CLAG方案对初治诱导失败和难治复发急性髓系白血病患者疗效和预后评估

目的:探讨CLAG方案对初治诱导失败和难治复发急性髓系白血病(AML)患者疗效和预后评估。方法:回顾性分析笔者所在医院于2015年1月-2016年1月收治的4例初治诱导失败和6例难治复发AML患者的临床资料,采用克拉屈滨+阿糖胞苷+GCSF进行治疗,对效果和预后进行评估。结果:6例形态学完全缓解,2例部分缓解,2例未缓解,治疗有效率为80%。10例均出现4级白细胞减少、血小板减少和不同部位的感染。治疗后总生存时间为(19.87±3.21)个月,无复发生存时间为(13.27±3.02)个月,随访2年期间4例死亡。结论:CLAG方案对初治诱导失败和难治复发AML患者短期缓解疗效好,但仍应桥接异基因造血干细胞移植以获得长期疗效。

青蒿琥酯对耐地塞米松的多发性骨髓瘤细胞株增殖及NF-κB p65、P-gp表达影响

目的探讨青蒿琥酯对耐地塞米松人多发性骨髓瘤(MM)细胞株MM.1R增殖的影响,并探讨其可能作用机制。方法取对数生长期MM.1S、对塞米松敏感的MM细胞株MM.1R,各分为空白对照组、地塞米松组、青蒿琥酯组、地塞米松+青蒿琥酯组,分别加入等量培养液、20 ng/m L的地塞米松、25μg/m L的青蒿琥酯、20 ng/m L的地塞米松+25μg/m L的青蒿琥酯,观测各组细胞增殖情况,计算细胞增殖抑制率。取MM.1R细胞加入终浓度为25μg/m L的青蒿琥酯,分别于给药前、给药24 h、给药48 h检测细胞核转录因子κB(NF-κB)p65蛋白、P糖蛋白(P-gp)蛋白的表达。结果给药24 h时,MM.1S细胞地塞米松组、青蒿琥酯组、地塞米松+青蒿琥酯组的细胞增殖抑制率分别为20.41%±2.75%、29.07%±2.71%、68.92%±4.12%,组间两两比较,P均<0.05;给药24 h,MM.1R细胞地塞米松组、青蒿琥酯组、地塞米松+青蒿琥酯组的细胞增殖抑制率分别对为4.13%±3.10%、27.43%±2.67%、60.14±3.24%,组间两两比较,P均<0.05;青蒿琥酯给药前、给药24 h、给药48 h,MM.1R细胞NF-κB p65蛋白的相对表达量分别为0.89±0.21、0.42±0.13、0.23±0.08;P-gp蛋白的相对表达量分别为0.86±0.19、0.43±0.13、0.25±0.09,随干预时间增加,MM.1R细胞NF-κB p65、P-gp蛋白的相对表达量均降低(P均<0.05)。结论青蒿琥酯可抑制MM.1S以及MM.1R细胞的增殖,与地塞米松联用有协同效应。青蒿琥酯抑制MM.1R细胞增殖的机制可能为下调NF-κB p65、P-gp蛋白的表达。

双氢青蒿素人对急性髓系白血病HL-60细胞凋亡的诱导作用

目的探讨双氢青蒿素诱导人急性髓系白血病HL-60细胞凋亡的作用和机制。方法用二甲氧唑黄细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测双氢青蒿素对HL-60细胞生长的抑制作用,Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞内线粒体膜电位变化,分光光度法检测细胞Caspase-3活性变化。结果双氢青蒿素对HL-60细胞生长有抑制作用,呈剂量依赖性,并能诱导HL-60细胞凋亡,使线粒体膜去极化,增强Caspase-3活性。结论双氢青蒿素能抑制人急性髓系白血病HL-60细胞生长,并诱导细胞凋亡,可能与线粒体凋亡通路有关。

青蒿琥酯联合来那度胺对多发性骨髓瘤耐药细胞株的作用

目的探讨青蒿琥酯联合来那度胺对多发性骨髓瘤耐药(MM.1R)细胞株增殖的影响并分析其作用机制。方法实验设4组,空白对照组只加RPMI 1640培养液、来那度胺组加20μmol/L来那度胺、青蒿琥酯组加25μg/m L青蒿琥酯、来那度胺联合青蒿琥酯组加20μmol/L来那度胺浓度和25μg/m L青蒿琥酯浓度,终体积为200μL,分别对MM.1R细胞株处理24和48 h,MTT法检测细胞增殖;Western blot检测来那度胺联合青蒿琥酯处理24和48 h,MM.1R细胞株NF-κB P65蛋白,Bcl-2家族抗凋亡蛋白Bcl-xl、Mcl-1、p-Bad,多药耐药基因MDR1蛋白表达产物P-gp的表达水平。结果来那度胺、青蒿琥酯、来那度胺联合青蒿琥酯处理24和48 h,各组抑制率分别为15.16%、28.28%、45.98%和17.19%、34.53%、65.16%,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),来那度胺联合青蒿琥酯组抑制率高于单药处理组(P<0.05),两药联合有良好的协同效应,两药联合处理48 h抑制率高于24 h,抑制效应呈时间依赖性;来那度胺联合青蒿琥酯处理24和48 h,MM.1R细胞株P-gp、NF-κB P65、Bcl-xl、Mcl-1、p-Bad表达量均低于对照组(P<0.05),两药联合处理48 h,MM.1R细胞株NF-κB P65、Bcl-xl、Mcl-1、p-Bad蛋白表达量低于24 h(P<0.05),表现出时间依赖性。结论青蒿琥酯、来那度胺可抑制耐药MM细胞增殖,两药联合有协同效应,时间依赖性下调NF-κB P65蛋白、Bcl-2家族抗凋亡蛋白Bcl-xl、Mcl-1、p-Bad的表达,降低P-gp表达水平可能为其逆转肿瘤细胞耐药的作用机制。

rhG-CSF对健康供者外周血粒细胞形态的影响

目的观察30例健康供者在应用rhG-CSF动员前后外周血中性粒细胞形态有无改变。方法注射rhG-CSF前后采集静脉血制备血涂片,pH6.4～6.8条件下瑞特-姬姆萨混合染色后在油镜下观察中性粒细胞形态,同时进行中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色、pH5.4条件下姬氏染色观察中毒颗粒。结果应用rhG-CSF前1 d中性粒细胞形态无明显异常,中毒颗粒、NAP阳性率及积分值均在正常范围内;应用rhG-CSF后中毒颗粒、NAP阳性率及积分明显增高,96%的中性粒细胞胞体偏大,胞浆内见大量"中毒"性颗粒、D hle小体、空泡数量增加。结论应用rhG-CSF可引起外周血中性粒细胞出现明显的形态变化。

姜黄素提高白血病KG1a细胞对同种异体NK细胞杀伤的敏感性及其分子机制探讨

目的:研究姜黄素作用前后白血病KG1a细胞对同种异体自然杀伤(NK)细胞杀伤的敏感性变化,并初步探讨其分子机制。方法:以对同种异体NK细胞杀伤高度敏感的白血病K562细胞为对照,乳酸脱氢酶释放法检测KG1a细胞对同种异体NK细胞杀伤的敏感性,流式细胞仪检测细胞表面NKG2D配体(MICA/B、ULBP1、ULBP2、ULBP3)和HLA-Ⅰ类分子蛋白表达,逆转录PCR法检测细胞表面NKG2D配体和HLA-Ⅰ基因mRNA的表达水平。CCK-8法检测姜黄素对KG1a细胞半数抑制量(IC50),以此含量作用KG1a细胞,再次乳酸脱氢酶释放法检测姜黄素作用后的KG1a对同种异体NK细胞杀伤的敏感性,流式细胞仪检测姜黄素作用后的KG1a细胞表面NKG2D配体和HLA-Ⅰ类分子蛋白表达水平。结果:与K562细胞比较,KG1a细胞对同种异体NK细胞杀伤呈低度敏感,KG1a细胞表面NKG2D各配体蛋白表达阳性率均明显低于K562细胞(P<0.01),HLA-Ⅰ蛋白表达阳性率则明显高于K562细胞(P<0.01);在mRNA水平两种白血病细胞表面均有NKG2D配体和HLA-Ⅰ基因表达。当效靶比为5∶1、10∶1、20∶1时,姜黄素作用后NK细胞对KG1a细胞杀伤率明显高于作用前(P<0.01);作用后KG1a细胞各NKG2D配体表达率均明显升高(P<0.05或0.01),HLA-Ⅰ类分子无明显变化(P>0.05)。结论:姜黄素能提高KG1a细胞对同种异体NK细胞杀伤的敏感性,其机制可能与姜黄素提高KG1a细胞表面NKG2D配体的表达有关。

急性髓系白血病应用G-CSF后对中性粒细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的探讨急性髓系白血病患者化疗后应用重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)治疗对中性粒细胞碱性磷酸酶活性(NAP)的变化及其临床意义。方法选择97例急性髓系白血病患者作为观察组,检测使用rhG-CSF治疗前后NAP的活性,另选29例急性髓系白血病患者作为对照组,单用常规化疗,化疗前后均未予以rhG-CSF治疗,检测化疗前后NAP的变化。结果观察组与对照组比较,应用rhG-CSF治疗后NAP的活性明显增高,两者比较有显著性差异(p<0.01)。结论 rhG-CSF能明显提高急性髓系白血病患者化疗后NAP的活性,从而提高机体抗感染能力。

调节性T细胞的变化对重型再生障碍性贫血临床转归的意义

目的了解调节性T细胞(Tregs)在再生障碍性贫血患者中的表达水平在疾病过程中的变化规律,探讨Tregs在再生障碍性贫血发病机制中的作用及其作为疾病预后和疗效判断指标的可能性。方法以流式细胞术方法检测21例重型再生障碍性贫血患者外周血单个核细胞中Tregs水平在经免疫抑制剂治疗前后的变化,并与正常对照组相比较。结果重型再障患者Tregs数量较正常人明显减少,而治疗有效者Tregs水平与正常人无差异,无效者Tregs无明显变化。结论 Tregs可能对维持正常的造血至关重要,Tregs的减少同再障的发生密切相关,并可以作为监测再障疗效的指标。

伊马替尼对慢性粒细胞性白血病患者血小板参数、凝血及纤溶功能的影响

目的伊马替尼对慢性粒细胞性白血病(CML)患者血小板参数、凝血及纤溶功能的影响。方法选取我院2006年2月至2016年8月期间CML患者112例作为研究组,同期我院进行体检的健康者112例作为正常对照组。研究组给予伊马替尼治疗。于治疗前和治疗后3个月,检测血小板参数,凝血和纤溶指标,观察并记录患者不良反应。结果研究组治疗前PLT水平显著高于对照组(P<0.05),治疗后PLT水平显著降低(P<0.05),研究组PCT、MPV以及PDW治疗前后与对照组相比,差异没有统计学意义(P>0.05);研究组治疗前Fbg、D-D水平显著高于对照组(P<0.05),治疗后Fbg、D-D水平显著降低(P<0.05),研究组治疗前后PT、TT、a PTT与对照组相比,差异没有统计学意义(P>0.05);非血液学不良反应程度较轻,血液学不良反应:粒细胞减少57例(占50.89%),血小板减少26例(占23.21%),及时减少伊马替尼用量,并给予G-CSF治疗,均好转。结论伊马替尼治疗CML患者,可使血小板计数显著降低,对血小板形态影响不大,可使Fbg、D-D显著降低至正常水平,调节凝血纤溶系统功能。

系统性红斑狼疮合并肺部感染的预后分析

目的 探讨影响系统性红斑狼疮 (SLE)合并肺部感染病人预后的因素。方法 以病例 -对照研究为策略。研究对象为 1 999～ 2 0 0 1年在两家教学医院住院的SLE合并肺部感染连续性病人 1 2 6例。以 3 2例死亡者为病例组 ,另外 94例存活者为对照组。研究因素包括性别、年龄、病程、病原体、SLE各种并发症、SLE疾病活动指数 (SLEDAI)、主要的治疗方法、实验室各常规、生化、免疫学指标、各辅助检查等 48项。统计学方法采用Logistic回归分析。结果 SLEDAI积分的OR =1 .1 8(95 %CI:1 .0 3～ 2 .2 7) ,血浆白蛋白水平 (g L)的OR =0 .91 (95 %CI:0 .82～ 0 .98) ,尿量 (L 2 4hr)的OR =0 .6 4 (95 %CI:0 .46～ 0 .81 ) ,静脉输注免疫球蛋白治疗的OR =0 .82 (95 %CI:0 .74～ 0 .89) ,环磷酰胺冲击治疗的OR =2 .0 5 (95 %CI:1 .0 2～ 4.1 3 )。结论 合并肺部感染的SLE住院病人中 ,提高血浆白蛋白水平、增加尿量和运用免疫球蛋白治疗 ,可以降低病死率 ;而SLEDAI积分增高和环磷酰胺冲击治疗为其危险因素。

减低预处理剂量的异基因造血干细胞移植治疗难治性急性白血病

目的 探讨减低预处理剂量的异基因造血干细胞移植在难治性急性白血病治疗中的安全性和疗效.方法 6例难治性急性白血病,其中5例耐药复发,1例继发性白血病,经常规化疗2～11个疗程未能达到完全缓解.预处理方案为减低预处理剂量的BuCy方案.结果 除1例死于肠道Ⅳ度急性GVHD外,其余5例均获得造血重建,各脏器预处理相关毒性（RRT）大多数为Ⅰ～Ⅱ级,未发生严重预处理相关并发症.移植后11～24 d均有经DNA检测证实的完全供者嵌合.发生急性GVHD 4例,2例为Ⅳ度肠道GVHD,分别于＋18 d和＋64d死亡.1例为Ⅰ度皮肤GVHD治愈,1例先后出现Ⅳ度皮肤aGVHD和肝脏cGVHD经治疗得到良好控制,无白血病生存.3例移植后发生髓外软组织肿瘤（EMD）,采用联合化疗＋放疗、供者淋巴细胞输注（DLI）,2例进行了二次移植,2例无病生存,1例带瘤生存.结论 减低预处理剂量的BuCy方案治疗难治复发性急性白血病,有较好的耐受性,可取得完全型供者细胞植入及血液学缓解,但有可能增加髓外复发的风险.

苍艾香薰油熏蒸法在层流病房感染控制中的应用效果观察

目的:研究苍艾香薰油熏蒸法在无菌层流病房感染控制中的应用效果。方法:选择2015年12月—2017年12月间广东省第二人民医院血液科入住无菌层流病房的72例患者,按照床号先后顺序划分为观察组与对照组各36例,其中1、2、3、4、5号为观察组,6、7、8、9、10号为对照组,对照组采用空气消毒机进行早晚消毒处理,观察组每日采用苍艾香薰熏蒸空气消毒,每周对病房内各个区域采用细菌培养法或ATP荧光检测技术进行检测,统计患者搬离病房保护前院内感染发生率、各物品细菌菌落总数、住院治疗及花费。结果:采用空气消毒机进行早晚消毒处理后,每周同一时间检测,测量病房内空气、物体表面、医护人员手的细菌菌落总数,结果提示观察组各指标值均优于对照组,(t=9.748、12.746、17.775,P <0.05)。观察组36例住院患者中,院内感染发生率低、患者层流病房停留时间、治疗费用、抗菌药物使用时间、感染开始及治疗时间均优于对照组,P <0.05。结论:相较于传统空气消毒机处理,在无菌层流病房采用苍艾香薰熏蒸空气消毒法,取得效果较好,可有效控制病房内各物品菌落总数,降低感染率,缩短住院时间。

血浆纤维蛋白原、中性粒细胞/淋巴细胞比值评估Guillain-Barrés综合征严重程度的预测价值

目的探索血浆纤维蛋白原(FIB)及中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)对Guillain-Barrés综合征(GBS)疾病严重程度的预测价值。方法选取蚌埠医学院第一附属医院2016年1月至2020年12月收治的109例GBS患者,根据住院免疫治疗前休斯功能分级量表(HFGS)分为轻度组66例及中重度组43例,比较两组年龄、性别、前驱感染史类型、发病至免疫治疗时间、免疫治疗前HFGS评分、血浆白蛋白、三酰甘油、C反应蛋白(CRP)、FIB、NLR等指标的差异。结果轻度组与中重度组之间年龄、白蛋白、三酰甘油、CRP、FIB、D-二聚体、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、NLR及血小板/淋巴细胞比值差异均有统计学意义(均P<0.05)。通过多因素Logstic回归分析血浆FIB和NLR水平是影响GBS患者疾病严重程度的独立危险因素(OR=10.78,P<0.05;OR=2.23,P<0.05)。ROC曲线显示,血浆FIB预测中重度GBS的曲线下面积是0.912,最佳截断点是3.61,灵敏度及特异性分别是90.7%、77.3%;NLR预测中重度GBS的曲线下面积是0.856,最佳截断点是4.11,灵敏度及特异性分别是72.1%、90.9%。Spearman相关分析结果显示,血浆FIB、NLR与免疫治疗前HFGS评分呈正相关(r=0.610,P<0.05;r=0.549,P<0.05)。结论血浆FIB、NLR对评估GBS疾病严重程度有良好的预测价值。

血管性认知障碍患者血清胱抑素C水平研究

目的 明确血清胱抑素C(CysC)在血管性认知障碍(VCI)患者中的表达,探讨两者间的相关性及CysC的临床预测价值。方法 纳入蚌埠医学院第一附属医院2021年1月-2022年2月诊治的VCI患者96例。根据患者日常生活能力及蒙特利尔认知量表(MoCA)评分将患者分为血管性痴呆(VaD)组(35例)和血管性认知障碍非痴呆(VCIND)组(61例),另选取83例认知和颅脑CT/MRI均表现正常的健康老人为对照(NC)组。比较3组基线资料及CysC水平,分析CysC与VCI患者总体认知及特定认知域的关系,采用二元logistic回归分析和ROC曲线评估VCI发生的相关危险因素及CysC对其发生的预测价值。结果 3组年龄、高血压、糖尿病、卒中史、CysC和MoCA评分差异有统计学意义(均P<0.05);NC组、VCIND组和VaD组CysC表达水平依次升高,两两比较差异有统计学意义(均P<0.05);CysC与VCI患者MoCA总评分以及视空间与执行力、命名、计算与注意力、语言、定向、延迟记忆呈负相关关系(均P<0.05);Logistic回归分析显示CysC表达升高可能是VCI发生的独立危险因素(P<0.05);ROC曲线分析显示CysC预测VCI发生的AUC为0.758,灵敏度为70.8%,特异度为77.1%,最佳截断值为0.99 mg/L。结论 血清胱抑素C在VCI中高表达并与认知损害严重程度相关,是认知障碍发生的独立影响因素,有望成为VCI早期评估的生物学指标。

经皮肺穿刺活检在血液病患者侵袭性真菌病中的诊断价值

血液病患者侵袭性真菌病（IFD）的发病率呈逐年上升趋势。血液病患者常伴有血细胞减少、免疫功能不全，且大剂量激素、免疫抑制剂以及各种广谱抗生素的大量应用，使得血液病患者成为真菌感染的高危人群。肺部真菌感染居深部真菌感染的首位，目前常用的检查手段如胸部CT、病原培养、抗原抗体检测等在疾病确诊方面均存在不足，而肺组织病理学结果是确诊IFD的金标准，

青蒿琥酯对硼替佐米耐药骨髓瘤细胞株的耐药逆转作用及机制

目的:探讨青蒿琥酯对硼替佐米耐药骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞株的增殖抑制作用,并探讨其逆转骨髓瘤细胞耐药的作用机制。方法:采用硼替佐米浓度梯度递增法,以人MM细胞株NCI-H929为亲本,建立硼替佐米耐药的NCIH929细胞株NCI-H929BR。采用噻唑蓝(MTT)比色法检测青蒿琥酯对NCI-H929BR的增殖抑制及对硼替佐米的耐药逆转作用;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测核转录因子-κB p65(nuclear factor-κB p65,NF-κB p65)蛋白,磷酸化核转录因子-κB p65(phospho-nuclear factor-κB p65,NF-κB p-p65)蛋白,P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp),B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)蛋白以及Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)的表达变化。结果:采用浓度梯度递增法成功建立了硼替佐米耐药的NCI-H929细胞株NCI-H929BR,其耐药倍数为20.2倍。青蒿琥酯对NCI-H929BR有明显的增殖抑制作用,抑制效应呈浓度依赖性;硼替佐米(50 nmol·L-1)单药对NCI-H929BR无明显增殖抑制作用,青蒿琥酯(12.5 mg·L-1)单药的抑制率为(23.53±2.21)%(P<0.05),两药联合的抑制率为(60.71±3.43)%(P<0.01);青蒿琥酯处理后,NCI-H929BR的凋亡率上升,NF-κB p65,NF-κB p-p65,P-gp,Bcl-2表达下降,Bax表达上升,呈浓度依赖性。结论:青蒿琥酯可抑制NCI-H929BR的增殖,促进细胞凋亡,逆转其对硼替佐米的耐药性,下调NF-κB p65,p-p65,P-gp以及Bcl-2的表达,上调Bax的表达可能为其逆转肿瘤细胞耐药的作用机制。

急性脑梗死患者miR-184表达水平与病情严重程度及炎性因子的相关性研究

目的 探讨急性脑梗死(ACI)患者血清miR-184的表达水平与病情严重程度、梗死灶体积大小与炎性因子的相关性。方法 纳入蚌埠医学院第一附属医院神经内科2021年1—12月住院的ACI患者74例,健康体检者41例,采用qPCR、ELISA法检测2组血清miR-184、IL-6、TNF-α、CRP表达水平并进行比较,应用Spearman相关分析研究ACI患者miR-184水平与病情严重程度及与炎性因子的相关性。结果 与对照组比较,ACI组miR-184水平降低(P<0.001),IL-6、TNF-α和CRP水平升高(均P<0.05),且梗死灶体积越大,NHISS评分越高,miR-184水平越低。Spearman相关性分析结果显示:ACI患者血清miR-184水平与病情严重程度、梗死灶体积呈负相关关系(rs=-0.641、-0.620,均P<0.05),ACI患者血清miR-184水平与炎性因子IL-6、TNF-α、CRP水平也具有相关性(rs=-0.560、-0.389、-0.565,均P<0.05)。结论 miR-184与脑梗死病情严重程度、梗死灶体积及炎性因子具有相关性,miR-184可以作为诊断ACI及评估病情严重程度的血清学标志物。