地高辛标记的寡核苷酸探针两步原位杂交检测胸液细胞hTERT mRNA

目的 建立原位杂交法检测胸液细胞中人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的实验方法,初步评价该法识别胸液中肿瘤细胞的效果。方法 取23例胸腔积液病例标本,以地高辛标记的寡核苷酸探针对胸液细胞hTERT mRNA行两步原位杂交,再通过抗原-抗体-酶-显色途径,测出hTERT mRNA信号。实验研究设严格的阴性、阳性对照,且与临床诊疗各自独立进行。结果 本法对9例恶性胸腔积液病例检测的结果均为阳性,即无论细胞形态是否异常,镜下均可见到有细胞质深染及部分细胞核少许点状着色的细胞。此9例中,7例经胸液细胞形态学检查亦示阳性者,可同时观察到形态明显异常的肿瘤细胞,其余2例经反复胸液细胞形态学检查阴性,但胸膜活检确诊为恶性胸腔积液者,虽未见到形态明显异常细胞,但镜下可发现胞质深染、部分细胞核少许着色的细胞。14例良性胸腔积液病例的检测结果均为阴性。结论 原位杂交法检测胸液细胞hTERT mRNA可望作为一种临床细胞病理学的新方法,用以鉴别胸腔积液的良、恶性,同时判定肿瘤细胞的类型。

门诊就医流程的优化与实践

门诊流程的改造,是服务模式的重大变革,其目的是优化门诊流程的各个环节,减少病人就诊停留的时间,以达到科学的、人性化的管理。我们经过对北京市及周边多家大型医院门诊流程的调研,发现各医院在某些环节中都结合医院自身特点,制定出符合医院的个性化门诊流程,从而实现以病人为中心的服务模式。

医学实验室安全问题及其防范对策

提出了具有专业特殊性与复杂性的医学实验室安全问题 ,并据医学实验室的多种功用、自身特点 ,阐述了医学实验室安全问题的范畴 ,同时对可能发生的安全问题作了初步的分类 ,并着眼于多方位、多层面 ,较系统地论述了医学实验室安全问题的防范对策。

SARS战役后关于公共卫生的几点哲学思考

文章从哲学与世界医学发展历史的角度简述了公共卫生的历史渊源、医学观的变化发展与辩证认识,阐明了公共卫生建设的重要性,并部分有鉴于SARS战役,就如何构筑完备、精妙并动态发展的公共卫生体系、尤危机应对系统,就政府于公共卫生事业建设的责任与实践中的理性途径、实现公共卫生目的的影响因素等有关公共卫生的问题,从哲学层面论述了若干思考与认识,以探讨我国公共卫生建设的一些新思路。

PEDF对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力和转移相关蛋白表达水平的影响

目的观察色素上皮衍生因子(PEDF)对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力以及对转移相关蛋白如纤维连接蛋白(FN)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达水平的影响。方法设不加PEDF的肺腺癌A549细胞为阴性对照组,PEDF干预组细胞分别加入180、360和720 nmol/L PEDF;Transwell检测PEDF对A549细胞迁移和侵袭能力的影响;半定量RT-PCR法检测PEDF对FN、MMP-9 mRNA表达水平的影响;ELISA法检测PEDF对A549细胞培养上清液中和细胞内的FN、MMP-9蛋白表达水平的影响。结果 PEDF干预组的A549细胞迁移细胞数和侵袭细胞数均显著低于阴性对照组(P<0.05),随着PEDF浓度的增加,迁移和侵袭细胞数逐渐减少(P<0.05)。各浓度PEDF干预组A549细胞的FN、MMP-9表达水平较阴性对照组显著降低(P<0.05),随着PEDF浓度的增加,FN、MMP-9表达水平逐渐降低(P<0.05)。结论 PEDF在体外能显著抑制肺腺癌A549细胞的迁移和侵袭能力,能显著抑制转移相关蛋白(FN、MMP-9)的表达水平。

高浓度葡萄糖对肺腺癌A549细胞生长及VEGF、MMP-2表达的影响

目的观察高浓度葡萄糖对肺腺癌A549细胞生长及血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响。方法根据处理条件不同,将A549细胞分为:对照组(无干预)、甘露醇组(25 mmol/L甘露醇)、葡萄糖组(10、20、30、40 mmol/L葡萄糖)、顺铂组(5、10、20、40μmol/L顺铂)和联合组(30 mmol/L葡萄糖联合5、10、20、40μmol/L顺铂),分别处理48 h后,采用MTT法检测细胞的增殖率,比较不同组别间细胞增殖率的差异;对照组、葡萄糖组、甘露醇组处理24 h和48 h后,采用半定量RT-PCR法检测细胞中VEGF、MMP-2的mRNA水平,采用ELISA法检测细胞培养上清液中VEGF、MMP-2的蛋白浓度,比较不同组别间VEGF、MMP-2的表达水平差异。结果除10 mmol/L葡萄糖组外,葡萄糖组的细胞增殖率均高于对照组(P<0.05);相同顺铂浓度下,联合组的细胞增殖率高于顺铂组(P<0.05);与对照组比较,葡萄糖组VEGF、MMP-2表达明显增强(P<0.05),且对葡萄糖浓度有一定依赖性,葡萄糖浓度为30 mmol/L时VEGF mRNA、MMP-2的mRNA和蛋白水平达最高值,40 mmol/L时VEGF蛋白浓度最高;相同干预条件,48 h细胞的VEGF、MMP-2表达水平高于24 h(P<0.05)。结论高浓度葡萄糖能促进肺腺癌A549细胞的增殖,增强对顺铂的耐受力及VEGF、MMP-2的表达。

miRNA-16对肺腺癌A549细胞增殖和VEGF-A表达水平的影响

目的探讨miRNA-16作用不同时间对体外培养的人肺腺癌A549细胞增殖的影响,以及对VEGF-A表达水平的影响。方法将50 nmol/L,的miRNA-16和阴性对照序列用Lipofectamine 2000转染进人肺腺癌A549细胞中,通过qRT-PCR法检测转染后A549细胞中miRNA-16的表达水平,MTT法检测转染miRNA-16后细胞的增殖抑制情况,ELISA法检测转染miRNA-16后细胞VEGF-A表达水平。结果转染培养24h后,测得转染组miRNA-16表达水平明显高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);转染组细胞增殖抑制率明显高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);转染组细胞VEGF-A表达水平较阴性对照组和空白对照组明显降低(P<0.05)。结论 miRNA-16能引起细胞增殖抑制,并且可能与下调VEGF-A的表达有关。

PEDF与VEGF检测在非小细胞肺癌诊断中的应用探讨

探讨色素上皮衍生因子(PEDF)与血管内皮生长因子(VEGF)检测对于非小细胞肺癌的诊断价值,并将上述两项指标作比较、联合分析。经应用受试者工作特征曲线分析并选取最佳诊断界值,若以血清PEDF蛋白浓度≤584ng/L为临界值,则其诊断非小细胞肺癌的灵敏度为72.3%,特异度为89.0%,准确度为79.8%;以血清VEGF蛋白浓度≥854ng/L为临界值,则其诊断非小细胞肺癌的灵敏度为80.0%,特异度为76.9%,准确度为78.4%。PEDF与VEGF检测相互串联(即:若血清PEDF蛋白浓度≤584ng/L且血清VEGF蛋白浓度≥854ng/L,则判定为非小细胞肺癌;反之则否),用以诊断非小细胞肺癌的灵敏度57.8%,特异度为97.7%;PEDF与VEGF检测相互并联(即:若血清PEDF蛋白浓度≤584ng/L或血清VEGF蛋白浓度≥854ng/L,则判定为非小细胞肺癌;反之则否),用以诊断非小细胞肺癌的灵敏度为94.5%,特异度为68.4%。血清PEDF或VEGF检测对于非小细胞肺癌诊断可能具有一定的辅助参考价值,上述两项指标联合检测可提高诊断的灵敏度或特异度。

3-溴丙酮酸对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力及转移相关蛋白表达水平的影响

目的 观察3-溴丙酮酸(3-BrPA)对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力及转移相关蛋白波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白-9(MMP-9)表达能力的影响。方法 划痕实验和Transwell实验检测A549细胞的迁移、侵袭能力;己糖激酶-2(HK2)活性试剂盒检测A549细胞内的HK2活性;ELISA检测试剂盒检测不同浓度3-BrPA对A549细胞培养上清液中和细胞内MMP-9、Vimentin表达水平的影响。结果 划痕实验和Transwell结果显示,3-BrPA干预组的A549细胞迁移距离、迁移细胞数和侵袭细胞数均显著低于阴性对照组(P<0.05);HK2活性结果显示,3-BrPA干预组A549细胞内HK2活性明显低于阴性对照组(P<0.05);ELISA实验结果显示,3-BrPA干预组MMP-9、Vimentin表达水平明显低于阴性对照组(P<0.05)。结论 3-BrPA能显著抑制人肺腺癌A549细胞的迁移和侵袭能力,能显著抑制肿瘤转移相关蛋白MMP-9和Vimentin的表达水平。

F-P腔传感器灵敏度的仿真与分析

搭建了光纤超声波传感器解调系统,检测并解调出39.4k Hz超声波场的时域和频域信号。分别研究了不同频率特性、不同膜片厚度和不同检测角度下F-P传感器对局放信号测量的影响。

基于SECE振动能量收集模块的设计与实现

飞机飞行过程中存在很多振动能,如果可以高效地对振动能量进行收集给传感器供电具有重大意义。针对悬臂梁式压电收集装置的输出功率不高,且现有的电荷提取电路开关管不易达到精确控制的问题,提出了运用MSP430FE425单片机进行精确采样以及开关控制实现方案。通过单片机检测压电片最大振幅值,并控制同步电荷提取电路(SECE电路)进行电荷提取,解决了SECE电路精确开关控制问题。

基于多块模式决策的边信息生成方法

分布式视频编码中边信息的质量决定了系统的率失真性能,边信息质量越高,则率失真性能越好;针对视频序列中对象运动的不均匀特性,结合MCTI技术,提出了一种新的边信息生成算法;其基本思想是在编码端利用多块模式算法对帧中宏块进行划分,将宏块分为运动缓慢块和运动剧烈块;在解码端,对运动缓慢块直接由MCTI算法生成边信息,而运动剧烈块的边信息要经过后处理进行优化得到;仿真实验表明与直接由MCTI生成边信息方法相比,该算法可以使生成边信息的峰值信噪比（PSNR）比原有的算法提高0.8～1.2 dB左右,有效提高了边信息的质量.

TXNIP和CEA联合检测对良恶性胸腔积液的诊断价值

目的探讨硫氧还蛋白结合蛋白(TXNIP)、癌胚抗原(CEA)联合检测在良、恶性胸腔积液鉴别诊断中价值。方法收集57例胸腔积液患者(良性32例,恶性25例)的临床资料,采用ELISA法测定血清和胸腔积液中TXNIP和CEA浓度水平。结果恶性胸腔积液中TXNIP浓度明显低于良性胸腔积液中的含量;良恶性胸腔积液患者的血清中TXNIP浓度水平差异无统计学意义。TXNIP浓度89.57μg/L为最佳临界值,恶性胸腔积液的诊断灵敏度76%,特异度87.5%,符合率86.96%;CEA浓度5.285μg/L为最佳临界值,恶性胸腔积液的诊断灵敏度88%,特异度90.6%,符合率91.23%。联合试验,并联诊断的灵敏度为97.12%,特异度为79.28%;串联诊断灵敏度为66.88%,特异度98.83%。结论 TXNIP对恶性胸腔积液的诊断具有一定价值,与CEA联合检测可以提高诊断灵敏度与特异度。但是TXNIP对恶性胸腔积液的诊断价值并不优于CEA。

动态规划在建筑管理中的应用

本世纪50年代以来,以运筹学为核心的管理数学在社会各行各业的决策、管理领域得到了广泛的重视和发展。作为国民经济重要物质生产部门的建筑业,自然也离不开管理数学的运用。由于建筑生产的特点,在建筑管理中广泛应用的运筹学技术有图与网络技术、存贮论、决策论、动态规划等。本文拟重点谈谈动态规划的几点应用。

乳酸脱氢酶抑制剂Galloflavin对肺腺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的 探讨不同浓度乳酸脱氢酶抑制剂Galloflavin(GF)对肺腺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法 体外培养肺腺癌A549细胞,实验分为对照组(无GF处理组)和实验组(GF处理组,浓度分别为12.5、25、50、100μmol/L),分别使用CCK-8、划痕实验、Transwell法检测不同浓度GF在不同作用时间条件下对A549细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响;分别使用乳酸脱氢酶活性检测试剂盒、乳酸定量试剂盒检测不同浓度GF对乳酸脱氢酶活性、乳酸生成量的影响。结果 CCK-8结果表明,GF对A549细胞具有增殖抑制作用,并且在一定浓度和时间范围内呈现出依赖性(P<0.05)。划痕实验结果表明,实验组细胞迁移率小于对照组(P<0.05),随着GF浓度的增加,迁移率逐渐降低(P<0.05)。Transwell结果表明,实验组细胞侵袭细胞数小于对照组(P<0.05),随着GF浓度的增加,侵袭细胞数逐渐减少(P<0.05)。乳酸脱氢酶活性检测结果表明,实验组乳酸脱氢酶活性较对照组显著降低(P<0.05),随着GF浓度的增加,乳酸脱氢酶活性逐渐降低(P<0.05)。乳酸检测结果表明,实验组乳酸生成量较对照组显著减少(P<0.05),随着GF浓度的增加,乳酸生成量逐渐减少(P<0.05)。结论 GF在体外能够抑制A549细胞的增殖、迁移及侵袭,其机制可能是通过抑制乳酸脱氢酶活性从而抑制肺癌细胞糖酵解。

PEDF对人肺腺癌A549细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨不同浓度色素上皮衍生因子(PEDF)作用不同时间对体外培养的人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度(0、80、160、320、640 nmol/L)的重组人PEDF蛋白对体外培养的人肺腺癌细胞株A549进行干预,在处理24、48、72 h后,分别用MTT法检测PEDF对A549细胞增殖的抑制率并比较;在作用48 h后,以流式细胞仪检测技术计算、分析A549细胞凋亡率。结果不同浓度PEDF(0、80、160、320、640 nmol/L)干预A549细胞相同作用时间(24、48、72 h)情况下,随着PEDF浓度的增加,PEDF对A549细胞的增殖抑制率递增(P<0.05);相同PEDF浓度(80、160、320、640 nmol/L)情况下,除了80、160 nmol/L PEDF作用24 h和48 h的细胞增殖抑制率间差异无统计学意义外,随着PEDF作用时间的延长,PEDF对A549细胞的增殖抑制率也基本呈递增趋势(P<0.05)。上述不同浓度的PEDF处理A549细胞48 h,细胞凋亡率随着PEDF浓度的升高呈递增趋势(P<0.05)。结论 PEDF在体外能抑制人肺腺癌细胞株A549的增殖并诱导其凋亡。PEDF抑制细胞增殖作用可能和PEDF浓度及作用时间有关,PEDF诱导细胞凋亡作用的强弱也与PEDF浓度有一定关系。

PEDF对人脐静脉内皮细胞和肺癌SK-MES-1细胞增殖的影响及作用机制

目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对SK-MES-1细胞和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖的影响及可能的机制。方法 CCK-8法检测不同浓度PEDF在不同作用时间条件下对HUVECs和SK-MES-1细胞增殖的影响;流式细胞仪检测不同浓度PEDF对此两种细胞凋亡的影响;qRTPCR检测PEDF对此两种细胞中血管内皮生长因子(VEGF)基因表达水平的影响。结果 CCK-8结果显示,PEDF对HUVECs和SK-MES-1细胞具有增殖抑制作用,呈一定浓度和时间依赖性(P<0.05);流式细胞术结果表明,实验组细胞的凋亡率高于对照组(P<0.05),高浓度用药组凋亡率高于低浓度用药组(P<0.05);qRT-PCR结果表明,与对照组相比,PEDF能抑制HUVECs和SK-MES-1细胞中VEGF mRNA水平的表达(P<0.05)。结论 PEDF的抗肿瘤作用主要包括抑制肿瘤血管生成和直接作用于肿瘤细胞两方面,PEDF对HUVECs和SK-MES-1细胞增殖的影响可能与降低VEGF表达水平有关。

色素上皮衍生因子与呼吸系统疾病发生发展关系的研究进展

色素上皮衍生因子(PEDF)是相对分子质量为50的内源性糖蛋白,是目前已知抗血管生成能力最强的内源性血管生成抑制因子。PEDF具有多种生物学功能,包括神经营养、抗肿瘤、抗血管生成、抗血管通透性、抗炎和抗氧化应激等。多项研究表明,PEDF与肺癌、肺纤维化、胸腔积液、慢性阻塞性肺气肿等呼吸系统疾病关系密切,可能参与呼吸系统疾病的发生发展过程。本文对PEDF的分子结构、功能及其与呼吸系统疾病发生发展的关系进行综述。

色素上皮衍生因子对非小细胞肺癌NCI-H460细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对非小细胞肺癌NCI-H460细胞株增殖及凋亡的影响。方法分别以不同浓度的PEDF干预人肺癌NCI-H460细胞株,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测PEDF对NCI-H460细胞增殖的影响;通过倒置显微镜观察NCI-H460细胞的形态学变化;流式细胞术及Annexin V-FITC/PI双染试剂盒检测PEDF对NCI-H460细胞凋亡的影响。结果 MTT法检测表明PEDF对NCI-H460细胞有明显的增殖抑制作用;通过倒置显微镜可观察到细胞明显的形态学改变;流式细胞术检测结果显示:180、360、720 nmol/L的PEDF干预NCI-H460细胞48 h后,细胞凋亡率分别为10.9%、11.4%及14.3%;随着PEDF浓度的升高,细胞凋亡率逐渐增高,且各干预组与阴性对照组相比,细胞凋亡率的差异均有统计学意义(P<0.01)。结论PEDF可显著抑制NCI-H460细胞增殖并促进其凋亡。