健脾祛痰方对限制活动ApoE^(-/-)小鼠体成分/行为学变化的影响

目的:观察健脾祛痰方对限制活动载脂蛋白E基因敲除(Apolipoprotein E Knockout,ApoE^(-/-))小鼠体成分/行为学变化的影响。方法:将30只ApoE^(-/-)小鼠随机分为模型组,阿托伐他汀组以及健脾祛痰方低浓度组、健脾祛痰方中浓度组、健脾祛痰方高浓度组;将6只C57BL/6J小鼠作为正常组。正常组以普通饲料喂养,其余5组以高脂饲料喂养,阿托伐他汀组进行阿托伐他汀2.4 mg/(kg·d)灌胃,健脾祛痰方低浓度组、健脾祛痰方中浓度组、健脾祛痰方高浓度组以健脾祛痰方[2.97 g/(kg·d)、5.94 g/(kg·d)、11.88 g/(kg·d)]灌胃,正常组和模型组以等体积生理盐水灌胃,12周后进行脾虚痰浊模型评价。实验期间每周观察小鼠的皮毛色泽、活动能力及大便性状,检测体成分,以旷场实验、跑台实验进行动物行为学评估。结果:与正常组比较,模型组小鼠旷场实验运动总距离减少,跑台实验跑步力竭时间降低,体脂降低,差异有统计学意义(P <0.01)。与模型组比较,健脾祛痰方低浓度组、健脾祛痰方中浓度组、健脾祛痰方高浓度组小鼠旷场实验运动总距离呈上升趋势,但差异无统计学意义(P> 0.05);健脾祛痰方中、高浓度组小鼠跑台实验跑步时间增加,差异有统计学意义(P <0.05,P <0.01);阿托伐他汀组和健脾祛痰方低浓度组跑步时间均呈上升趋势,但差异无统计学意义(P> 0.05);健脾祛痰方低浓度组、健脾祛痰方中浓度组、健脾祛痰方高浓度组小鼠体脂呈上升趋势,但差异无统计学意义(P> 0.05);阿托伐他汀组小鼠体脂显著增加,差异有统计学意义(P <0.01)。结论:健脾祛痰方可增加限制活动ApoE^(-/-)小鼠的行为活动,但对体成分改善作用不显著。

基于高通量测序技术探讨健脾化痰方对ApoE^(-/-)AS小鼠VSMC增殖相关miRNA的调控作用

目的本研究运用高通量测序技术检测健脾化痰方调控ApoE^(-/-)小鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移相关miRNA,并验证相关蛋白的表达,探讨该方对动脉粥样硬化的治疗作用。方法10只C57BL/6J小鼠作为对照组,30只ApoE^(-/-)小鼠随机分为模型组、西药组和健脾化痰中药组,对各组小鼠主动脉样本进行miRNA测序,比较差异表达miRNA,筛选出与血管平滑肌细胞增殖和迁移相关miRNA,使用RT-qPCR和Western blot技术对差异miRNA及相关蛋白进行验证。结果与模型组相比,中药组共有9个miRNA表达发生改变,其中7个上调,2个下调。miRNA-34a在中药组表达上调,经RT-qPCR及Western blot实验验证,中药组小鼠主动脉miRNA-34a及α-SMA蛋白表达与模型组比较均有显著差异(P<0.01)。结论健脾化痰方可能通过调控miRNA-34a抑制血管平滑肌细胞增殖改善ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化。