组蛋白乙酰化对A549和BEAS-2B细胞哮喘易感基因ADAM33的影响

目的:研究丁酸钠、曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)及腺病毒E1A相关的300 kD蛋白(adenoviral E1A binding protein of 300 kD,P300)介导的组蛋白乙酰化在人非小细胞肺癌A549细胞及人支气管上皮BEAS-2B细胞中对哮喘易感的解整合素金属蛋白酶33(a disintegrin and metalloproteinase 33,ADAM33)基因表达的影响。方法:将A549细胞及BEAS-2B细胞分别分为丁酸钠对照组(双蒸水处理)和1、2.5、5 mmol/L丁酸钠组,TSA对照组(0.1%二甲基亚砜处理)和0.2、0.4、0.8μmol/L TSA组,按照组别分别予以相应处理;另将BEAS-2B细胞分为对照组(转染P300突变质粒)和P300组(转染P300表达质粒);采用双荧光素酶报告基因法分析ADAM33启动子活性的变化,实时荧光定量PCR(quantitative real time-PCR,qRT-PCR)检测ADAM33 mRNA表达,蛋白质印迹法检测ADAM33蛋白表达。结果:在人非小细胞肺癌A549细胞中,与对照组相比,1 mmol/L丁酸钠组及0.2μmol/L TSA组ADAM33基因启动子活性明显降低(P<0.01);在BEAS-2B细胞中,与对照组相比,1 mmol/L丁酸钠组及0.2μmol/L TSA组ADAM33基因启动子活性、mRNA及蛋白相对表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。加大丁酸钠、TSA药物浓度,ADAM33表达无显著差异。在人支气管上皮BEAS-2B细胞中,与对照组相比,P300组ADAM33启动子活性、mRNA和蛋白相对表达水平明显降低(P<0.05)。结论:丁酸钠、TSA通过组蛋白乙酰化降低人非小细胞肺癌A549细胞和人支气管上皮BEAS-2B细胞中ADAM33表达,P300通过组蛋白乙酰化降低人支气管上皮BEAS-2B细胞中ADAM33表达。

组蛋白乙酰化抑制哮喘易感基因ADRB2的表达

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACi)及组蛋白乙酰化转移酶(histone acetyltransferase,HAT)调控的组蛋白乙酰化修饰对β2肾上腺素受体(β2-drenergic receptor,ADRB2)基因的影响。方法将ADRB2启动子质粒(pADRB2-1918)转染到人正常支气管上皮细胞(BEAS-2B)细胞后,分别加入丁酸钠(sodium butyrate,SoB)和曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA),将pADRB2-1918质粒和腺病毒E1A相关的300kDa蛋白(p300)质粒共转染到BEAS-2B细胞,使BEAS-2B细胞中组蛋白乙酰化,利用双荧光素酶报告基因检测经SoB、TSA及p300处理后BEAS-2B细胞中ADRB2启动子活性。向BEAS-2B细胞中分别加入SoB和TSA,或向BEAS-2B细胞中转染p300质粒,使BEAS-2B细胞中组蛋白乙酰化,利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测BEAS-2B细胞中ADRB2mRNA的相对表达,利用Western blot法检测BEAS-2B细胞中ADRB2蛋白的表达。结果在BEAS-2B细胞中分别加入SoB、TSA和转染p300质粒,参与BEAS-2B细胞中组蛋白乙酰化,发现BEAS-2B细胞中ADRB2启动子活性、mRNA和蛋白的表达均较对照组下降(P<0.05),差异均有统计学意义。结论组蛋白乙酰化可下调哮喘易感基因ADRB2的表达。

多柔比星对乳鼠心肌细胞TLR4/NF-κB信号通路的影响及地塞米松的干预实验研究

目的:观察多柔比星(doxorub ic in,DOX)对乳鼠心肌细胞Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)、核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响,探讨多柔比星在心肌损伤中的可能发病机制及地塞米松(dex-am ethasone,DXM)对其干预作用。方法:采用体外培养乳鼠心肌细胞,用多柔比星制备心肌细胞损伤模型。随机分为3组:对照组,将心肌细胞悬液换用无血清培养基继续培养未加任何药物;DOX组,在培养液中加入多柔比星1 mg/L;DXM+DOX组,在加入DOX 1 mg/L前30 m in给予地塞米松32 mg/L。作用6 h后免疫组织化学法检测心肌细胞TLR4,TNF-α蛋白表达;分别作用2,6,24 h后用W estern b lot法对TLR4,NF-κB,TNF-α在心肌细胞的表达水平进行半定量分析;比色法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性。结果:DOX组心肌细胞TLR4,NF-κB,TNF-α表达较对照组明显增加(P<0.01);DXM+DOX组心肌细胞TLR4,NF-κB,TNF-α表达水平低于DOX组(P<0.01);与对照组比较,DOX组的LDH活性明显增高(P<0.01,6 h组);与DOX组比较,DXM+DOX组的LDH活性明显降低(P<0.01,6 h组);与对照组比较,DXM+DOX组的LDH活性稍高(P<0.05,6 h组)。结论:多柔比星作用于鼠心肌细胞,导致心肌细胞TLR4过度表达,激活其下游信号转导系统,表达细胞因子TNF-α,是其心肌细胞损伤的机制之一;DXM可以干预多柔比星心肌细胞TLR4及其下游信号转导NF-κB,TNF-α的过度表达,具有一定的心肌保护作用。

儿童重症手足口病55例临床分析

目的探讨重症手足口病(HFMD)的临床表现及治疗情况,为其防治提供依据。方法回顾性分析镇江市第一人民医院2012年5～9月收治的55例重症HFMD患儿的临床资料。结果 55例均出现发热伴手、足、口、臀部皮疹,半数以上患儿出现惊跳、肢体抖动、精神差和(或)嗜睡,部分患儿出现惊厥,危重型2例,均发生神经源性肺水肿、心肺功能衰竭、顽固性休克。应用利巴韦林、甘露醇、免疫球蛋白、甲基泼尼松龙等综合治疗,治愈38例,好转15例,2例死亡。结论 3岁以内HFMD患儿在病程的第3～5天易发展成重症,出现持续高热、惊跳、肢体抖动、抽搐、嗜睡多提示病情危重;出现频繁抽搐、昏迷、脑疝、呼吸困难、发绀、血性泡沫痰、休克则认为为危重型病例。重症手足口病起病凶险,须早期发现危重征象,并及早给予相关的治疗,以改善患儿预后,降低病死率。

多柔比星对乳鼠心肌细胞TLR2、TLR4表达的影响

目的:观察Toll样受体2(toll-like receptor 2,TLR2)、Toll样受体4(TLR4)在多柔比星(doxorubicin,DOX)损伤乳鼠心肌细胞中的表达,探讨多柔比星在心肌损伤中的可能发病机制。方法:体外培养乳鼠心肌细胞,将培养的乳鼠心肌细胞随机分为2组,对照组将心肌细胞悬液换用无血清培养基继续培养,未加任何药物;多柔比星组在培养液中加入多柔比星1 mg/L。作用6 h后免疫组织化学法检测心肌细胞TLR2、TLR4蛋白表达;分别作用2,6 h后用蛋白质印迹法对TLR2、TLR4在心肌细胞的表达水平进行半定量分析。结果:多柔比星组心肌细胞TLR2、TLR4的表达较对照组明显增加(P<0.01)。结论:TLR2、TLR4作为模式识别受体可能介导了多柔比星心肌细胞损伤的固有免疫反应,是多柔比星心肌细胞损伤的机制之一。

血清转化生长因子-β1在特发性血小板减少性紫癜患儿中的变化及临床意义

目的探讨血清中转化生长因子-β1(TGF-β1)在特发性血小板减少性紫癜患儿中的变化及临床意义。方法采用双抗体夹心酶联免疫(ELISA)定量测定方法检测17例ITP患儿治疗前后TGF-β1水平、血小板计数的变化,并与16例正常健康儿童血清TGF-β1、血小板计数水平进行比较。结果 ITP患儿血清TGF-β1水平均显著高于正常对照组(P<0.01),ITP患儿治疗前血清TGF-β1水平均高于治疗后(P<0.01);血清TGF-β1高者,治疗过程中血小板计数恢复较慢。相关分析显示:TGF-β1水平与患者血小板计数呈负相关,与骨髓内巨核细胞数呈正相关(均P<0.01)。结论 TGF-β1参与ITP的发病过程,其水平与血小板变化密切相关,可能与机体免疫机制异常有关。

思密达联合思连康治疗小儿秋季腹泻60例临床分析

目的观察思密达联合思连康治疗小儿秋季腹泻的疗效及安全性。方法将我院120例秋季腹泻患儿随机分为两组,对照组给予思密达治疗,实验组给予思密达联合思连康治疗,对比两组患儿治疗3 d后的疗效。结果实验组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组疗程短于对照组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论使用思密达联合思连康治疗小儿秋季腹泻的效果较好,是一种安全有效的治疗措施。

血小板活化因子在川崎病中的变化及临床意义

目的:探讨血小板活化因子(PAF)在川崎病中的变化及临床意义。方法:选择我院于2010年1月～2013年4月收治的川崎病患儿40例,根据超声心动图分为冠状动脉损伤组10例与无冠状动脉损伤组30例;另选择30例健康儿童设为对照组。测量三组儿童血浆血小板活化因子的含量。结果:川崎病患儿急性期与恢复期的PAF含量显著高于对照组(P<0.05);川崎病患儿急性期PAF含量显著高于恢复期(P<0.05);急性期冠状动脉损伤患儿PAF含量显著高于无冠状动脉损伤组(P<0.05);川崎病患儿的PAF含量与冠状动脉扩张呈正相关关系。结论:川崎病患儿血浆PAF可能参与了该病病理生理过程,与患儿冠状动脉损伤有一定联系。

女童中枢性性早熟预测模型的建立及评价

目的 构建基于实验室指标、超声参数及临床因素的女童中枢性性早熟(CPP)预测模型。方法 选取2020年1月至2022年4月该院收治的103例性早熟女童作为研究对象,其中单纯乳房早发育(IPT)组62例,CPP组41例。比较两组基线资料、超声参数(子宫容积、卵巢容积、>4 mm卵泡数),以及血清促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)峰值、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素生长因子结合蛋白(IGFBP-3)、25羟维生素D[25-(OH)D]水平。采用Logistic回归分析CPP的影响因素,构建Logistic回归模型,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估其对CPP的预测价值。结果 CPP组激素类食品饮食、营养滋补品饮食比例、LH峰值、血清IGF-1水平高于IPT组,子宫容积、卵巢容积、>4 mm卵泡数大于IPT组,25-(OH)D水平低于IPT组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,激素类食品饮食、营养滋补品饮食、子宫容积、卵巢容积、>4 mm卵泡数、LH峰值、血清IGF-1、25-(OH)D水平是CPP发生的影响因素(P<0.05)。构建的风险预测模型:Logit(P)=-12.857+激素类食品饮食×0.423+营养滋补品饮食×0.530+子宫容积×0.971+卵巢容积×0.885+>4 mm卵泡数×0.772+LH峰值×1.145+IGF-1×0.736-25-(OH)D×0.681。ROC曲线分析显示,Logit(P)>0.5时,模型预测CPP发生的曲线下面积(AUC)为0.859,诊断灵敏度为70.92%,特异度为84.16%。结论 CPP发生与子宫容积、卵巢容积、>4 mm卵泡数、LH峰值、血清IGF-1、25-(OH)D水平以及激素类食品、营养滋补品饮食情况有关,据此构建的Logistic回归模型对CPP的预测价值较高,可为临床决策提供参考。

母公司吸收合并其直接控股的全资子公司会计处理的探讨

一、母公司吸收合并其直接控股的全资子公司的会计处理误区 实际经济活动中,母公司吸收合并其直接控股的全资子公司的案例屡见不鲜。母公司吸收合并其直接控股的全资子公司,母公司个别财务报表究竟如何进行会计处理,实务中有不同的看法。相当一部分人认为,母公司吸收合并其直接控股的全资子公司属于同一控制下的吸收合并,因而其会计处理适用于《企业会计准则第20号--企业合并》的相关规定。

企业信息化建设中的主数据管理

为更好地解决企业信息化建设中业务系统相互独立、数据缺乏统一规划的问题,提出构建企业主数据管理平台。主数据管理平台能够实现对企业信息化系统内主数据的统一管理,保持各系统数据的一致性,便于进行数据挖掘,为领导层作出决策提供正确的数据支持。该研究对于企业信息化数据的管理具有实用价值。

基于QTP的高速公路收费软件自动测试框架

为更好地应对目前高速公路收费系统版本升级频繁、测试周期不断被压缩的状况,提出基于QTP的高速公路收费软件自动测试框架。该框架能够减少冗余测试代码,提高测试代码的生产率、可重用性和可维护性。此外,通过将该框架复用到很多类型相同或相近的项目中,还可以大大节省测试成本、缩短测试周期。该研究对于高速公路收费软件的测试具有实用价值。

转录因子GATA结合蛋白3对哮喘易感基因ADAM33表达的影响

目的:探讨转录因子GATA结合蛋白3(GATA binding protein 3,GATA3)对解整合素金属蛋白酶33(a disintegrin and metalloproteinase 33,ADAM33)基因启动子活性及mRNA表达的影响。方法:以人正常肺上皮BEAS-2B细胞DNA为模板经PCR扩增得到ADAM33基因启动子区1953 bp片段。通过双酶切、连接、转化等步骤将该片段克隆至pGL3-Basic载体构建ADAM33启动子重组质粒,并将其转染至人HEK293T、BEAS-2B细胞中;利用双荧光素酶报告基因技术检测HEK293T、BEAS-2B细胞中所构建的质粒启动子活性。将HEK293T、BEAS-2B细胞分为pcDNA-GATA3组和pcDNA3.1对照组,分别转染GATA3过表达质粒和空白对照质粒,用双荧光素酶报告基因技术检测荧光素酶活性;用实时荧光定量PCR检测BEAS-2B细胞中ADAM33 mRNA相对表达水平。结果:通过PCR、双酶切和测序鉴定,成功构建含ADAM33启动子片段的重组质粒;重组质粒的ADAM33启动子活性较pGL3-Basic对照组明显增高。与pcDNA3.1组相比,HEK293T、BEAS-2B细胞中pcDNA-GATA3组ADAM33启动子区荧光素酶活性明显增高(P<0.05或P<0.01);BEAS-2B细胞中pcDNA-GATA3组ADAM33 mRNA相对表达水平明显增高(P<0.01)。结论:转录因子GATA3上调哮喘易感基因ADAM33启动子活性及mRNA表达。

“因其他投资方增资而导致母公司丧失对其子公司控制权”事项的会计处理解析

本文以《企业会计准则解释第7号》第1条的相关规定为切入点,解读了"因其他投资方对子公司增资而导致母公司丧失对其子公司控制权"事项的会计处理原则,并以案例形式分析了"因其他投资方对子公司增资而导致母公司丧失对其子公司控制权"事项的会计处理原则具体运用。

普米克令舒联合沙丁胺醇治疗支气管哮喘患儿的临床效果分析

目的 探讨普米克令舒联合沙丁胺醇治疗支气管哮喘患儿的临床效果。方法 选取2021年2月至2022年1月我院收治的支气管哮喘患儿84例,采用随机数表法分为对照组和观察组各42例。对照组单用沙丁胺醇治疗,观察组采用普米克令舒联合沙丁胺醇治疗,对比两组疗效、副作用及治疗前后临床症状评分、气道炎症指标[白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-10(IL-10)]、氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SDO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)]。结果 观察组治疗总有效率为92.86%,高于对照组的76.19%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组各项临床症状评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组肺组织IL-5水平低于对照组,IL-10水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组SOD、GSH-Px水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 普米克令舒联合沙丁胺醇可有效改善支气管哮喘患儿临床症状,减轻气道炎症、氧化应激,疗效确切且安全性较高。

综合收费业务平台V 3.0的开发与应用

《综合收费业务平台V3.0》(简称ITSNV3.0)由上海交技发展股份有限公司自主研发,集成了国内外目前已存在的收费技术(非接触IC卡、条形码、纸券、全自动电子收费、计重收费等)及收费制式(开放式、封闭式),并且可配置拆账、预付卡发行管理模块,全面满足了国内高速公路收费系统的工作流程和业务功能的需要。

干扰素调节因子-5的研究进展

干扰素调节因子-5能诱导IFN-β、IFN-产生，也能促进IL-6、IL-12、IL-17、IL-23、NF等细胞因子的分泌，从而参与机体的免疫反应、细胞生长、细胞分化、细胞凋亡、肿瘤发生和细胞信号转导等过程。干扰素调节因子15在人体许多疾病的发生、发展中起重要作用。深入研究干扰素调节因子-5有助于我们可以更好地阐明相关疾病的发病机制并为治疗这些相关疾病提供理论依据和相应的靶点。

丁酸钠对IRF5基因表达的影响

目的探讨不同浓度丁酸钠(NaB)对干扰素调节因子5(IRF5)基因表达的影响。方法体外培养人肺腺癌细胞A549和人胚肾细胞HEK293,分别用去离子水(对照组)和浓度为1.0、2.5和5.0mmol/L的NaB处理细胞(实验组),采用双荧光素酶报告基因技术检测IRF5基因启动子活性,采用RT-qPCR及Western blot法检测IRF5基因mRNA及蛋白表达水平。结果与对照组相比,实验组NaB可降低A549细胞及HEK293细胞中IRF5基因启动子活性、抑制A549细胞中IRF5基因mRNA及蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。随着NaB处理浓度的增加,IRF5基因启动子活性、mRNA及蛋白表达均呈下降趋势。结论 NaB对体外IRF5基因表达具有抑制作用。