参虎败毒颗粒体内抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的效果观察

为探究参虎败毒颗粒抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的作用,将20头PRRSV阴性仔猪随机平均分为4组,即提前药物处理感染组(A组)、感染同时药物处理组(B组)、无药物处理感染组(C组)和无药物处理不感染组(D组)。A和B组分别于攻毒前3 d和攻毒时在基础日粮中添加参虎败毒颗粒(每头10 g·d-1),连续饲喂至攻毒后28 d,每日测量体温,在攻毒后第14天,每组随机处死仔猪1头,观察病理变化,RT-qPCR检测肺组织病毒载量,并在攻毒后第1、3、5、7、14、21、28、35天采全血和血清样品进行PRRSV核酸和抗体检测。结果发现,A和B组仔猪体温在攻毒后第6天上升至40℃以上,第12天时恢复正常;C组仔猪体温在第5天上升至40℃以上,持续至试验结束仍未恢复。A、B组仔猪肺组织病变较轻,肺泡结构轻度损伤,支气管内有少量炎性渗出物,周围有少量炎性细胞浸润;C组仔猪肺组织病变严重,肺泡结构破坏严重,支气管内有大量炎性渗出物和炎性细胞浸润。A组在攻毒后3、5、7和14 d病毒载量极显著低于C组(P<0.01);B组在攻毒后3和5 d病毒载量极显著低于C组(P<0.01),第7和14天病毒载量显著低于C组(P<0.05)。A、B组PRRSV抗体在攻毒后第21天达到峰值,C组在28 d达到峰值。以上结果可知,参虎败毒颗粒能够显著减轻PRRSV造成的仔猪肺部病理损伤,降低病毒血症;添加药物可使PRRSV特异性抗体峰值提前,减少病毒血症持续时间,证明参虎败毒颗粒可用于预防或治疗PRRSV感染,降低PRRSV对仔猪的影响。

猪IL-10重组腺病毒的构建及其对PRRSV体外增殖的影响

为探索猪IL-10对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)增殖的影响,本研究构建表达猪IL-10的重组腺病毒对其进行过表达研究。根据GenBank收录的猪IL-10基因序列设计引物并扩增获得该基因,将其克隆至pAdTrack-cmv载体后,转化BJ5183菌株与pAdEasy-1骨架载体进行同源重组,获得pAd-IL-10重组腺病毒质粒。将重组质粒线性化后转染HEK-293A细胞完成rHAd-IL-10重组腺病毒包装,经RT-qPCR、Western blot方法证实获得重组腺病毒可表达目的蛋白。将rHAd-IL-10与rHAd-EGFP重组腺病毒分别感染Marc-145细胞后再接入PRRSVSD16-GFP毒株培养后,利用RT-qPCR、Western blot与TCID50测定等方法检测不同试验组的PRRSV水平,结果显示使用rHAd-IL-10在Marc-145细胞中过表达猪IL-10,可显著促进PRRSV SD16-GFP毒株在细胞内的增殖。本研究成功构建rHAd-IL-10重组腺病毒,并证实猪IL-10过表达可以促进PRRSV SD16-GFP在细胞内的增殖,为后续研究IL-10在PRRSV感染中的作用奠定了基础。