybridization
stripping
dimethylformamide
DIG-labeled
cDNA probe
分类号
Q781 [生物学—分子生物学]
Q522.6 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
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被引量
操作
1
一种从RNA Blot杂交膜上脱除探针的改进方法
姚志海
叶志华
梁建庆
张向阳
柳海林
杜纲国
高冬梅
《生物技术》
CAS
CSCD
2004
2
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