自动化抽取进口大豆检疫样品研究

随着我国进口大豆数量和规模的不断增加,大豆检疫取样工作中存在的问题突出。本文系统分析了大豆检疫样品的组成,总结了进口散装大豆检疫中取制样工作以人工操作为主的现状,设计研发了专门用于大豆检疫样品抽取的自动化取制样系统,可用于代替人工开展进口大豆检疫样品的抽取,阐述了该设施的设计流程、取样过程和应用效果,并对系统工作效能进行了分析,对其推广应用开展了讨论,以期为进口大豆检疫取样分析的自动化提供参考。

中国水稻白叶枯病菌毒性变异研究

利用13个含已知抗病基因的近等基因系材料，在水稻孕穗期采用剪叶接种法对我国285个水稻白叶枯菌株（其中108个采集于1970～1992年，177个采集于2003～2004年）的致病力变异进行研究。结果表明，病菌的致病力呈现多样性。通过试验系统比较了不同时期病菌的毒性和小种组成变化。在此基础上对病菌群体毒性变化的原因进行了分析。

双重PCR方法检测检疫性细菌洋葱腐烂病菌和菊基腐病菌

为建立同步检测检疫性细菌洋葱腐烂病菌和菊基腐病菌的双重PCR方法,根据Gen Bank上公布的洋葱腐烂病菌ITS序列设计1对特异性引物B3/B6,将设计的引物与已发表的检测菊基腐病菌特异性引物ADE1/ADE2结合,经过条件优化,建立了双重PCR反应体系,并进行特异性和灵敏度验证。应用双重PCR体系能从洋葱腐烂病菌和菊基腐病菌基因组DNA以及人工带菌样品中扩增到特异性条带。结果表明,建立的双重PCR检测方法能同时检测出洋葱腐烂病菌和菊基腐病菌,可应用于口岸进口郁金香种球2种检疫性细菌的检测。

双重PCR法同步检测菜豆晕疫病菌和萎蔫病菌

为建立同步检测菜豆晕疫病菌和细菌性萎蔫病菌的双重PCR方法,根据Gen Bank上公布的菜豆晕疫病菌arg K基因特异性序列设计1对特异性引物PSPF1/PSPR2,将设计的引物与已发表的检测菜豆细菌性萎蔫病菌特异性引物Cff F1/CffR2结合,经过条件优化,建立了双重PCR反应体系,并进行特异性和灵敏度验证。结果显示,采用双重PCR体系,能从菜豆晕疫病菌和细菌性萎蔫病菌基因组DNA以及人工模拟带菌大豆种子样品中扩增到特异性条带,表明本研究所建立的双重PCR检测方法能同时检测出菜豆晕疫病菌和细菌性萎蔫病菌,可用于口岸进口大豆中2种检疫性细菌的检测。

进口大豆中菜豆晕疫病菌巢式PCR检测方法的建立

为实现对进口大豆样品中菜豆晕疫病菌的快速检测,本研究根据菜豆晕疫病菌的argK特异性序列设计引物52B/8F和24B/24F,建立了巢式PCR检测方法,并进行特异性和灵敏度验证。试验结果表明,利用此检测方法对多种参试菌株进行检测时,只有菜豆晕疫病菌呈阳性反应,而其他病菌不产生扩增反应;巢式PCR检测方法对菜豆晕疫病菌基因组DNA和菌悬液检测时,其灵敏度分别达到0.916×10-4ng/μL和2.4×103CFU/m L,比常规PCR灵敏度高1 000倍。在对100份进口大豆样品检测时,3份样品扩增到了特异性条带,测序分析结果证明3份大豆样品中携带的病菌确实为菜豆晕疫病菌。本研究所建立的巢式PCR检测方法具有特异性强、灵敏度高、检测时间短并且检测准确率高等特点,可用于口岸菜豆晕疫病菌的检测。

水稻条斑病菌gacA基因的克隆及功能初析

根据黄单胞菌gacA基因的同源性设计简并引物,采用PCR方法从水稻条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola,Xooc)中克隆了gacA同源基因,命名为gacAXooc。序列比较显示,该基因在黄单胞菌中是相对保守的。通过同源重组的方法,构建了gacAXooc的插入突变株。对0.1% Tryptone的趋化应答能力检测发现,gacA突变株的趋化能力明显降低,证明gacA与Xooc的趋化性相关。

中美大豆检验检疫法规及标准比较研究

本文介绍了我国和美国有关大豆检验检疫方面的法律法规,并对两国法规进行了对比分析,希望对我国大豆进出口贸易和检验检疫工作有所裨益。

巢式PCR检测菜豆细菌性萎蔫病菌

为了实现对进口大豆样品中菜豆细菌性萎蔫病菌的快速检测,试验根据菜豆细菌性萎蔫病菌的REP-PCR扩增测序结果,设计了1条特异性引物Cff F11,与引物Cff FOR组合,建立了巢式PCR检测方法,并进行特异性和灵敏度验证。结果表明,利用此检测方法对多种参试菌株进行检测时,只有菜豆细菌性萎蔫病菌呈阳性反应,而其他病菌不产生扩增反应;巢式PCR方法检测菜豆细菌性萎蔫病菌菌悬液时,其灵敏度达到3.1×103cfu·m L-1,比常规PCR灵敏度高1 000倍。制备带菌率为0.5%的大豆样品,用巢式PCR方法 1h内就可进行检测,检测时间大大缩短;在对实验室留存的100份进口大豆样品检测时,1份样品扩增到了特异性条带,测序分析结果证明此份大豆样品中携带的病菌为菜豆细菌性萎蔫病菌。本试验所建立的巢式PCR检测方法具有特异性强、灵敏度高、检测时间短并且检测准确率高等特点,可用于口岸菜豆细菌性萎蔫病菌的检测。

水稻白叶枯病菌gacA基因的克隆、测序及敲除研究

根据黄单胞菌gacA基因的同源性设计简并引物,采用PCR方法从水稻白叶枯病菌(Xanthom onas oryzaepv.oryzae,Xoo)中克隆了gacA同源基因,命名为gacAXoo。序列比较显示,该基因在黄单胞菌中是相对保守的。蛋白质保守结构域搜索表明,GacAXoo属于LuxR家庭的一员,具有与其他GacA蛋白相似的结构。通过同源重组的方法,构建了gacAXoo的插入突变体,为下一步研究gacAXoo的功能奠定了良好的基础。

草莓角斑病菌室内抑菌药剂筛选

采用含毒介质法,以草莓角斑病菌为研究对象,室内评价16种药剂对该病菌的抑菌效果。结果表明,72%农用链霉素可溶性粉剂效果最好,最低有效浓度为18.75μg/mL;另外,溴菌腈、溴氯海因和一些铜制剂也对草莓角斑病菌有一定的抑制作用。本试验得到的一些药剂对草莓角斑病菌有良好的抑菌效果,这为预防该病的发生和流行提供了参考。

草莓角斑病菌检测鉴定技术研究进展

本文综述了近年来草莓角斑病菌(Xanthomonas fragariae)检测鉴定技术的研究进展。传统的鉴定方法主要有依赖田间症状识别、寄主接种鉴定、培养性状、生理生化鉴定、脂肪酸分析法(FAP)等;应用血清学鉴定检测方法主要有酶联免疫吸附法(ELISA)、菌落免疫荧光染色法(IFAS)等,分子生物学检测方法主要有限制性片段长度多态性(RFLP)、聚合酶链反应(PCR)、巢式PCR、实时荧光PCR等。对于XF的检测鉴定不能单单依靠一种方法,应将多种方法结合起来进行最终判定,因此建立一套完整的检测鉴定技术体系十分必要。

菜豆晕疫病菌环介导等温核酸扩增检测方法的建立

为了建立菜豆晕疫病菌的环介导等温扩增方法,本试验利用菜豆晕疫病菌arg K特异性序列设计环介导等温核酸扩增(LAMP)引物,进行反应条件和反应体系的优化,并进行特异性和灵敏度验证。特异性检测结果显示,5株菜豆晕疫病菌的LAMP产物呈阳性结果,而参试的其他病原菌不产生扩增反应。LAMP检测基因组DNA和菌悬液时,其灵敏度分别达到0.632×10-4ng/μl和7.3×102CFU/ml,该方法比常规PCR灵敏度高100倍。表明本研究所建立的LAMP检测方法简便、快速、准确、灵敏,可有效应用于口岸菜豆晕疫病菌的检测。

草莓角斑病菌PCR检测研究

[目的]研究草莓角斑病菌的快速检测方法。[方法]根据草莓角斑病菌的hrp基因,设计了1对引物XF-F/R,进行该病菌PCR特异性扩增。[结果]该引物可特异性地扩增草莓角斑病菌的DNA、菌悬液、人工接种样品。[结论]该检测方法特异性强、灵敏度高,可适用于草莓角斑病菌的检测。

菜豆细菌性萎蔫病菌传入中国的风险分析

从世界分布、主要寄主、经济重要性、传入可能性和风险管理难度5个方面对菜豆细菌性萎蔫病菌传入我国的风险进行评估。结果表明,该病菌是特别危险的有害生物。根据分析结果提出了非疫区输入、输出国应严格检疫、进境口岸加严检查等相应的风险管理措施。

草莓上一种新病害——草莓角斑病

草莓角斑病（Angular leaf spot of strawberry）是草莓生产上的主要病害，其病原菌为黄单孢杆菌属草莓黄单孢菌，属细菌草莓角斑病菌。1962年首次报道于北美洲，草莓角斑病会引起产量下降，但一般不是毁灭性的。已有该病害发生的国家包括：欧洲的法国、希腊、意大利、葡萄牙、罗马尼亚、西班牙；非洲的留尼汪；美洲的美国、阿根廷、巴西、委内瑞拉；

水稻白叶枯病菌hisF基因的克隆及功能初析

根据黄单胞菌hisF基因的同源性设计简并引物,采用PCR方法从水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzaepv.oryzae,Xoo)中克隆了hisF同源基因,命名为hisFXoo。NCBI网站蛋白质保守结构域搜索表明,HisFXoo属于组氨酸生物合成蛋白家族的一员,具有与其他HisF蛋白相似的结构。序列比较显示,该基因在黄单胞菌中是相对保守的。同源性搜索比较显示,与水稻条斑病菌(X.oryzaepv.oryzicola,Xooc)的hisF(登录号:DQ372107)同源性高达98%。通过同源重组的方法,构建了hisFXoo的插入突变体,在NA+Amp平板上筛选后,并且经过PCR及Southern杂交验证插入正确。在MMX基本培养基中生长测定发现,hisF突变体生长能力明显下降,证明hisF基因与Xoo生长代谢相关。但是,该突变体仍具有致病性,并且毒力与野生型菌株没有明显差异。

论物理学之思想和方法

物理课改的目的是通过对必要的物理基础知识的学习,发展个性、树立思想、掌握方法、培养素质、提高能力。怎样才能学好物理呢?我以为,认识物理学思想和掌握物理学方法是学好物理的保证。现就物理学之思想和方法谈谈自己的浅薄认识,供学生和同行老师商榷。

“五位一体”视角下国门生物安全工作的作用与价值

国门生物安全工作是以动植物检疫为主体手段、以防范外来生物入侵为重点内容、以保障国门生物安全为主要目标的工作。本文以“五位一体”总布局为主线,从经济、政治、社会、文化和生态方面,全面系统地阐述了国门生物安全工作的作用和价值。国门生物安全工作保障农林业生产安全,促进经济高质量发展;体现国家主权,服务国家外交外贸大局;保护人民身体健康,维护社会和谐稳定;丰富中国特色政策和文化供给;保护生态环境和生物多样性,服务生态文明建设。国门生物安全的价值不是单个地存在各个领域,而是相互交织叠加,同时在经济、政治、文化、社会和生态等多方面产生影响。

进境百合种球上3种线虫的检疫鉴定研究

本文通过改良贝曼漏斗法分离收集进境荷兰百合种球及其介质土中携带的线虫,对江苏口岸首次截获的3种线虫进行检疫鉴定研究,以期为口岸进境花卉种球检疫监管提供参考。结果表明,经形态特征观察、显微测计及核糖体DNA28S D2/D3区序列分析,3种线虫分别为洞穴长尾线虫(Seinura caverna)、毁芽滑刃线虫(Aphelenchoides blastophthorus)和燕麦真滑刃线虫(Aphelenchus avenae),均为江苏口岸首次截获。目前,洞穴长尾线虫、毁芽滑刃线虫国内报道较少。