新型非甾醇蜕皮激素类杀虫剂对棉铃虫幼虫蜕皮的影响

用透射电镜技术研究了新型非甾醇蜕皮激素类杀虫剂W2 0 0 0 13对棉铃虫 4龄幼虫蜕皮的影响。结果表明W2 0 0 0 13使棉铃虫产生早熟、致死的蜕皮。中毒试虫 6h表现出内表皮层沉积加快 ,皮细胞中粗面型内质网大量增加 ,糖原颗粒减少 ;12h蜕皮间隙开始形成 ,细胞质凝集 ;2 4h新、旧表皮同时存在 ,皮细胞空泡化严重 ;36h新上表皮覆盖于仅沉积几层的新原表皮上 ,旧表皮仍然保持 ,皮细胞呈恶化、降解状态 ,宏观上虫体不表现出蜕皮行为而死亡。而且比较研究可见W2 0 0 0 13在中毒症状、生物测定结果、超微结构水平与RH 5 992具有相似的作用。

苦皮藤素IV麻醉机理的膜片钳研究

用膜片钳技术研究了植物杀虫剂苦皮藤素Ⅳ对棉铃虫幼虫离体培养中枢神经细胞钠通道门控过程的影响。结果表明,苦皮藤素Ⅳ对钠通道具有迅速的浓度依赖性阻滞作用,使电流-电压关系(I-V)曲线上移。0.1、1和10μmol/L苦皮藤素Ⅳ作用3min后,分别使钠电流峰值(INaMax)较给药前下降27.35%±4.05%、62.72%±2.81%和88.53%±5.56%(P<0.05),1和10μmol/L苦皮藤素Ⅳ还使钠通道的激活电压和峰电压分别向正电位方向移动了10mV和20mV左右。同时比较研究了利多卡因对棉铃虫幼虫神经细胞钠通道的影响,利多卡因对钠通道也具有阻滞作用,但有效作用浓度明显高于苦皮藤素Ⅳ。1、70mmol/L的利多卡因注射液作用3min后,使INaMax较用药前下降21.21%±2.52%和95.63%±2.10%(P<0.05)。苦皮藤素Ⅳ对钠通道门控过程的影响与利多卡因等局部麻醉剂非常相似,因此,对钠通道的阻滞作用可能是其发挥麻醉作用的重要机制。

苦参碱对棉铃虫幼虫神经细胞钠通道的影响

用全细胞膜片钳技术研究了生物碱类植物杀虫剂苦参碱对棉铃虫Helicoverpaarmigera幼虫离体培养中枢神经细胞钠离子通道门控过程的影响。结果表明 :苦参碱对棉铃虫幼虫神经细胞所表达的TTX (tetradotoxin ,河豚毒素 )敏感钠通道具有浓度依赖性阻滞作用 ,1,10和 10 0 μmol L的苦参碱作用 5min后 ,分别使钠电流峰值较给药前下降 (12 4 9± 1 6 7) %、(18 79±2 16 ) %和 (4 3 15± 8 17) % (n =8,P <0 0 5 )。苦参碱使钠电流的电流 电压关系曲线上移 ,但并不改变其激活电压、峰电压和电流 电压关系曲线的形状。

棉铃虫幼虫蜕皮过程及RH-5992对其蜕皮的影响

用透射电镜技术研究了棉铃虫 4龄幼虫在蜕皮过程中表皮层及皮细胞的变化 .同时用含蜕皮激素类杀虫剂RH-5 992的饲料饲喂 4龄幼虫 ,导致其产生早熟、异常的致死蜕皮 ,在超微结构水平比较了正常蜕皮与 RH-5 992对皮细胞和新表皮形成的影响 .

中华绒螯蟹大颚器官超微结构的研究

用透射电镜对中华绒螯蟹 ( Eriocheir sinensis)大颚器官 ( MO)的超微结构及眼柄切除后 MO的变化进行了研究 .中华绒螯蟹具大颚器官一对 ,位于大颚正后方大颚腱的基部 .MO由许多细胞团组成 ,细胞团间广布血淋巴通道和血淋巴窦 .细胞核内密集的异染色体聚集在核质的外缘 ,细胞质内有两种不同类型的无颗粒内质网及大量形状各异的线粒体 .与血淋巴通道相连的细胞膜 ,呈现不同程度的内陷和皱褶 .眼柄切除后 ,MO中无颗粒内质网数量减少 ,线粒体膨大 ,空泡数量增多 .

非甾醇蜕皮激素类杀虫剂的研究进展

非甾醇蜕皮激素类杀虫剂是近年来开发的新型、高效、具有蜕皮激素活性的昆虫生长调节剂。它引起昆虫特别是鳞翅目幼虫早熟 ,使幼虫蜕皮致死。此外 ,对一些昆虫还具有化学绝育性和神经中毒作用。非甾醇蜕皮激素类杀虫剂和蜕皮激素一样 ,作用于蜕皮激素受体 ,但由于在细胞中的稳定存在 ,致使一些基因不能正常表达 ,羽化激素的释放受到抑制 。

中华绒螯蟹大颚器分泌物的HPLC分析

利用三相提取法和高效液相色谱(HPLC)对中华绒螯蟹血淋巴及大颚器(MO)提取物进行了定性、定量的分析。结果发现在血淋巴及MO提取物中基本都可检测到三种物质:保幼激素Ⅲ(JHⅢ)、A和B。A物质的分泌受到眼柄因子的抑制调控,可能就是中华绒螯蟹MO的分泌物—法呢酸甲酯(MF)。

膜片钳技术及其应用

膜片钳技术是在电压钳基础上发展的 ,将尖端为 1 μm的玻璃微电极吸附到细胞表面 ,使微电极与细胞膜形成高阻封接 ,从而可记录到膜上 p A级的离子通道电流 ,目前已发展了多种记录模式 ,对细胞进行电压和电流钳制 ,以观察各种离子通道及其调控。此外膜片钳技术与胞内纤维荧光测钙技术、膜电容监测技术、碳纤微电极局部电化学微量检测技术、逆转录多聚酶链式反应技术 ( PCR)结合 ,在药理学、病理学、神经科学、脑科学、细胞生物学和分子生物学等生物科学方面 。

中华绒螯蟹大颚器官及眼柄因子对其影响的研究

透射电镜观察了中华绒螯蟹（Ｅｒｉｏｃｈｅｉｒ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）大颚器官及眼柄切除后对其超微结构的影响。大颚器官由许多细胞团组成，细胞团间有血淋巴通道和血淋巴窦。细胞团内的细胞呈放射状排列，细胞核位于向心端，密集的异染色体聚集在周边核质，细胞质内有两种不同类型的无颗粒内质网及大量形状各异的线粒体。细胞膜和血淋巴通道连接时，呈不同程度的内陷和褶皱。这些超微结构特点明显与合成甾类化合物的细胞特点一致。眼柄切除后，其结构出现了几种变化：无颗粒内质同数量减少，线粒体膨大，空泡数量增多，可能是大颚器官分泌活动增强所致。

甲壳动物保幼激素的研究

近年来 ,在甲壳动物大颚腺中发现了一种具有保幼激素活性的物质——法呢酸甲酯 MF ,它是与昆虫保幼激素 JH 结构相似的一种倍半萜类化合物 ,对甲壳动物的生长、发育和繁殖有重要调控作用 ,而

中华绒螯蟹窦腺的显微和超微结构

借助光学和电子显微镜观察了养殖河蟹 1龄蟹种、早熟蟹种和 2龄成蟹窦腺的形态结构和神经分泌物质释放方式。河蟹窦腺位于眼柄视神经节内髓与终髓交界处背侧 ,活体为乳白色 ,扁球状 ,大小约为 0 5 5mm×0 45mm× 0 2 3mm。窦腺呈囊状 ,腺体壁由膨大的神经分泌细胞末梢和胶质细胞组成 ,神经末梢内充满电子致密的分泌颗粒。根据颗粒的大小、形态和电子致密度等特征 ,区分出 6种不同类型的神经分泌末梢。河蟹窦腺中的神经分泌物质以胞吐作用方式释放 ,一些现象表明 ,神经胶质细胞参与神经分泌颗粒的释放。 1龄蟹种、早熟蟹种和 2龄成蟹窦腺的形态、结构无明显差异 ,但神经激素颗粒释放情况明显不同 ,从形态结构上证实了窦腺对养殖河蟹性腺发育的调控作用。

典型光活化毒素α-三噻吩对棉铃虫和亚洲玉米螟Na^+-K^+-ATPase的抑制作用

以棉铃虫 H elicoverpa armigera和亚洲玉米螟 Ostrinia furnacalis为试虫 ,建立 Na+- K+-ATPase最佳反应系统 ,研究典型光活化毒素 α-三噻吩 (简称 α- T)对 Na+- K+- ATPase的影响。棉铃虫 Na+- K+- ATPase活力最佳测试条件为酶源蛋白浓度 6μg/ m L ,反应温度 35～ 4 0℃ ,反应时间6min;亚洲玉米螟则为酶源蛋白浓度 8μg/ m L,反应温度 35℃ ,反应时间 6min。近紫外光照 (30 0～4 0 0 nm )对棉铃虫和亚洲玉米螟离体 Na+- K+- ATPase活力基本没有影响 ,但对活体活力有很强的抑制作用。光照和无光照条件下 ,α- T对两种昆虫离体和活体 Na+- K+- ATPase活力均有不同程度的抑制作用。光照组 α- T对亚洲玉米螟 Na+- K+- ATPase的抑制率高于无光照组 ,且处理浓度或剂量越高 ,其抑制率越大 ;对棉铃虫 Na+- K+-

光活化毒素α-T对棉铃虫和亚洲玉米螟离体水解酶系的影响

研究了典型光活化毒素α-T对棉铃虫和亚洲玉米螟羧酸酯酶 (Car E)、酸性磷酸酯酶 (AP)、碱性磷酸酯酶 (ALP)等水解酶离体活性的影响 .结果表明 ,高浓度 α-T可使棉铃虫 Car E、ALP和亚洲玉米螟 ALP活性降低 ,诱导棉铃虫 AP活性升高 ,但不影响亚洲玉米螟 Car E、AP活性 .光照下高浓度 α-T对两种昆虫 Car E、AP、ALP离体活性均有抑制作用 .

典型光活化毒素α-三噻吩对棉铃虫和亚洲玉米螟谷胱甘肽S-转移酶的影响

研究了典型光活化毒素α-三噻吩(简称α-T)对棉铃虫Helicoverpaarmigera和亚洲玉米螟Ostriniafurnacalis谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)的影响。结果表明:近紫外光照(300～400nm)对棉铃虫和亚洲玉米螟幼虫GSTs活性无显著影响,但两种昆虫GSTs对α-T的反应不同。无光照条件下,α-T对亚洲玉米螟离体GSTs活性没有影响,而高浓度α-T能抑制棉铃虫离体GSTs活性;高剂量α-T可使两种昆虫活体GSTs活性升高。光照条件下,高浓度和高剂量α-T抑制棉铃虫GSTs活性,而不影响亚洲玉米螟离体GSTs活性,但低剂量α-T抑制其活体活性,而高剂量α-T则诱导其活性增加。棉铃虫和亚洲玉米螟GSTs对α-T反应的差异,可能与它们对药剂的敏感性以及药剂在两者体内的穿透、运转、贮藏、代谢等生理特性上的差异有关。

cAMP和cGMP对棉铃虫神经细胞高电压激活钙通道的调节作用(英文)

用全细胞膜片钳法研究了cAMP和cGMP对棉铃虫Helicoverpaarmigera 3龄幼虫胸腹神经节细胞高电压激活钙通道的调节作用。细胞外液中加入腺苷酸环化酶 (AC)激活剂福斯克林 (forskolin) 0 .1mmol L ,对于Ba2 + 介导的钙通道电流激活电压、峰电压、峰电流变化以及通道激活和电流达到峰值的时间无影响。电极内液中加入 1mmol L的cGMP则明显抑制峰电流 ,且抑制作用呈时间依赖性和浓度依赖性 ,而对激活电压、峰电压无影响。结果提示 ,棉铃虫神经细胞高电压激活钙通道的活动可能不受细胞内cAMP水平提高的影响 。

苦皮藤素Ⅳ和Ⅴ混合物对棉铃虫幼虫神经细胞钠通道的影响

杀虫植物苦皮藤Celastrus angulatus的主要活性成分苦皮藤素Ⅳ和Ⅴ处理后昆虫的中毒症状分别表现为麻醉和兴奋,但苦皮藤素Ⅳ对苦皮藤素Ⅴ的毒杀效果具有增效作用,苦皮藤素Ⅴ对苦皮藤素Ⅳ的麻醉作用基本没有影响。应用全细胞膜片钳技术,就苦皮藤素Ⅳ和Ⅴ不同比例（3∶1,1∶1,1∶3）混合物对棉铃虫Helicoverpa armigera幼虫离体培养神经细胞钠离子通道的影响进行了比较。结果表明：苦皮藤素Ⅳ和苦皮藤素Ⅴ的不同比例混合物对钠通道（TTX-S）电流作用与二者所占比例有关,苦皮藤素Ⅳ比例大,表现出苦皮藤素Ⅳ对通道的阻滞效应,钠电流被抑制;苦皮藤素Ⅴ比例大,则表现出对通道的激活,钠电流增大。另外,两者不同比例混合物对钠通道（TTX-S）电流的激活电压无明显影响,但对峰值电压影响显著,可使其向正电位方向移动10～20mV。这些结果说明苦皮藤素Ⅳ和Ⅴ可能作用于一个相同的钠通道结合位点或别构偶联位点,二者对钠通道的作用是一种拮抗作用。

苦皮藤素Ⅳ和Ⅴ对棉铃虫幼虫神经细胞钠通道的影响

电压门控钠通道是神经细胞兴奋传导的基础,也是杀虫剂最主要的作用靶标。具有二氢沉香呋喃多元酯骨架的苦皮藤素Ⅳ和Ⅴ是卫矛科植物苦皮藤的主要杀虫活性成分,苦皮藤素Ⅳ和Ⅴ处理后昆虫的中毒症状分别表现为麻醉和兴奋。本实验应用全细胞膜片钳技术就苦皮藤素Ⅳ和Ⅴ对棉铃虫Helicoverpa armigera幼虫离体培养神经细胞钠离子通道的影响进行了比较。结果表明:苦皮藤素Ⅳ对TTX-敏感钠通道电流的抑制明显具有浓度和时间依赖性,高浓度(10μmol/L和1μmol/L)条件下,峰值电流迅速减小而被抑制,在较中间浓度(0.1μmol/L)时缓慢降低,而在低浓度(0.01μmol/L)下,峰值电流先增加然后再缓慢降低;苦皮藤素Ⅳ对激活电压无明显影响,但使峰值电压向正电位方向移动,在高浓度移动迅速,低浓度移动缓慢。苦皮藤素Ⅴ对TTX-敏感钠通道电流峰值有明显的增大作用,也有一定的浓度依赖性;对激活电压无明显影响,峰值电压在高浓度下变化不明显,在较低浓度(0.1μmol/L和0.01μmol/L)下向正电位方向移动明显。结果说明,苦皮藤素Ⅳ和Ⅴ可能在钠通道上有一个相同的靶标位点,但由于它们化学结构上的差异,可能对钠通道动力学的修饰不同,导致不同的生理效应,昆虫表现出不同的神经中毒症状。

中华绒鳌蟹幼蟹生长数学模型的初探

中华绒螯蟹（Ｅｒｉｏｃｈｉｒ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）俗称河蟹，是我国重要的淡水经济蟹．近年来养殖的河蟹，幼蟹性腺早熟现象十分普遍．为了探讨幼蟹性腺早熟的生理机制及其与自然河蟹生长的差异，我们对自然生长河蟹、非早熟精养河蟹和早熟精养河蟹的体重、体长进行了定期的测量，从而得出它们各自的生长数学模型，进一步证明河蟹体重的增长符合Ｗ＝ａＲｂ的幂回归方程，Ｗ代表体重，Ｒ代表累积天数，以日期来表示．幼蟹暂养期：自然河蟹生长公式为ＷＳ７－自＝４．２６４ ９４９×１０－３Ｒ０．７５３２６，而早熟精养河蟹的生长公式为Ｗ８８＝１．４８２７７６１６×１０－４Ｒ２．０７５１５３．在蟹种期（幼蟹期），自然河蟹生长公式为Ｗ自＝３．０８０ ６２８×１０－８Ｒ４．３９０ ５３，非早熟精养河蟹生长公式为Ｗ８７＝５．３２５ ９７×１０－８Ｒ４．２５９２３９，早熟精养河蟹生长公式为Ｗ８８＝５．４６４４３６×１０－５Ｒ２．７１７５８。无论从ａ值和ｂ值来看，早熟精养河蟹与自然河蟹差异较大；而非早熟河蟹与自然河蟹差异则较小。从而我们可以认为从 ５月 ２４日（大眼幼体的第 ７天）至 ７月 １８日的 ５４ ｄ内，幼蟹增重过快、蜕皮过频是造成性腺早熟的重要原因．

冬季河蟹人工育苗的生产试验

随着我国河蟹（Ｅｒｉｏｃｈｉｒ ｓｉｎｅｎｓｉｓ Ｈ． Ｍｉｍｅ－Ｅｄｗａｒｄｓ １８５３年）养殖业的日益发展，河蟹的人工繁育和增养殖技术不断完善，河蟹产量不断上升；但是，北方河蟹的性早熟，制约着河蟹的养殖，该试验旨在探讨蟹苗当年养成商品蟹的养殖途径。在北方当年苗养成商品蟹生长期仅有５个多月，所以很难达到商品规格。若在冬季育，经过暂养，春季投放大规格的仔蟹，当年养成商品蟹就成为可能。为此，我们在１９９４～１９９５年１月，在大港区滨海养殖场进行了冬季河蟹人工育苗的生产性试验，通过对生产车间的改造，亲蟹的暂养、交配、抱卵及人工育苗等，于１９９４年 １２月 ８日和 １９９５年１月１５日，共人工繁育蟹苗（大眼幼体）１１５ ｋｇ，取得了冬季育苗的成功。然后将蟹苗养成仔蟹，（在张家港）当年１０月，养成商品蟹，平均规格１００ｇ／只以上。取得了很高的经济效益和社会效益。

利用休眠控制河蟹性腺早熟的养殖试验

本文通过实验研究,探索出利用“休眠”控制河蟹性腺早熟的养殖方法,并于1993年6月10日至9月30日,在天津宁河县试验林场100亩的河蟹精养池塘进行了生产性试验,在6月10日至8月5日期间,停止投饵、换水,使幼蟹进入休眠状态,8月5日以后,驯化投喂人工配合饵料,并严格控制水质,到9月30日,幼蟹平均个体重达23.9g,与对照组平均体重25.7g相近似,试验组早熟率不超过4％,而对照池(50亩)几乎全部早熟。本法是一种控制幼蟹早熟简单而有效的方法。