PBL及CBL联合多媒体教学在《临床血液学检验技术》实验课教学中的应用

临床血液学检验知识较抽象、难懂,医学检验专业学生普遍存在临床思维缺乏,在临床血液学检验时难以合理运用理论知识做出准确的诊断报告。而《临床血液学检验技术》实验课是将理论知识应用于实践的桥梁。以多媒体教学系统为平台,通过以问题为基础的教学法(problem based learning,PBL)和案例教学法(case based learning,CBL)的新型实验课教学模式旨在培养学生的实验操作能力、临床思维、独立思考及主动解疑的能力,在学习理论知识的同时培养学生的动手能力和实践能力,为今后学生走上临床检验诊断工作打下坚实的基础。文章从《临床血液学检验技术》实验课教学现状及问题,PBL、CBL及联合教学法的优点,PBL及CBL联合多媒体教学具体实施方法、教学成效及评价反馈方面来探讨如何提高《临床血液学检验技术》实验课教学效果,为临床检验专业实验课教学提供了新的方向。

激素配方对青钱柳硬枝插穗营养物质、酶活性及生根的影响

【目的】为提高青钱柳硬枝扦插的生根率和生根质量,探讨激素配方对不同阶段硬枝扦插插穗营养物质、抗氧化酶活性的变化及其对生根率的影响。【方法】配制10种激素配方处理插穗,根据插穗外部形态变化,分别于扦插第30、45、60 d取样测定插穗可溶性糖、淀粉和可溶性蛋白含量及SOD、CAT和POD酶活性,并于90 d统计插穗的不定根数、不定根长、根径和生根率。【结果】不同激素配方显著影响青钱柳硬枝扦插的生根率和生根质量(P<0.05),其中T3激素配方生根率仅为0.2%,而T6激素配方生根效果最佳,其插穗生根率达到44.1%,不定根数2根,不定根长4.3 cm,根径1.9 mm。随着扦插时间的延长,插穗中淀粉和可溶性蛋白含量呈下降趋势,而可溶性糖含量呈持续上升趋势;POD、SOD及CAT活性总体上呈现下降趋势,POD活性对外源激素处理反应较敏感,T6激素配方处理插穗的POD和CAT活性变异幅度明显高于其他激素配方。相关分析表明,膨大期、愈伤期和生根期插穗中可溶性糖含量与90 d的生根率呈极显著正相关(P<0.01),但仅在膨大期插穗中淀粉含量和POD活性与90d的生根率呈显著正相关(P<0.05)。【结论】总体来看,不同激素配方显著影响青钱柳硬枝插穗中储藏物质的转化及抗氧化酶活性,从而影响其生根率和生根质量,特别是插穗中可溶性糖含量与生根率密切相关,而以T6激素配方最有利于提高青钱柳硬枝扦插的生根率和生根质量。

青钱柳种子的种皮构造及其对透水性的影响

通过青钱柳种子的形态解剖、种皮结构的电镜扫描、种皮的透水性等试验,对青钱柳种皮构造与种子休眠关系进行研究,以探讨青钱柳种子的休眠原因。结果表明,青钱柳种子种皮有3层,外种皮表面角质化,中种皮木栓质,内种皮木质而坚硬,这在一定程度上阻碍了胚与外界的水汽交换,影响种子的吸胀和萌发。种皮的透水性试验结果表明,浓硫酸处理后,种子能很快吸水膨胀。种子各部分的含水量测定结果表明,青钱柳完整种皮种子的胚能吸收到部分水分,因此,种皮的透水性可能不是引起青钱柳种子休眠的最主要因素。但是,青钱柳种子的这种种皮结构可能对胚的萌发特别是胚根的生长和伸长会产生严重的机械阻力。

青钱柳种子综合处理过程中内源激素的动态变化

青钱柳种子属于深休眠类型,在自然条件下,需要经过隔年甚至2年才能萌发,笔者对综合处理的青钱柳种子萌发过程中各种激素的变化进行分析。结果表明:随着层积时间的增长,其脱落酸(ABA)的含量逐渐减少,而赤霉素(GA)、生长素(IAA)、细胞分裂素(CTK)的含量则逐渐增加。赤霉素与脱落酸、生长素与脱落酸和细胞分裂素与脱落酸含量的比值也呈现出基本增加的趋势。进一步证实了赤霉素(GA)是种子萌发的促进物质。同时,生长素(IAA)、细胞分裂素(CTK)在解除种子休眠过程中也起到一定的促进作用。

青钱柳叶中黄酮类化合物的地理变异

以青钱柳Cyclocarya paliurus11个种源1年生苗的叶片为材料,研究青钱柳叶片中黄酮类化合物的地理变异,初步筛选出黄酮类化合物质量分数高的优良药用种源。黄酮类化合物各成分用液相色谱测定,数据采用方差分析、多重比较和相关分析等进行统计分析。结果表明:青钱柳叶中3种黄酮类化合物质量分数紧密相关,其中山奈酚质量分数高于槲皮素和异槲皮苷。研究的各种源中,安徽歙县和广西资源种源的黄酮类化合物的质量分数较高,分别为6.770和6.494mg·g-1,安徽舒城种源的黄酮类化合物质量分数最低,仅为1.230mg·g-1;以经纬度为自变量,各成分的质量分数为因变量进行趋势面分析,青钱柳叶中山奈酚质量分数呈经纬度双向变异,但其变化幅度随经度变化幅度不如纬度变化大,其表现出以108°E和27°N交叉区域为中心向东西递增、向南北递减的趋势,而槲皮素和异槲皮苷质量分数的变化没有明显的规律性。青钱柳黄酮类化合物较高的优良药用种源为安徽歙县和广西资源种源。

青钱柳种皮甲醇浸提液的生物测定

通过对青钱柳〔Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinskaja〕种皮甲醇浸提液的生物测定,探讨青钱柳种子休眠与种皮内源抑制物质的关系。结果表明,青钱柳种皮不同浓度的甲醇浸提液(10%、20%、25%、30%和40%)对白菜(Brassica campestrisL.ssp.chinensis)种子发芽率和种子活力以及幼苗的高生长、根生长均有抑制作用,浓度越高抑制作用越明显。用30%和40%浸提液处理,白菜种子不能萌发;用10%、20%和25%浸提液处理,白菜种子的萌发率分别为98.6%、75.0%和9.0%;苗高和根长分别比对照降低了31.6%、48.1%、79.7%和21.3%、70.8%、90.2%。表明青钱柳种子的种皮中含有抑制种子萌发和幼苗生长的成分。

外源硝普钠对青钱柳叶片内活性物质含量和体外抗氧化能力的影响

通过研究外源物质硝普钠对青钱柳叶片内活性物质(总黄酮、总三萜、总多酚、多糖)含量和抗氧化能力,为青钱柳活性成分的开发利用提供参考。设置对照组(CK)与低、中、高三个浓度硝普钠(SNP)溶液处理,分别测量青钱柳叶片内活性物质含量以及ABTS和DPPH的自由基清除率。结果表明:外源SNP会显著降低青钱柳叶片内总黄酮含量,显著增加总多酚和多糖的含量,降低总三萜含量但不显著;同时显著性提高了ABTS和DPPH的清除率;1.0mML SNP处理会提高总多酚、多糖含量,同时能够对青钱柳叶体外抗氧化作用产生积极影响作用。

植物中硼在微观水平上的作用机制及研究展望

硼是植物生长所必需的营养元素,在植物正常的生命活动中发挥着重要作用。随着基因组学、蛋白质组学、代谢组学、转录组学等现代技术手段的不断应用,人们对植物中的硼研究也逐渐深入。本文综述了近年来植物中的硼在组学水平上的研究进展,组学技术在构建硼高密度遗传图谱、寻找与硼吸收转运相关的转录因子、硼介导的代谢途径方面的重要作用,可以为研究不同硼水平下植物响应的差异、提高硼利用效率和减弱植物遭受硼毒害的响应机制研究提供一定思路。

青钱柳茎段腋芽萌发和丛生芽增殖

为建立高效的青钱柳组培快繁体系,以青钱柳茎段腋芽作为外植体,WPM为基本培养基,研究不同植物生长调节剂种类及其浓度组合对腋芽萌发和丛生芽增殖的影响。结果表明:9个处理的激素组合对青钱柳腋芽萌发均有不同程度的促进作用。其中,6-BA3mg·L-1+2ip1mg·L-1+NAA0.1mg·L-1处理效果最佳,萌芽率最高(83.33%),芽生长状态最好,但各处理诱导的均以单芽为主。将单芽置于添加TDZ的培养基中则诱导的均为丛芽,最佳组合为TDZ0.1mg·L-1+NAA0.1mg·L-1,萌芽率、增殖系数均达最高,分别为100%和7.33。培养基中添加2.0mg·L-1GA3能有效地促进丛生芽的伸长生长,芽苗生长健壮,为后续生根奠定良好基础。

青钱柳叶总黄酮超声辅助提取工艺优化

为研究以乙醇为溶剂超声波辅助提取青钱柳叶总黄酮的工艺,在单因素试验的基础上,采用四因素二次回归正交旋转组合设计,以液料比、超声处理时间、超声功率、溶剂体积分数为考察因素,优选了超声波辅助提取青钱柳叶总黄酮的最佳工艺。结果表明各因素对提取率的影响大小依次为:超声处理时间、溶剂体积分数、液料比、超声功率。最佳工艺条件为液料比55 mL/g,超声处理时间34 min,超声功率720 W,溶剂体积分数60%,在此最佳条件下,总黄酮的得率为86.63%,优化工艺稳定,提取率也较高,试验验证结果与模型预测值相符。

青钱柳组培快繁体系的初步研究

以青钱柳成熟胚为实验材料,对建立青钱柳组培快繁技术体系进行初步研究。结果表明,离体胚在添加30g/L蔗糖6、.5 g/L琼脂的培养基中培养60 d,成苗率可达到72.67%。通过正交试验筛选出丛生芽诱导增殖的最佳培养基为WPM+0.5 mg/L 6-BA+0.01 mg/L IBA+30 g/L蔗糖,适宜的继代周期为40 d,丛生芽诱导率可达到93.33%,增殖系数最高为4.75,3种激素对丛生芽增殖系数的影响程度依次为IBA>6-BA>KT,其中IBA有显著影响。培养基中添加适当浓度的烯效唑和稀土镧对试管苗的壮苗和生长均有促进作用,其最适浓度分别为0.1mg/L和5 mg/L。适宜浓度的IBA对试管苗生根有一定促进作用,采用WPM+0.2 mg/L IBA+20 g/L蔗糖培养基进行诱导,生根率为16.67%,经过15 d暗诱导处理,生根率可提高到23.33%。

青钱柳雌、雄花芽分化进程的形态解剖特征观察

通过物候学观察结合石蜡切片技术,研究了青钱柳雌先型植株雌雄花芽分化过程中外部形态的变化和内部解剖结构的对应关系。研究表明:雄花发育可分为花药及花药壁的发育、小孢子发育和雄配子体发育3个阶段,与之对应的形态变化表现为花序伸长和小花膨大、苞片开裂至花药变黄色;雌花发育可分为雌蕊分化期、胚珠发育、大孢子发育及雌配子体发育,相应的形态变化表现为小花原始体出现和膨大、露出柱头、花柱伸长和变成深绿色。由此可见雌、雄花芽的外部形态指标变化可以直观反映出内部结构的变化,并可用来判断花芽分化的各个时期。另外,还探讨了影响青钱柳结实的可能原因是雌雄异熟性、结实母树群体大小及群体中雌先型植株和雄先型植株的比例。

茂兰喀斯特地区原始林凋落物量动态与养分归还

于2007年9月至2008年8月对茂兰喀斯特地区原始林凋落物进行观测,分析了凋落物总量、组分(叶、枝、繁殖器官和其他)凋落量和各组分不同养分含量的月动态变化及养分归还量。结果表明,凋落物月动态变化表现为常绿落叶阔叶混交林一般具有的双峰模式,凋落高峰出现在9至次年1月和4月;年凋落物量为6.9 t·hm-2,其中叶、枝、繁殖器官和其他组分的年凋落物量分别占年凋落物总量的71.0%、15.9%、1.5%和11.6%;凋落物各养分含量以C、Ca和N为主,无明显的月动态规律,养分年归还量由大到小依次为C、Ca、N、Mg、K和P,此与一般非喀斯特地区森林(由大到小依次为C、N、Ca、K、Mg和P)不同;凋落物各组分养分元素含量存在差异,凋落枝N、Mg、P和K含量较低,其他组分C、N、P和Mg含量较高,繁殖器官C、N和Ca含量较低;凋落物中Ca和Mg含量以及Ca和Mg年归还量远高于一般非喀斯特地区森林;K含量及K年归还量低于非喀斯特地区,说明该地区K的缺乏可能制约着喀斯特地区植被的生长。

不同种源青钱柳叶黄酮类物质含量的动态变化

通过对5个种源青钱柳叶片黄酮类物质生长期动态规律的分析,寻求最适宜的利用时期,并初步筛选优良种源。基于高效液相色谱分析数据,对其功能叶黄酮类物质含量进行统计分析。结果表明:不同月份黄酮类物质含量差异显著,湖南江华和江西庐山种源的最佳采收期为7月,其他种源为10月;不同种源间黄酮类物质含量变异极显著,初步筛选出江华和庐山为优良药用种源。

青钱柳叶总黄酮大孔树脂纯化工艺

为提高青钱柳叶总黄酮的纯度,筛选适宜青钱柳叶总黄酮纯化的大孔树脂,确定青钱柳叶总黄酮纯化工艺参数,选用大孔树脂材料,采用静态与动态吸附—解吸方法对青钱柳叶总黄酮进行纯化,以吸附量与洗脱率为考察指标对树脂进行选择与工艺研究,并利用紫外可见分光光度计测量青钱柳叶总黄酮的含量。结果表明:AB-8型大孔树脂纯化效果最好,其最佳工艺为进样速度2 BV/h、进样质量浓度1.0 mg/mL,洗脱剂最适宜体积分数与洗脱速度分别为70%和2 BV/h。表明AB-8型大孔树脂适合青钱柳叶总黄酮的纯化。

青钱柳种源间苗期性状变异分析

研究了青钱柳1年生苗的复叶性状、光合特性及生长量的差异性,并分析了生长性状的变异层次。结果表明,不同种源青钱柳复叶性状、地径和苗高均达到显著或极显著水平差异。光合指标在不同生长季节内有着不同的表现,净光合速率、气孔导度及蒸腾速率在青钱柳整个生长期内均表现出先升高后降低的趋势,而胞间隙CO2浓度则有先下降后上升的趋势。青钱柳苗高、复叶面积、复叶干质量及比叶质量在种源层次上变异大于家系层次上变异,地径则表现出家系间变异大于种源间变异。

青钱柳愈伤组织诱导

为获得优质的愈伤组织,以青钱柳嫩茎和叶片作为外植体诱导愈伤组织,研究了不同的消毒方法、基本培养基和植物生长调节剂对青钱柳叶片和茎段愈伤组织诱导的影响。结果表明,以青钱柳茎段为外植体诱导愈伤组织,最佳的消毒组合为70%酒精10 s+0.1%升汞4 min,污染和死亡率最低(18.0%),诱导率最高(95.0%)。以青钱柳叶片为外植体诱导愈伤组织,最佳的消毒组合为70%酒精0 s+0.1%升汞4 min,污染和死亡率最低(13.7%),诱导率最高(96.3%)。以青钱柳茎段、叶片为外植体诱导愈伤组织的最佳基本培养基分别为改良MS和MS,诱导率最高分别为95.56%和96.37%。激素组合KT0.5 mg.L-1+2,4-D2.0 mg.L-1效果最佳,诱导率高达97.5%。研究结果为青钱柳愈伤组织诱导最适培养条件的筛选提供依据,同时也为进一步建立青钱柳组培快繁及悬浮培养体系提供基础。

青钱柳种质资源多样性SRAP初步分析

为了利用分子标记方法评价青钱柳种质资源的遗传多样性,本文对青钱柳DNA的提取、SRAP扩增体系重要参数进行了优化,运用优化体系筛选多态性引物,并用1对引物对青钱柳9个种源进行了遗传多样性初步分析。研究结果建立了适于青钱柳SRAP的扩增体系;从110对SRAP引物中筛选出了13对多态性引物,运用1对引物组合Me7+Em2扩增获得21个多态性位点,多态率达100%。遗传多样性分析表明有效等位基因数(Ne)为1.3429,平均Shannon's信息指数(I)为0.3687,Nei's基因多样性指数(H)为0.2267,种源的遗传分化指数Gst为0.1983;聚类分析结果表明9个种源在遗传距离0.100处聚为3类,聚类结果和地理距离之间呈现较高的相关性。本文的研究结果表明所建立的青钱柳种质资源库具有广泛的遗传多样性,为进一步的开发利用提供了条件。

青钱柳幼龄期生长与木材性状表现及其性状相关分析

为进行材用青钱柳优良家系的早期选择,以4年生的青钱柳7个家系为试验对象,开展了青钱柳幼龄期生长速率、微纤丝角、基本密度及结晶度家系间变异的研究。结果表明,青钱柳早期的胸径生长、微纤丝角、木材的基本密度和木材结晶度在家系之间都存在显著差异。不同家系青钱柳的平均胸径在4.93～6.47 cm之间;微纤丝角的变异幅度为19.0°～30.6°,且随着年龄的增大,微纤丝角呈现递减的变化趋势;木材基本密度和结晶度的变化范围分别为0.441～0.547 g/cm^3和37.63%～46.62%。胸径生长和木材性质的变异主要来源于种源。相关分析表明：胸径生长与基本密度呈现微弱负相关,与结晶度呈极显著负相关,与微纤丝角呈显著正相关;而木材性质中除结晶度和微纤丝角呈极显著负相关外,其他木材性质间相关性较弱。因此,在种源层次进行材用青钱柳优良家系的选择可能更加有效。

原发性肾病综合征并发急性肾损伤患者血清及肾组织中NGAL的表达及意义

目的:检测原发性肾病综合征(PNS)患者血清及肾组织中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的水平,探讨PNS合并急性肾损伤(AKI)时患者血清及肾组织中NGAL浓度的变化。方法:72例PNS患者根据病理结果分为:(1)PNS合并急性肾小管坏死(ATN)组15例,其中微小病变(MCD)合并ATN 10例,系膜增生(MsPGN)合并ATN 5例;(2)PNS不合并ATN组57例,其中MCD组24例,膜性肾病(MN)组23例和MsPGN组10例。15例健康体检者的血液及5例正常肾组织作为正常对照组。采用ELISA检测血清NGAL的水平;采用免疫组化法检测肾组织中NGAL的表达。结果:(1)PNS患者血清NGAL水平及肾组织中NGAL表达明显高于正常对照组(P<0.05),其中MN组较MCD组和MsPGN组血清NGAL水平明显升高(P<0.05)。(2)MCD合并ATN组和MsPGN合并ATN组血清NGAL水平及肾组织中NGAL表达较不合并ATN组显著升高(P<0.05)。(3)血清中NGAL与24 h尿蛋白定量、血尿素氮和血肌酐呈正相关(P<0.05),与血清白蛋白和β2微球蛋白无明显相关性(P>0.05);血清中NGAL与肾组织NGAL的表达呈正相关(P<0.01)。结论:血清NGAL可能作为判断原发性肾病综合征并发急性肾损伤的早期、无创、敏感指标。