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TNF-α缺失减少抗李斯特菌CD8~+T细胞应答并增加效应记忆细胞形成
1
作者
郭浪
张迎春
+4 位作者
胡小波
李亚林
徐斌
杜鸿城
曹朝晖
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第9期762-767,共6页
目的探讨TNF-α在李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)感染模型中对CD8^+T细胞应答的影响。方法采用尾静脉注射重组OVA的李斯特菌株感染TNF-α基因敲除(TNF-αKO)小鼠和野生型(WT)对照小鼠建立系统性感染模型。运用流式细胞术检测不同...
目的探讨TNF-α在李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)感染模型中对CD8^+T细胞应答的影响。方法采用尾静脉注射重组OVA的李斯特菌株感染TNF-α基因敲除(TNF-αKO)小鼠和野生型(WT)对照小鼠建立系统性感染模型。运用流式细胞术检测不同时相点TNF-αKO小鼠和WT小鼠中内源性和外源性特异性CD8+T细胞应答反应情况。采用体内细胞杀伤实验和检测细菌滴度的方法评估TNF-αKO小鼠和WT小鼠感染后记忆期CD8^+T细胞的效应功能。接着分析记忆期和增殖期CD8^+T细胞的KLRG-1和CD127等分子的表达变化。结果与WT对照小鼠相比,TNF-αKO小鼠中CD8^+T细胞应答减少,记忆细胞增多;TNF-αKO小鼠中记忆CD8^+T细胞的效应功能正常;TNF-αKO小鼠记忆CD8^+T细胞中含有更多比例的KLRG-1+CD127-CD62L-效应记忆细胞,而第7天TNF-αKO小鼠特异性CD8^+T细胞的KLRG-1和CD127的表达与对照组无明显差别。结论TNF-αKO小鼠初次应答降低,形成更多记忆细胞,且效应记忆细胞增多。其机制与早期效应CD8^+T细胞分化无关,可能是TNF-αKO小鼠更多的KLRG-1+CD127-细胞在应答收缩期存活所致。
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关键词
李斯特菌
应答收缩期
效应记忆细胞
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职称材料
LIGHT及IFN-γ对MIN6细胞凋亡和Bax表达的影响
2
作者
杜鸿城
王五洲
+3 位作者
徐斌
赵锦
胡小波
曹朝晖
《微生物学免疫学进展》
2017年第3期1-6,共6页
目的研究细胞因子LIGHT及IFN-γ对小鼠胰岛素瘤细胞株MIN6细胞凋亡及促凋亡基因Bax蛋白表达的影响。方法体外培养MIN6细胞,将细胞分为4组:(1)未处理组(细胞对照组);(2)LIGHT组;(3)IFN-γ组;(4)LIGHT+IFN-γ组,用LIGHT与IFN-γ分别单独...
目的研究细胞因子LIGHT及IFN-γ对小鼠胰岛素瘤细胞株MIN6细胞凋亡及促凋亡基因Bax蛋白表达的影响。方法体外培养MIN6细胞,将细胞分为4组:(1)未处理组(细胞对照组);(2)LIGHT组;(3)IFN-γ组;(4)LIGHT+IFN-γ组,用LIGHT与IFN-γ分别单独或联合刺激MIN6细胞24 h。采用MTT法检测细胞存活率,激光共聚焦显微镜观察MIN6细胞核形态,流式细胞仪测定细胞凋亡率。利用Western blot分析基因Bax蛋白表达变化,将Bax(siRNA)转染入MIN6细胞,用LIGHT和IFN-γ刺激24 h,Western blot检测Bax蛋白表达,MTT法检测细胞存活率变化。结果 LIGHT或IFN-γ单独刺激仅能引起MIN6细胞存活率轻微下降,但LIGHT与IFN-γ联合刺激能显著降低细胞存活率(P<0.05),细胞核可见凋亡小体,细胞凋亡率(28.80%)明显高于LIGHT或IFN-γ组(4.42%和6.70%),且Bax蛋白含量增加。Bax siRNA降低了MIN6细胞Bax基因的表达,Bax siRNA+LIGHT+IFN-γ组的细胞存活率显著高于LIGHT+IFN-γ组和阴性对照siRNA+LIGHT+IFN-γ组(P<0.05)。结论 LIGHT与IFN-γ联合刺激能促进MIN6细胞凋亡,且与促凋亡基因Bax表达上调有关。
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关键词
LIGHT
IFN-Γ
细胞凋亡
MIN6细胞
Bax
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职称材料
题名
TNF-α缺失减少抗李斯特菌CD8~+T细胞应答并增加效应记忆细胞形成
1
作者
郭浪
张迎春
胡小波
李亚林
徐斌
杜鸿城
曹朝晖
机构
湖南化工职业技术学院自动化与信息工程学院
南华大学药学与生物科学学院
重庆城市管理职业学院健康与老年服务学院
出处
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第9期762-767,共6页
基金
湖南省自然科学基金(2016JJ2113,14JJ3104)
湖南省科技计划(2014TT2012)
南华大学博士启动基金(2014XQD40)
文摘
目的探讨TNF-α在李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)感染模型中对CD8^+T细胞应答的影响。方法采用尾静脉注射重组OVA的李斯特菌株感染TNF-α基因敲除(TNF-αKO)小鼠和野生型(WT)对照小鼠建立系统性感染模型。运用流式细胞术检测不同时相点TNF-αKO小鼠和WT小鼠中内源性和外源性特异性CD8+T细胞应答反应情况。采用体内细胞杀伤实验和检测细菌滴度的方法评估TNF-αKO小鼠和WT小鼠感染后记忆期CD8^+T细胞的效应功能。接着分析记忆期和增殖期CD8^+T细胞的KLRG-1和CD127等分子的表达变化。结果与WT对照小鼠相比,TNF-αKO小鼠中CD8^+T细胞应答减少,记忆细胞增多;TNF-αKO小鼠中记忆CD8^+T细胞的效应功能正常;TNF-αKO小鼠记忆CD8^+T细胞中含有更多比例的KLRG-1+CD127-CD62L-效应记忆细胞,而第7天TNF-αKO小鼠特异性CD8^+T细胞的KLRG-1和CD127的表达与对照组无明显差别。结论TNF-αKO小鼠初次应答降低,形成更多记忆细胞,且效应记忆细胞增多。其机制与早期效应CD8^+T细胞分化无关,可能是TNF-αKO小鼠更多的KLRG-1+CD127-细胞在应答收缩期存活所致。
关键词
李斯特菌
应答收缩期
效应记忆细胞
Keywords
Listeria monocytogenes
Response contraction phase
Effective memory cells
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
LIGHT及IFN-γ对MIN6细胞凋亡和Bax表达的影响
2
作者
杜鸿城
王五洲
徐斌
赵锦
胡小波
曹朝晖
机构
南华大学药学与生物科学学院生物化学与分子生物学教研室
出处
《微生物学免疫学进展》
2017年第3期1-6,共6页
基金
湖南省自然科学基金面上项目(2016JJ2113)
湖南省教育厅重点项目(16A186)
南华大学大学生研究性学习和创新性实验计划项目(2016NH050XJYZ)
文摘
目的研究细胞因子LIGHT及IFN-γ对小鼠胰岛素瘤细胞株MIN6细胞凋亡及促凋亡基因Bax蛋白表达的影响。方法体外培养MIN6细胞,将细胞分为4组:(1)未处理组(细胞对照组);(2)LIGHT组;(3)IFN-γ组;(4)LIGHT+IFN-γ组,用LIGHT与IFN-γ分别单独或联合刺激MIN6细胞24 h。采用MTT法检测细胞存活率,激光共聚焦显微镜观察MIN6细胞核形态,流式细胞仪测定细胞凋亡率。利用Western blot分析基因Bax蛋白表达变化,将Bax(siRNA)转染入MIN6细胞,用LIGHT和IFN-γ刺激24 h,Western blot检测Bax蛋白表达,MTT法检测细胞存活率变化。结果 LIGHT或IFN-γ单独刺激仅能引起MIN6细胞存活率轻微下降,但LIGHT与IFN-γ联合刺激能显著降低细胞存活率(P<0.05),细胞核可见凋亡小体,细胞凋亡率(28.80%)明显高于LIGHT或IFN-γ组(4.42%和6.70%),且Bax蛋白含量增加。Bax siRNA降低了MIN6细胞Bax基因的表达,Bax siRNA+LIGHT+IFN-γ组的细胞存活率显著高于LIGHT+IFN-γ组和阴性对照siRNA+LIGHT+IFN-γ组(P<0.05)。结论 LIGHT与IFN-γ联合刺激能促进MIN6细胞凋亡,且与促凋亡基因Bax表达上调有关。
关键词
LIGHT
IFN-Γ
细胞凋亡
MIN6细胞
Bax
Keywords
LIGHT
IFN-γ
Apoptosis
MIN6 cells
Bax
分类号
R587.1 [医药卫生—内分泌]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
TNF-α缺失减少抗李斯特菌CD8~+T细胞应答并增加效应记忆细胞形成
郭浪
张迎春
胡小波
李亚林
徐斌
杜鸿城
曹朝晖
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
0
下载PDF
职称材料
2
LIGHT及IFN-γ对MIN6细胞凋亡和Bax表达的影响
杜鸿城
王五洲
徐斌
赵锦
胡小波
曹朝晖
《微生物学免疫学进展》
2017
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
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