胱抑素C对氧化型低密度脂蛋白诱导的人血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的:研究胱抑素C(cystatin C)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人血管平滑肌细胞(VSMC)的作用,以探讨cystatin C在心血管疾病中的生物学特性。方法:利用ox-LDL诱导人VSMC,MTT法检测ox-LDL诱导时间及浓度对细胞存活率的影响,确定ox-LDL最佳诱导浓度和时间,将对数生长期的人VSMC随机分成正常细胞组、pCDNA3.1-cystatin C转染组、ox-LDL诱导组以及ox-LDL+pCDNA3.1-cystatin C转染组,检测各组细胞乳酸脱氢酶(LDH)、活性氧(ROS)、三磷酸腺苷(ATP)生成量以及caspase-3活性变化,并通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting法测定各组凋亡相关基因bax、bcl-2和Bax、Bcl-2蛋白的表达情况。结果:ox-LDL+pCDNA3.1-cystatin C转染组与ox-LDL诱导组比较,LDH、ROS生成量和caspase-3表达量明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);ATP生成量显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR和Western blotting法测定显示ox-LDL诱导组促凋亡基因bax及Bax蛋白表达增加、抗凋亡基因bcl-2和Bcl-2蛋白表达减少,ox-LDL+pCDNA3.1-cystatin C转染组Bcl-2表达增加、Bax表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Cystatin C抑制ox-LDL诱导的VSMC凋亡,其机制可能与其上调Bcl-2及下调Bax表达有关。

脂蛋白相关磷脂酶A_2与兔易损斑块的相关性研究

目的:建立易损斑块动物模型,观察探讨脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、基质金属蛋白酶(MMP-9)在易损斑块中的表达规律。方法:实验新西兰雄兔48只随机分为对照组、稳定斑块组、p53基因组和p53+药物组。对照组假手术后普通饲料喂养;稳定斑块组、p53基因和p53+药物组行腹主动脉球囊拉伤后高脂喂养12周,p53基因和p53+药物组于10周末行腹主动脉斑块形成处转染人野生型p53基因重组腺病毒载体,p53+药物组于12周末给与中国圆斑蝰蛇毒和组胺药物触发斑块破裂。4组兔于实验第1d和处死前检测Lp-PLA2、hs-CRP、MMP-9、HDL、LDL、VLDL血清指标,处死后取腹主动脉斑块处病理标本并做局部原位杂交、免疫组织化学分析。结果:稳定斑块组、p53基因组和p53基因+药物触发组血清Lp-PLA2、MMP-9第12周末明显高于对照组和实验第1d(P<0.05);p53基因组和p53基因+药物触发组血清Lp-PLA2及hs-CRP水平明显高于对照组和稳定斑块组,差别显著(P<0.05);p53基因+药物触发组与p53基因组比较血清Lp-PLA2、hs-CRP、MMP-9水平均差别明显(P<0.05)。第12周末,病理结果示4组兔分别为正常动脉血管、稳定粥样硬化斑块、易损斑块、破裂斑块模型,在p53基因组和p53基因+药物触发组纤维帽厚度明显低于稳定斑块组(P<0.05);p53基因+药物触发组斑块破裂、血栓形成明显高于p53基因组。血清Lp-PLA2与斑块纤维帽厚度呈明显负相关性(r=-0.710,P<0.01),hs-CRP、MMP-9与纤维帽厚度无明显相关关系(P>0.05)。结论:在已建立的动脉粥样硬化动物易损斑块模型上,动脉血清与组织Lp-PLA2、hs-CRP、MMP-9的表达规律表明,Lp-PLA2与斑块的不稳定性相关性好,结合hs-CRP、MMP-9检测可更好阐释斑块的性质;为发现易损斑块并预测斑块稳定性提供了基础实验依据。

葛根素对球囊损伤后再狭窄过程中组织蛋白酶S及胱蛋白C表达的影响

目的研究葛根素对动脉球囊损伤后再狭窄形成过程中组织蛋白酶S(cathepsin S,CatS)及其抑制剂胱蛋白C(cystatin C,CysC)表达的影响。方法建立兔髂-腹主动脉球囊损伤后再狭窄模型,观察应用葛根素治疗前后再狭窄形成的范围、再狭窄局部CatS及其抑制剂CysC的表达变化以及内皮下胶原的变化。结果葛根素组[100 mg/(kg.d)]与球囊损伤组比较,再狭窄范围明显减小,差异具有统计学意义(P<0.05);CatS的表达水平减低,差异具有统计学意义(P<0.05);CysC表达水平差异无统计学意义(P>0.05);内皮下胶原含量减少,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论葛根素可降低球囊损伤部位再狭窄形成过程中CatS表达、减少斑块内胶原的聚集而发挥一定的抑制再狭窄形成作用,但对CysC调节作用不显著。

血浆β-血小板球蛋白和血小板第4因子的临床价值

目的探讨血小板释放功能与急性冠状动脉综合征(ACS)发病的关系。方法采用放射免疫法对21例急性心肌梗死(AMI)患者、23例不稳定型心绞痛(UA)患者及20例正常人的血浆β血小板球蛋白(βTG)和血小板第4因子(PF4)含量进行测定。结果AMI组和UA组血浆βTG和PF4的含量均显著高于对照组(P<0.001),AMI组血浆βTG显著高于UA组(P<0.05)。结论血小板释放反应增加、活性增强,在ACS患者的发病过程中起重要作用。

血清脂蛋白相关磷脂酶A_2与冠状动脉粥样硬化斑块稳定性的相关研究——附107例报告

目的:探讨血清脂蛋白相关磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2)水平与冠状动脉粥样硬化斑块稳定性的关系。方法:对107例冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者行冠状动脉造影(coronary angiography,CAG)和血管内超声(in-travascular ultrasound,IVUS)检查,根据CAG和IVUS检查有无冠状动脉改变及斑块性质将患者分为稳定斑块组(38例)、不稳定斑块组(33例)和无斑块组(36例),检测所有患者血清的Lp-PLA2水平,分析血清Lp-PLA2水平与IVUS检查指标包括纤维帽厚度、偏心指数、重构指数的相关性。结果:稳定斑块组和不稳定斑块组的血清Lp-PLA2水平明显高于无斑块组(P<0.05);不稳定斑块组的血清Lp-PLA2高于稳定斑块组(P<0.05)。血清Lp-PLA2与斑块纤维帽厚度无明显相关性(r=-0.31,P(0.05),但与偏心指数和重构指数呈正相关(r=0.79,P<0.01;r=0.62,P<0.05)。结论:冠心病患者血清Lp-PLA2水平与冠状动脉粥样硬化斑块稳定性有关,可作为临床预测不稳定斑块的血清学指标。

尿激酶小剂量长疗程给药治疗不稳定型心绞痛的疗效观察——附260例报告

目的:观察尿激酶小剂量、长疗程给药治疗不稳定型心绞痛的临床疗效。方法:500例不稳定型心绞痛患者随机分为观察组(260例)和对照组(240例)。对照组采用常规方法治疗;观察组在常规方法治疗的基础上合用尿激酶,每日(20～30)万单位,溶于100mL生理氯化钠于60分钟内静脉滴注,连用14日。于治疗第14日和治疗后第1个月统计两组心绞痛缓解程度、出血并发症及心脏事件等的发生率。结果:治疗第14日两组间缓解心绞痛的显效率及加拿大心血管学会分级比较差异均有统计学意义(93.8%比79.6%,2.0±0.2比2.5±0.7,均为P<0.05),轻度出血、心脏事件的发生率两组间比较差异无统计学意义;治疗后第1个月两组间缓解心绞痛的显效率及加拿大心血管学会分级仍存在差异(90.4%比67.9%,2.2±0.4比2.7±0.6,均为P<0.05),而心脏事件的发生率两组间差异仍无统计学意义。结论:尿激酶小剂量长疗程给药,联合应用常规抗心绞痛药物可以有效地缓解不稳定型心绞痛。

凝血因子Ⅶ及其基因MspI多态性与高血压合并脑梗死的相关性

探讨血浆活化凝血因子Ⅶ及其基因MspI多态性与中国汉族人高血压合并脑梗死的关系。采用侯选基因及病例—对照的方法 ,以聚合酶链反应及限制性内切酶片段长度多态性分析技术 ,对高血压组、高血压合并脑梗死组及正常对照组进行凝血因子Ⅶ基因MspI多态性分析并确定基因型 ,同时采用重组可溶性组织因子法测定血浆活化凝血因子Ⅶ水平。结果发现 ,与高血压组比较 ,脑梗死组血浆活化凝血因子Ⅶ水平显著增高 (2 .78± 0 .5 9比2 .5 3± 0 .6 2 μg L ,P <0 .0 5 ) ;高血压组与正常对照组比较差异无显著性 (2 .5 3± 0 .6 2比 2 .4 1± 0 .6 1μg L ,P >0 .0 5 ) ;Logistic回归分析显示 ,血浆活化凝血因子Ⅶ水平增高是高血压合并脑梗死的重要危险因素 (OR =1.134,P <0 .0 5 ) ;凝血因子Ⅶ基因型频率分布符合Hardy Weinberg平衡定律 ,基因型及等位基因频率分布在各组间差异均无显著性 (P >0 .0 5 ) ;各组血浆活化凝血因子Ⅶ水平均与凝血因子Ⅶ基因多态性显著相关 ,M1 M1 纯合子血浆活化凝血因子Ⅶ水平显著高于M2 等位基因携带者 (P <0 .0 5 )。以上提示 ,血浆活化凝血因子Ⅶ水平增高是高血压合并脑梗死的重要危险因素 ,并受其基因MspI多态性的影响。

超声心动图对孤立性心室致密化不全的诊断价值

目的:探讨超声心动图技术对孤立性心室致密化不全(IVNC)的诊断价值。方法:应用彩色多普勒超声心动图多切面探查肌小梁隐窝内血流以及有无附壁血栓形成,测量左室射血分数(LVEF)。结果:①受累节段的室壁明显分为薄的致密外膜层和厚的致密化不全内膜层;彩色多普勒显示,小梁隐窝血液与左心腔相通;②2例探及小梁隐窝内附壁血栓;10例患者LVEF降低穴0.42±0.07雪;6例合并二尖瓣返流;③致密化不全共累及45个节段,73.3%(33/45)位于心尖段、侧壁、下壁及后壁的中段。结论:IVNC具有典型的超声心动图特征,彩色多普勒超声心动图技术对其具有重要的诊断价值。

大鼠胱抑素C腺病毒高效表达载体的构建在大鼠心肌成纤维细胞中的表达

目的采用Gateway^(TM)技术构建携带胱抑素C(CysC)基因的重组腺病毒载体,并观察在大鼠心肌成纤维细胞中的表达。方法采用RT-PCR方法从大鼠心肌组织中扩增出CysC基因,将CysC基因经BP重组反应定向克隆至pDONR221载体,获得重组质粒pDONR221-CysC,经PCR及测序验证正确的pDONR221-CysC与腺病毒载体pAd/CMV/V_5-DEST在体外进行LR重组反应,CysC取代pAd/CMV/V_5-DEST中的ccdB-Cm^R基因,获得重组腺病毒载体pAd/CMV/V_5-DEST-CysC。采用Western blot技术检测CysC蛋白在293A细胞及大鼠心肌成纤维细胞中的表达。将培养的心肌成纤维细胞随机分为实验组、空载体组和对照组。结果 CysC腺病毒高效表达载体构建成功,测得病毒滴度为5.36×10^(10)ifu/ml,用重组CysC腺病毒转染心肌成纤维细胞24 h后,实验组的转染效率最高(≥90%);与对照组和空载体组比较,实验组CysC蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论成功构建了大鼠CysC腺病毒高效表达载体,并成功包装了含有该基因的重组腺病毒,可有效转染心肌成纤维细胞。

心绞痛并发抑郁症的临床特点、预后及治疗

目的 :探讨心绞痛并发抑郁症 (AWD)的临床特点及预后。方法 :43例 AWD为观察组 ,同期的 40例心绞痛不并发抑郁症 (AND)为对照组。随机比较两组的年龄、性别、性格、经济收入、是否独居、临床特点 ,及 1年前、后的踏车运动试验、心绞痛级别、心功能、心电图改变和预后。结果 :较之 AND,AWD的临床特点为 :(1)心境低落、失眠及焦虑情绪常见 ,各占 10 0 %、 97.7%及 86 .0 % ;(2 )中老年人、女性、 A型性格、独居和经济低收入者发病率较高 ;(3)心肌缺血较重 ;(4)远期预后较差。结论 :心绞痛并发抑郁症时 ,心绞痛加重 。

原发性高血压患者颈动脉IMT与hsCRP的相关性研究

目的探讨原发性高血压患者颈动脉内膜—中膜厚度(IMT)与高敏C反应蛋白(hsCRP)的相关性。方法对145例原发性高血压患者及153例健康受试者进行颈动脉粥样硬化检测及血浆hsCRP测定,对测定结果进行统计学分析。结果高血压组IMT、hsCRP均明显高于对照组(P<0.01);hsCRP血浆水平与IMT年龄呈正相关(r=0.342,P<0.01)。结论hsCRP可能是高血压患者动脉粥样硬化的一个独立预测因子,可能参与了高血压病动脉粥样硬化的发生、发展。

慕课教学模式在临床医学生中的认知调查研究

为了解医学生对慕课的认识、接受程度及存在问题,采用问卷调查法对在山东大学第二医院进行临床学习的山东大学医学院大四和大五学生进行问卷调查。结果显示:学生对慕课的总体学习体验感到满意,学生的慕课学习完成率高;但对慕课的学习兴趣在男女生之间存在差异;学生之间和师生之间互动以及临床技能等方面尚存在不足。慕课作为一种新的教学方式,在医学教育基础课程的教学改革中发挥了重要作用。

沙利度胺对慢性充血性心力衰竭的影响

目的:探讨慢性充血性心力衰竭(CHF)病人应用沙度胺,治疗前后血浆心衰相关细胞因子水平及左室收缩功能变化。方法:将98例CHF病人(左室射血分数LVEF≤40％)随机分为2组,对照组常规应用治疗心衰药物,沙利度胺组在此基础上加用沙利度胺25～150mg·d-1,共用12wk,于治疗前后分别测定TNF-α,IL-6,超声心动图评价左室收缩功能。结果:CHF病人经沙利度胺治疗12wk后, TNF-α(p<0.01)、IL-6(P<0.05)水平均降低,且左室收缩功能显著改善(P<0.01)。结论:常规治疗慢性充血性心力衰竭基础上加用沙利度胺,安全易耐受,可显著改善CHF相关的临床症状和心功能。

主动脉瓣硬化与动脉粥样硬化关系的研究

目的:探讨主动脉瓣硬化(AVS)与动脉粥样硬化的相关性及其组织病理学特点。方法:对138例已确诊或可疑冠心病患者进行超声心动图检查,根据主动脉瓣的形态学特点,将其分为主动脉瓣硬化组(AVS组)58例和无主动脉瓣硬化组(non-AVS组)80例。两组患者均常规进行颈总动脉超声检查和选择性冠状动脉造影,比较两组间的颈总动脉内-中膜厚度(IMT),粥样斑块发生率和冠心病的发生率,以及两组的血压、血脂和血糖水平。对接受主动脉瓣置换术或因冠心病死亡者的病变瓣膜进行组织病理学分析。结果:AVS组的收缩压、甘油三酯、总胆固醇和脂蛋白(a)明显高于non-AVS组(P<0.05),而高密度脂蛋白胆固醇明显低于non-AVS组(P<0.05);AVS组颈总动脉IMT较non-AVS组明显增厚,颈动脉粥样斑块和冠心病的发生率明显增加(P<0.05);8例主动脉瓣标本均显示出不同程度的粥样硬化性改变。结论:AVS与动脉粥样硬化密切相关,主动脉瓣硬化可作为临床上预测动脉粥样硬化的一项指标。

职业性铅接触与尿绒毛膜酶活性的关系

目的:探讨铅接触者尿绒毛膜酶活性的变化及其意义。方法:对147例铅作业工人采用免疫吸附比色法测定尿绒毛膜酶(LAP、ALP)活性。结果:铅接触者尿绒毛膜酶活性增加[LAP(16.16±3.18)μg/L、ALP(30.83±4.91)μg/L],且随接触时间延长而升高,铅接触史≥5年者尿绒毛膜酶活性[LAP(18.94±5.22)、ALP(33.45±5.13)μg/L]较铅接触史<5年者[LAP(14.12±2.76)、ALP(28.6±3.82)μg/L]为高(P<0.05)。结论:尿绒毛膜酶活性升高是铅致早期肾损害的敏感指标。

胱抑素C基因真核表达载体的构建及在转染的人主动脉平滑肌细胞中的表达

目的克隆人胱抑素C基因及构建胱抑素C基因真核表达载体并研究其在人血管平滑肌细胞中的表达。方法培养人脐静脉内皮细胞系,并从中提取总RNA,采用逆转录聚合酶链反应扩增胱抑素C基因,构建其真核表达载体,双酶切及聚合酶链反应鉴定阳性克隆,转染人血管平滑肌细胞,逆转录聚合酶链反应及Western blot法检测其表达情况。结果成功克隆人胱抑素C基因及构建其真核表达载体,转染后成功高表达。结论克隆人胱抑素C基因及构建其真核表达载体成功,转染人血管平滑肌细胞获得其高表达。

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体及其死亡受体5与急性冠状动脉综合征的关系

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及其死亡受体5与急性冠状动脉综合征之间的关系。方法将83例研究对象分成3组,其中急性冠状动脉综合征(简称综合征)组40例,稳定型心绞痛(简称心绞痛)组21例,对照组22例。应用酶联免疫吸附法测定所有病例的血浆肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体和死亡受体5水平。收集升主动脉标本22例,其中综合征组患者8例,心绞痛7例,对照组7例,应用逆转录聚合酶链反应测定其肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体及其死亡受体5mRNA表达情况。结果综合征组血浆肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体水平显著性升高(P<0.001)。血浆死亡受体5水平综合征组明显高于对照组(P<0.05)。在综合征组中,3支血管病变亚组的血浆肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体和死亡受体5水平显著高于单支血管病变亚组(P值均<0.05),其中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体血浆水平同时明显高于双支血管病变亚组(P<0.05)。在双支血管病变亚组中,死亡受体5血浆水平显著高于单支血管病变亚组(P<0.05)。多元Logistic逐步回归分析显示肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的风险比值为1.012(P=0.002)。综合征组升主动脉中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体mRNA的表达明显增强(P<0.05)。结论升高的血浆肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体和死亡受体5水平与急性冠状动脉综合征的发生和严重程度密切相关。

H型高血压患者颅内动脉血流动力学参数水平变化及其临床意义

目的探讨H型高血压患者颅内动脉血流动力学参数变化及其临床意义。方法选取单纯高血压患者33例(血浆Hcy≤10μmoL/L)作为单纯高血压组,H型高血压患者32例(血浆Hcy>10μmoL/L)作为H型高血压组,无高血压者33例作为无高血压对照组。各组均接受经颅彩色多普勒超声(TCCD)检查,检测双侧大脑前动脉大脑中动脉(MCA)、颈内动脉终末段(TICA)、大脑前动脉(ACA)、大脑后动脉(PCA)的血流动力学参数,用描迹法记录收缩期峰值流速(Vp)、舒张期峰值流速(Vd)、平均流速(Vm)、波动指数(PI)、阻力指数(RI)、S/D(Vp/Vd),获得MCA血流量;用酶循环法测定血浆Hcy。Person相关法分析指标间的相关性;用受试者工作特征(ROC)曲线分析血流动力学参数诊断H型高血压的效能。结果单纯高血压组(MCA、TICA、ACA)Vp>H型高血压组>无高血压对照组(P均<0.05);H型高血压组(MCA、TICA、ACA、PCA)Vm<单纯高血压组(P均<0.05),三组间PCA Vp比较差异无统计学意义(P均>0.05);H型高血压组(MCA、TICA、ACA、PCA)Vd及MCA血流量<单纯高血压组<无高血压对照组(P均<0.05);H型高血压组(MCA、TICA、ACA、PCA)PI、RI、S/D>单纯高血压组>无高血压对照组(P均<0.05)。高血压组血浆Hcy水平与MCA的Vm、Vd、血流量及TICA的Vm、Vd呈中等负相关(P均<0.05),与MCA的PI、RI、S/D呈中等正相关(P均<0.05);与TICA的Vp、PI、RI、S/D,ACA的PI、RI,PCA的PI、RI呈弱相关性(P均<0.05);与MCA的Vp,ACA的Vp、Vm、Vd、S/D,PCA的Vp、Vm、Vd、S/D无相关性(P均>0.05)。MCA PI、RI诊断H型高血压的曲线下面积(0.906、0.844)高于其他参数。结论H型高血压患者有明显的血流动力学改变,且与血浆Hcy水平有明显相关性;血流动力学参数PI、RI对H型高血压有较高的诊断价值,且PI的诊断效能优于RI。

缺血性脑卒中的分子遗传学研究进展

缺血性脑卒中是一种多基因遗传病 ,其发病具有明显的家族倾向 ,并与种族相关。本文综述了肾素系基因、凝血 /纤溶基因、血小板膜糖蛋白受体基因、甲基四氢叶酸还原酶基因。