Twist促进人肝癌细胞的迁移

目的:研究Twist对肝癌细胞迁移能力的影响。方法:RT-PCR方法检测Hep-11和Hep-12中Twist的表达情况。将Twist-cDNA转染Hep-11筛选得到稳定高表达Twist的细胞克隆Twist-Hep-11。构建pSuper-Twist-shRNA干扰载体,瞬时转染Hep-12细胞。用Boyden小室检测过表达和抑制Twist基因后对细胞迁移和侵袭能力的影响。RT-PCR和Western blot检测Hep-11上调Twist后的EMT标志分子的表达。结果:与Hep-11相比,Hep-12的Twist基因表达显著上调,Hep-12的迁移能力也强于Hep-11。Hep-11细胞过表达Twist后,其迁移能力明显增强;而干扰Hep-12细胞Twist表达后,其迁移能力亦明显下降。Hep-11过表达Twist后,N-cad、Vimentin表达明显上调,E-cad变化不明显。结论:Twist可以促进肝癌细胞的迁移,其机制可能与N-cad、Vimentin表达上调有关。

Myosin Va RNAi慢病毒载体的构建及对肺癌PG细胞运动和迁移能力的影响

目的构建人非常规肌球蛋白myosinVa基因RNAi慢病毒载体,并探讨其对人肺巨细胞癌PG细胞运动和迁移能力的影响。方法针对已经筛选确定的myosinVa基因RNAi有效靶序列,合成靶序列及其阴性对照的寡聚DNA,并连接到pSuper载体获得中间实验质粒pSuper-shM5A及阴性对照pSuper-shCON;然后将H1promoter-shM5A/shCON表达框重组到慢病毒载体plenti4上,分别得到plenti4-H1-shM5A和shCON载体,并进行慢病毒包装。随后用病毒上清感染PG细胞,并筛选出zeocin抗性的稳定细胞系PG-shM5A和shCON。通过RT-PCR方法检测PG-shM5A和shCON细胞的myosinVamRNA表达水平;用创伤愈合和Boyden小室实验测定PG-shM5A和shCON细胞的运动和迁移能力。结果限制性内切酶酶切和测序证实,成功构建myosinVaRNAi慢病毒载体plenti4-H1-shM5A。慢病毒包装成功后,感染PG细胞并获得zeocin抗性的细胞;用RT-PCR方法证明,myosinVamRNA被抑制70%以上。创伤愈合和Boyden小室实验表明,感染携带myosinVaRNAi慢病毒的PG细胞运动和迁移能力显著下调。结论成功构建myosinVaRNAi慢病毒载体plenti4-H1-shM5A,它能有效抑制人肺巨细胞癌PG细胞的myosinVa表达并降低其运动和迁移能力,初步揭示了myosinVa与肿瘤细胞恶性行为的相关性。

肿瘤与心力衰竭相关性研究进展

肿瘤和心力衰竭是全球死亡率最高的两类常见疾病。流行病学数据显示,肿瘤患者心力衰竭发生率逐年攀升,心力衰竭患者肿瘤易患性也逐年增高,提示二者存在密切相关性与潜在的关联机制。二者关联机制涉及神经内分泌激活、慢性炎症、氧化应激等病理生理学机制以及共同的危险因素。该文将对肿瘤与心力衰竭的临床相关性和关联机制进行综述,以期对肿瘤心脏病学的基础研究和临床实践提供线索和思路。

肿瘤抑制因子CYLD对细胞功能的调控作用

肿瘤抑制因子(cylindromatosis,CYLD)是一种在体内广泛分布的去泛素酶,其包含去泛素化酶结构域和富含甘氨酸细胞骨架相关蛋白结构域,前者可通过去泛素化信号分子,调控细胞信号传导途径,后者主要通过对微管的调节,改变多聚化和乙酰化过程,进而调控其组装和排列。CYLD主要通过对信号传导和细胞骨架的调节,从而调控细胞增殖、细胞凋亡、细胞运动和细胞分化等细胞功能。该文对近年来肿瘤抑制因子CYLD对细胞功能调控的研究进行概述。

人血清白蛋白融合技术在药物长效化改造中的应用

人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)融合技术是蛋白质药物长效化改造的一种通用技术,也是目前国内外生物制药研究的热点。在HSA融合技术的研究中,不同融合方式的融合蛋白活性的差异,提高HSA融合蛋白的表达产量以及HSA融合蛋白在表达过程中所出现的降解问题成为制约该技术发展的关键。现就人血清白蛋白融合技术在药物长效化改造应用中所涉及的融合方式以及融合蛋白的高效表达和降解问题进行了综述,希望为HSA融合技术的广泛应用提供一定的技术参考。