鸡湿热泄泻病证模型的建立

中兽医病证模型是评价药效及研究中兽药作用机制的有效工具。为了建立鸡湿热泄泻病证模型,本研究以SPF雏鸡为试验动物,分别选取大肠杆菌CVCC1558标准株和09-29分离株,采用胸部肌内注射、口腔灌服、泄殖腔灌注3种不同方式,选择不同感染剂量,进行大肠杆菌人工感染试验,观察各组鸡临床症状,进行体温、病理剖检、十二指肠黏膜组织病理学、血细胞计数等多项检查。结果显示,采用不同的感染方法,试验鸡表现出不同的临床表现和病理变化。与空白对照组相比,口腔灌服09-29菌株试验组无任何症状出现,其他各组鸡群均表现出不同程度的病症,其中口腔灌服或泄殖腔灌注大肠杆菌CVCC1558菌株2个组试验鸡表现为排黄绿色稀粪,体温升高,剖检表现为典型卡他性或出血性肠炎变化,无心包炎、肝周炎、气囊炎病变,白细胞数增多,十二指肠黏膜肠绒毛上皮细胞脱落,无病鸡死亡,从病因、症状、病机等方面进行辨证分析,完全符合中兽医湿热泄泻的特征。采用肌内注射感染方式的3个组试验鸡虽然也出现排黄色稀粪、肠炎等湿热泄泻的表现,但发病鸡更多表现为精神极度沉郁以及心包炎、肝周炎、气囊炎等全身败血症变化,死亡率高,全身症状明显,已表现为热入营血,并不符合单纯的湿热泄泻特征。试验表明,采用SPF雏鸡每只口腔灌服大肠杆菌CVCC1558菌株3 mL,或泄殖腔灌注大肠杆菌CVCC1558菌株3 mL,均可成功构建出鸡的湿热泄泻病证模型。该方法建立的病证模型完全符合中兽医湿热泄泻证的病因、病位、病机和证候特点,临床症状明显,剖检特征典型,病程时间长,模型稳定,重复性好,适用于鸡湿热泄泻证的中兽医防治研究。

山东部分地区毛皮动物肺炎克雷伯氏菌的分离鉴定及系统发育分析

为确诊近两年造成毛皮动物(狐狸、貉子、水貂)死亡的主要细菌性病原,本研究在流行病学调查基础上,对新鲜病死毛皮动物进行临床症状观察、病理学检查,同时取病变肝、肺、气管为样品分离纯化细菌,对所分离的细菌进行形态特征、理化特性检查及药敏试验、致病性试验和16S rRNA基因的分子鉴定。结果显示,从剖检病死毛皮动物的肺、肝、气管组织等均检出同种细菌,分离菌株对菌必治和舒巴坦高度敏感,对小白鼠具有较强致病作用,与已知的肺炎克雷伯氏菌16S rRNA序列的同源性为98.6%～100%。综合分析,该分离菌株为克雷伯氏菌属的肺炎克雷伯氏菌。

热应激对鸡肠道屏障的影响及损伤机制研究进展

热应激通过上调皮质醇激素,升高血清内毒素含量,上调肠道内炎症、氧化、凋亡水平增加肠道通透性,最终引发机体系统性炎症反应综合征(SIRS)、多器官功能障碍(MODS),给养殖业造成损失。近年来全球温度持续上升,热应激造成的畜牧业损失引起广泛关注。本文总结了热应激影响鸡生产性能、肠道形态结构、肠道屏障功能(包括炎症反应、氧化应激、凋亡水平)的相关研究及机制,旨在为防治家禽高温应激提供理论参考。

山羊鲍曼不动杆菌分离鉴定及16SrRNA系统发育分析

2013年初,山东潍坊某羊场的羊群发病,从发病羊器官分离到2株病原细菌。对病原细菌进行鉴定,并对其与已知同种异源菌株相似性差异进行分析。对分离的菌株经形态特征、培养特性、生化试验及致病性试验进行鉴定,再通过设计通用引物扩增分离菌株16S rRNA基因,测序后进行序列比较和系统发育分析。结果显示:分离菌株为鲍曼不动杆菌,耐药性强,仅对舒巴坦和强力霉素敏感,对小白鼠具有较强致病作用,2株分离菌株核苷酸序列之间同源性为100%,与GenBank中收录的NC009085株(人源)鲍曼不动杆菌标准菌株核苷酸序列同源性为100%,与绵羊源、牛源、鹅源鲍曼不动杆菌参考菌株核苷酸序列同源性分别为100%、99.9%、99.9%。可见该分离株与人源、绵羊源、牛源和鹅源鲍曼不动杆菌的亲缘关系较近,可能为人畜共患病病原体。

H9亚型禽流感SPF鸡发病模型的构建

为了构建理想的H9亚型禽流感病毒(AIV)SPF鸡发病模型,对不同日龄SPF鸡、不同感染方法进行了预试验,最后选用SPF青年蛋鸡为试验动物,采用AIV H9N2毒株与大肠杆菌强毒株、IBV M41株各0.5 mL联合滴鼻感染的方法,进行了发病模型构建。结果表明,试验鸡发病症状明显、病变典型,这为进一步完成H9亚型禽流感防治药物的临床疗效评价奠定了基础。

防治鸡大肠杆菌病复方中药口服液的筛选

为探究复方中药对鸡大肠杆菌病的防治效果,依据清热燥湿止痢、清热泻火健脾止痢、清热燥湿凉血止痢和清热泻火凉血止痢的原则自拟4个组方,同时用清热解毒、凉血止痢的白头翁汤作为阳性药物,煎煮法获得药液,分别进行了体外、体内抗菌效果的试验。根据鸡群感染大肠杆菌后的死亡时间、肝周炎和心包炎率等指标评价其对大肠杆菌病的预防和治疗效果。结果表明,四个组方体内外对大肠杆菌均具有一定的抑制作用,其中清热泻火凉血止痢与清热燥湿凉血止痢组方的体外抑菌效果较好;清热泻火凉血止痢组方的预防效果最好,清热燥湿凉血止痢和清热泻火凉血止痢的治疗效果均较好。综合以上结果,以生石膏、千里光等为主要成分的清热泻火凉血止痢方剂具有较好的降低体温和防治鸡大肠杆菌病的效果,可在临床生产中使用。

清营颗粒对大鼠的急性毒性研究

为探究清营颗粒的急性毒性效应,选用SD大鼠为研究对象,采用限量法进行试验,经口单次给予雌雄各10只SD大鼠受试品清营颗粒,给药剂量为30 g/kg体重,然后分别于染毒前0 d、染毒后1、2、7、14 d测定大鼠体重,并连续14 d进行详细临床观察。观察期结束后,对大鼠进行大体剖检。雌雄大鼠在给予30 g/kg体重剂量的清营颗粒后,精神状态良好,采食、大小便及体重增长正常,直至试验结束时无异常临床症状出现。雄性大鼠在给药1、2、7、14d后,体重持续增长;仅有4只雌性大鼠在给药1 d或2 d后体重降低,其他雌性大鼠体重持续增长。剖检结果显示,无肉眼可见病变。综上所述,清营颗粒对雌性和雄性SD大鼠的经口急性毒性耐受剂量大于30 g/kg体重。根据化学物急性毒性(LD_(50))剂量分级标准依据,表明清营颗粒无毒。

中医药通过调控自噬治疗结直肠癌的研究进展

结直肠癌是一种以高发病率与高死亡率为特征的消化系统肿瘤,目前各种治疗方法效果欠佳,仍需进行机制研究以开发新的治疗策略。自噬是一种受多靶点、多通路调控,涉及真核细胞成分降解的细胞保守监视机制,其在抑制结直肠癌发生发展方面的潜在应用价值愈来愈受到研究者的关注,是探索结直肠癌防治最广泛的研究热点之一。中医药具有多靶点、多通路治疗疾病的优势,近些年研究显示中医药无论是在通过调控自噬相关靶点、通路治疗结直肠癌的直接作用方面,还是通过调控自噬增加结直肠癌化疗敏感性的间接作用方面都可以发挥较好作用。本文旨在对近几年中医药通过调控自噬治疗结直肠癌的研究成果进行综述,以期为未来开发中医药治疗结直肠癌的新型治疗策略提供参考。

规模化羊场山羊痘病毒的分离鉴定及其P32基因的分析

山东某山羊养殖场出现一种以全身皮肤出现痘疹为典型特征的接触性、热性传染病,根据临床症状疑似为羊痘。将待检病料接种到单层Vero细胞上培养,传代9次后方出现明显病变,接种鸡胚3代后在绒毛尿囊膜上出现明显痘斑,用电子显微镜观察绒毛尿囊膜超薄切片可见成熟的病毒粒子,确诊为山羊痘病毒。提取病毒DNA并参照GenBank上山羊痘病毒P32基因序列设计一对引物,成功扩增出一条995 bp的特异性DNA条带,测序后进行序列分析,山羊痘山东分离株与GenBank已发表的四株病毒P32基因的同源性在99.5%以上。

用Fuzzy相关分析的综合决策模型预报小麦条锈病流行程度

本文为了探讨小麦条锈病流行程度与预报要素的相互关系,改变了以往多元回归等繁琐方法,而采用Fuzzy相关分析的研究方法,取得很好的效果。结果表明,经对天水市1979年至1987年9年的资料进行运算,建立了综合决策模型,对9年的小麦条锈病流行程度进行了回测,历史符合率100％,并对1988年的状况进行验证,预报值与实况完全相吻合。

天水市辣椒疫病综防初报

前言辣椒是我市主要商品菜之一,种植面积大,产量高。自1985年以来,由于辣椒疫病连年发生,致使产量下降,品质变低。危害程度逐年加重。1988年仅甘谷县盘安乡谢家坪村700亩线椒,死亡面积90％,重发生地块,全田枯死绝收。北道区社棠乡社棠、绵竹二村,大棚羊角椒死亡面积高达92.1％,在天水市辣椒主产区该病已成为毁灭性病害,严重威胁着辣椒生产,影响对外贸易和人民生活。为防病增产,作者从1987年开始,在病情调查的同时,首先进行了43％瑞毒铜、68％瑞毒铝铜、98％硫酸铜等杀虫剂防治。

山羊鲍曼不动杆菌分离鉴定和病原性研究

为鉴定2013年初造成山东潍坊某羊场羊群发病的病原,本研究从患病山羊器官中分离到2株致病细菌,对分离的菌株经形态特征、生化试验及致病性试验进行鉴定,并通过分离菌株16S rRNA基因序列比较和系统发育分析。鉴定结果表明分离株为鲍曼不动杆菌;此外,16S rRNA基因同源性比对分析显示2株分离菌株核苷酸序列之间同源性为100%,与参考菌株NC009085株(人源)鲍曼不动杆菌标准菌株核苷酸序列同源性为100%,与绵羊源、牛源、鹅源鲍曼不动杆菌参考菌株核苷酸序列同源性分别为100%,99.9%,99.9%;耐药性结果显示其仅对舒巴坦和强力霉素敏感,致病性试验结果显示其对小鼠具有较强的致病作用。该分离株与人源、绵羊源、牛源和鹅源鲍曼不动杆菌的亲缘关系较近,可能为人畜共患病病原菌。

山羊奇异变形杆菌分离鉴定及其16S-23SrRNAISR序列RFLP分析

2012年初,山东菏泽某羊场的羊群发病,从发病羊器官分离到2株病原细菌。对病原细菌进行鉴定,并对其与已知同种异源菌株相似性差异进行分析。从患病山羊内脏器官分离细菌,经形态特征、培养特性、生化试验、血清学试验及致病性试验进行鉴定;再通过设计通用引物扩增16S-23SrRNA ISR(intergenic spacer region)序列,将PCR产物经HinfⅠ单酶切获得3条可视条带,同时对扩增条带中的主带测序并进行系统发育分析。结果表明,分离菌株为奇异变形杆菌;分离菌株同本实验室保存的兔源与鸡源奇异变形杆菌PCR-RFLP结果一致;分离菌株PCR产物同GenBank收录的HI4320株奇异变形杆菌及本实验室保存的兔源与鸡源奇异变形杆菌进行序列比较,分离羊源菌株与兔源菌株相似性为94.8%、与鸡源菌株相似性为96.0%～98.2%,与人源HI4320株相似性为96.9%。研究证实发病羊致病病原为奇异变形杆菌,其与鸡源、兔源和人源奇异变形杆菌的亲缘关系较近。

陇南小麦条锈病的流行规律及其控制策略研究

１９８６～１９９４年，以天水为基点对陇南小麦条锈病的流行规律开展了进一步研究，明确了：１）病菌越夏有直接和间接两种方式。海拔１７００ｍ以上的高山区为病菌的主要越夏基地，夏季降雨和温度是影响病菌越夏的最重要因素。２）当地越夏菌源为秋苗发病的主要菌源来源，菌源量、播期和降雨为影响秋苗发病的主要因素。３）首次证明，陇南秋季菌源量大时，可直接传入关中并引致较大流行。４）半山区为病菌的主要越冬基地。５）春季病菌先在半山发展，后向全区和西部麦区传播。并根据上述流行规律提出了控制策略建议。

天水地区小麦条锈病流行规律研究简报

本文报道了天水地区小麦条锈菌的越夏越冬高度和主要地区范围,因降雨(雪)多少和温度高低的变化情况,以及秋、春季的发生发展规律,并且首次证明,天水地区小麦条锈菌的秋季菌源可随风传入关中,成为关中秋季发病的主要菌源。此外,还提出了防治策略。

白虎定喘口服液的质量检测

为了建立白虎定喘口服液的质量检测标准,采用薄层色谱法(TLC)对处方中金银花、黄芩、知母、板蓝根进行鉴别;采用高效液相色谱法(HPLC)对黄芩中有效成分黄芩苷进行含量测定。结果表明,薄层色谱斑点清晰,分离度好,特异性强;在0.103mg/mL^0.824mg/mL范围内黄芩苷浓度与峰面积呈良好的线性关系,阴性对照无干扰,加样回收率平均为97.98%,精密度试验RSD为0.61%。说明建立的检测方法简便、准确、专属性强、重复性好,可对白虎定喘口服液的质量进行有效检测。

沉积岩系互稀释混合元素丰度关系

二元混合成国岩石元素丰度（ｘ，ｙ）遵守分式线性函数定律：式中ａ，ｂ，ｃ，ｄ为丰度关系常数，它们只和岩系中两个已知岩石（１和２）中元素丰度（ｘ１，ｙ１；ｘ２，ｙ２）有关，并等于其镜像∑变换（混合变换）（ａ，ｂ，ｃ，ｄ）＝∑∑｜ｘ１，ｙ１；ｘ２，ｙ２｜（２）元素丰度关系常数中，如果ｂ与Ｃ之比值小于零时，元素丰度ｙ＝Ｘ呈互稀释混合关系。

银翘散抗禽流感病毒体外抑制试验

为测定银翘散对禽流感病毒(AIV)的抑制作用,将不同浓度的银翘散煎煮液分别与H9、H5亚型AIV在体外混合作用30 min后,接种SPF鸡胚,测定鸡胚的死亡率及尿囊液中AIV的血凝价,并采用RTPCR法对1 g/mL试验组鸡胚进行H9N2病毒检测。结果表明,药物浓度在0.2500 g/mL及以上时,H9N2试验组鸡胚存活率为100%,病毒血凝价为零,药物浓度为1 g/mL时,RT-PCR检测无目的条带出现;药物浓度在0.5000 g/mL及以上时,H5N1试验组鸡胚存活率为100%,病毒血凝价为零。因此,银翘散煎煮液在体外对禽流感病毒具有明显的抑制作用。

五味子、百部提取物消除耐环丙沙星大肠杆菌耐药性的研究

采用影印培养法,以浓度为1/2MIC的五味子水煎液、五味子醇提物、百部水煎液、百部醇提物对耐环丙沙星大肠杆菌作用24 h,观察作用前后大肠杆菌对环丙沙星的耐药性变化。结果表明:五味子水煎液、五味子醇提物、百部水煎液、百部醇提物对临床分离耐药菌株均无明显耐药性消除作用,五味子水煎液、五味子醇提物对人工诱导耐药菌株有一定的耐药消除作用。

五味子水提物抑菌活性的研究

采用水煎法制备五味子水提物(SCD),通过SCD的最小抑菌浓度、最小杀菌浓度检测和纸片扩散抑制试验评估SCD的体外抑菌活性,通过SCD对雏鸡感染大肠杆菌的治疗试验评估SCD的体内抑菌活性。结果显示,SCD对6株标准株和6株大肠杆菌分离株均具有显著的抑菌活性。SCD对雏鸡感染大肠杆菌的治疗试验结果显示,口服SCD可以显著降低感染大肠杆菌雏鸡的死亡率。这表明SCD具有良好的抑菌活性,且对环丙沙星耐药的大肠杆菌均有效,可以作为治疗细菌性疾病的备选药物。