鸟嘌呤核苷补料发酵条件研究

采用新菌株Bacillus subtilisJSIM-518,在22 L自控发酵罐上进行不同补料方式和所补原料的发酵研究.酵母粉连续补料,对鸟苷积累不甚明显,应用指数函数补料方式,匀速补入RNA和腺嘌呤物质,添加速率K值显得非常关键,当K=0.16时积累鸟苷最高,积累质量浓度为34.14g/L,高于和低于此值时,鸟苷的积累量都呈递减的趋势.

产嘌呤核苷的枯草杆菌prsA基因在大肠杆菌中的表达

为了克隆产嘌呤核苷的枯草杆菌prsA基因。用PCR扩增的方法,从产肌苷的枯草杆菌BacillussubtilisJSIM-1019中克隆出一个长1kb长的DNA片段,经功能检测,证明正向插入片段与大肠杆菌的磷酸核糖焦磷酸营养缺陷特性(PRPP-)能够营养互补。含有该重组质粒的PRPP缺陷大肠杆菌JSIM-DH-27在基本培养基上的能够生长。

肌苷菌核酸代谢关键酶缺失和形成选育腺苷菌的研究

以肌苷产生菌BacillusSubtilisJSIM 1 0 1 9为出发菌株 ,根据B subtilis核酸代谢理论设计不同筛选模型 ,用物理、化学诱变剂对亲株进行诱变处理 ,先后有序地获得不同关键酶的缺失或回复即特殊的营养缺陷型以及抗某些代谢类似物的突变株 ,解除终产物对代谢物的抑制和阻遏 ,获得了几株黄嘌呤营养缺陷型并对 8氮鸟嘌呤具有抗性的突变株X 1 3等 ,获得的突变株经单菌分离后得到X 1 3 4 ,36℃培养 72h在培养基中最高积累 1 2 4 3g/L腺苷。

D-核糖高产菌株的选育及其生产性试验

BacillussubtilisJSIM 10 18菌株是 1株产D 核糖的莽草酸营养缺陷型突变株 ,以此菌株为出发菌株 ,通过甲基磺酸乙酯和紫外线连续、间断诱变处理 ,获得了 1株次黄嘌呤、莽草酸双重缺陷型突变株No .2 71菌株。该突变株摇瓶发酵的D 核糖平均产量为 10 8 1g/L ,比亲株提高了 15 8g/L。在 30 0 0 0L发酵罐中 ,连续 5罐批 ,平均产D 核糖 96 4 g/L ,最高为 98g/L ,比亲株提高了 16 2 5 g/L。

从一株肌苷产生菌选育出高产鸟苷菌株的研究

将一株只产肌苷的Bacillus subtilis菌株 ,用物理、化学诱变剂处理 ,根据B subtilis核酸代谢理论精心设计不同筛选模型 ,先后有序地获得不同的营养缺陷型、关联酶的缺失或回复以及抗代谢类似物的突变株 ,解除终产物对代谢物的抑制和阻遏 ,最终得到一株只产鸟苷的新菌株 ,其鸟苷产量超过 2 0 g/L。

杜仲叶粉提取绿原酸工艺的优化

[目的]优选杜仲叶粉中绿原酸的最佳提取方法和提取工艺,为工业化生产提供参考。[方法]用酶解和超声相结合的方法,在单因素试验的基础上,采用四因素三水平正交设计法对提取工艺条件进行优选。[结果]单因素试验结果得出,在溶剂pH值为4.5,酶加入量为0.6%,酶解温度为40℃,料液比为1∶10,超声时间为30 min,绿原酸提取得率最大。在此基础上进行的正交试验结果显示,绿原酸提取的最佳工艺条件为:溶剂pH值为5.0,酶解温度为40℃,料液比为1∶10,超声时间为30 min,在此最佳条件下绿原酸提取得率可达3.05%。从与酶法和超声波法的比较试验得出,绿原酸提取得率比酶解高出5.54%,比超声波提取高出16.68%。[结论]采用酶解与超声波结合的方法,先让酶作用后,有利于超声波的进一步作用,促进绿原酸的释放,提取效果远远超过酶法和超声波法。

枯草芽孢杆菌JSIM-X-13-4突变株腺苷发酵研究

对1株黄嘌呤、硫胺素、组氨酸三重缺陷型及8-氮杂鸟嘌呤抗性的腺苷突变株JSIM-X-13-4进行了摇瓶、自控罐3、000 L中型发酵罐试验。试验发现,该菌株培养基成分除酵母膏外,其余与其亲株肌苷产生菌JSIM-1019基本相同。酵母膏浓度为1.6%-1.8%,摇瓶CaCO3量为3%;发酵罐上适宜pH为6.2,风量在18h提高至1∶0.55,溶氧40%。摇瓶、自控罐、中型发酵罐产苷分别为15.51 g/L、18.11 g/L和17.25 g/L。

鸟嘌呤核苷工艺条件优化研究

鸟嘌呤核苷(简称鸟苷)在医药工业上的主要用途是作为合成三氮唑核苷、无环鸟苷的中间体.大量应用于食品工业上,是作为呈味核苷酸鸟苷酸二钠的主要原料,与肌苷酸二钠混合简称I+G,添加到味精中即是第二代,第三代味精,具有十分广阔的市场.

腺嘌呤类物质补料方式对鸟苷发酵的影响

鸟苷产生菌枯草杆菌JSIM G 3 4是腺嘌呤营养缺陷型变异菌。腺嘌呤类物质是鸟苷菌中所必需的 ,但过多则会阻遏抑制鸟苷的产生。作者把含有腺嘌呤物质的酵母粉或RNA按一定方式补料 ,将腺嘌呤浓度控制在可以提供菌体生长而不会对核苷代谢关键酶产生不利的范围内 ,使鸟苷产量最高达到 3 4 1 4mg/mL。

微生物发酵法生产乳清酸

以谷氨酸棒杆菌JSIM 201为出发菌株,通过紫外线和甲基磺酸乙酯诱变处理,得到了一株尿嘧啶营养缺陷型突变体U 12菌株,它能以葡萄糖为碳源,硫酸铵为氮源,在发酵液中积累一种紫外吸收物质.该紫外吸收物质经物理、化学分析鉴定,证明是乳清酸.对U 12菌株进行了发酵条件优化研究,在最佳发酵工艺条件下,积累乳清酸最高达到8.6g/L.

杜仲叶提取物对鲫鱼出血性病原菌抑菌试验的研究

试验测定了杜仲叶主要提取物绿原酸对水产养殖中常见病原菌的最小抑菌浓度及其对嗜水气单胞菌体内和体外抑菌效果。结果显示,绿原酸对水产养殖中的常见病原菌嗜水气单胞菌最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)均为250mg/l,哈维氏弧菌、苏伯利产气单胞菌的MIC与MBC均为500mg/l,肠型点状产气单胞菌的MIC与MBC分别为500、1000mg/l。药敏试验结果发现,绿原酸对嗜水气单胞菌抑菌圈的直径为(19.4±1.2)mm,氟哌酸的抑菌圈直径为(30.3±1.3)mm,土霉素为(28.5±2.5)mm。攻毒试验结果显示,在攻毒7d后,对照组死亡率为45%,饲料中添加0.5%绿原酸的试验组死亡率为10%,添加4%的试验组的死亡率为20%,添加1%和2%的试验组没有鱼死亡,表明饲料中添加1%的绿原酸能有效增强鱼体对嗜水气单胞菌的抵抗能力。试验结果说明,绿原酸对水产养殖中常见的病原菌具有良好的抑菌效果,对嗜水气单胞菌的抑菌效果与抗生素类抗菌药物相当,能够增强机体免疫力,对细菌性疾病具有较强的预防作用。

腺苷产生菌分批补料发酵及发酵动力学初探

本文对腺苷产生菌Bacillus subtilisJSIM-25培养基中两个关键因子酵母膏和糖进行不同浓度摇瓶试验,并进行22L自动发酵罐的分批和分批补料发酵及其发酵动力学的初步研究。结果表明,最佳的酵母膏和葡萄糖浓度分别为1.6%和12%。降低起始糖浓度,产苷期补糖可明显提高菌体比生产速率和耗糖产苷能力。按起始糖浓度为6%,16h补糖使最终发酵总糖浓度达12%,发酵培养60h,腺苷平均产量可达18.20g/L,菌体耗糖转化率16.85%,比生成速率0.024g/(g.h),残糖1.2%。

硒化灵芝多糖制备及免疫学相关研究

对自制80%乙醇沉淀的灵芝多糖进行硒化反应,经透析后测定灵芝多糖中硒含量高达40mg/g。对制得的灵芝硒多糖进行免疫学相关研究,包括白细胞吞噬实验和体外抗肿瘤实验。发现硒化灵芝多糖能提高小鼠的白细胞吞噬作用,对肿瘤细胞有明显的抑制作用。

以葛根为基质的灵芝发酵和体外清除自由基活性研究

[目的]研制一种具有抗氧化作用的新型保健食品并研究其体外抗氧化活性。[方法]以灵芝为发酵菌株,葛根为发酵基质中的添加物,研究了葛根对灵芝菌丝体生长和发酵产物体外清除自由基活性的影响。[结果]葛根添加量为60 g/L时,灵芝的生物量达最大值,即(9.76±0.37)g/L,比对照高2.82 g/L。葛根具有清除羟自由基和超氧阴离子的能力,添加葛根的灵芝发酵产物的对羟自由基和超氧阴离子的清除效果明显比单独灵芝发酵好。当葛根浓度为20、40、60、80和100 g/L时,发酵产物对羟自由基的清除率分别为67.2%、78.5%、84.9%、86.4%和87.3%,对超氧阴离子的清除率分别为35.42%、41.67%、46.88%、44.79%和45.88%。[结论]该研究为开发具有抗氧化作用的新型灵芝发酵保健食品提供了理论基础。