Coq4基因全敲除小鼠胚胎发育的表型分析

目的:通过分析辅酶Q生物合成蛋白4同系物(coenzyme Q biosynthesis protein 4 homolog,COQ4)的编码基因Coq4敲除(Coq4^(-/-))小鼠表型,探讨Coq4在小鼠胚胎发育中的作用。方法:引进Coq4基因全身杂合(Coq4^(+/-))小鼠模型,利用基因组PCR鉴定小鼠基因型。观察并记录Coq4^(+/-)小鼠后代出生情况;通过解剖、组织学和免疫荧光法,观察野生型(wild type,WT)和Coq4^(-/-)胚胎和胎盘组织的形态结构。结果:Coq4^(-/-)小鼠在胚胎日(embryonic day,E)7.5 d(E7.5)出现原肠胚形成障碍,于E10.5死亡。组织形态分析显示,与WT相比,Coq4^(-/-)小鼠胚胎发育严重迟缓,胎盘结构缺陷。免疫荧光染色分析发现,Coq4^(-/-)小鼠胎盘滋养层细胞侵袭能力减弱。结论:Coq4基因敲除导致小鼠发生胎盘缺陷和原肠胚形成障碍,Coq4为小鼠胚胎发育所必需的基因。

杨虎城将军的欧美之行

1936年12月12日,国民党内部主张抗日的爱国将领——张学良、杨虎城两将军,为坚决反对蒋介石“攘外必先安内”的反动政策,怀着善良的愿望和自我牺牲的精神,以惊险的手段,捉蒋放蒋,联合发动了震惊中外的西安事变。蒋介石在全人民抗日怒潮压力下。

心脏发育过程中的信号调控机制研究

我国是出生缺陷高发国家,其中先天性心脏病在各类出生缺陷中居于首位,严重地影响我国的人口素质[1]。同样,后天性心脏血管疾病(心血管疾病)也是影响国民健康和社会发展的主要疾病[2]。近年来研究表明,所谓"后天性"心脏血管疾病虽然大多不在胚胎期表现出功能异常,但遗传因素在发病过程中也起关键作用,因此,"后天性"心血管疾病也有其发育生物学基础。在一些心血管疾病中,胚胎发育基因如ANF和β-MHC的表达说明胚胎发育的某些机制参与了发病过程。由于出生缺陷和心血管疾病的防治是我国公共卫生和社会发展中亟待解决的重大健康问题,了解心血管系统正常发生发育规律和机制及发病机理并在此基础上建立新的防治策略和防治措施是生命科学需要解决的重大基础科学问题[1-2]。本文主要综述了目前模式动物,特别是小鼠心脏发育过程中的信号传导调控机制的研究现状及进展。

Akt基因多态性与先天性心脏病发病关系的研究

目的分析先天性心脏病（CHD）患儿外周血中Akt1及Akt2基因的第1～4个外显子（编码PH结构域）的突变情况，探讨Akt1及Akt2基因与CHD发病之间的关系。方法应用PCR—DNA测序技术在18例先天性心脏病患儿外周血中筛查Akt1及Akt2基因PH结构域的突变情况。结果18例样本中，未见Akt1以及Akt2编码区的突变，但在Akt1内含子部分筛查到5个单核苷酸多态性（SNPs）位点，其中有2个未被报道过。Western blot技术分析显示，部分样本Akt1的蛋白表达水平降低。结论Akt1基因SNPs可能与CHD的发病有关，AKT基因与CHD发病之间的关系有待进一步证实。

小鼠海马区PDK1基因敲除对海马依赖的学习记忆功能的影响

目的:探索3-磷酸肌醇依赖的蛋白激酶-1(3-phosphoinositide-dependent protein kinase-1,PDK1)在海马依赖的学习记忆中的作用。方法:采用Cre/Loxp系统条件性敲除了表达在背侧端脑中Emx1(empty spiracles homeobox 1)阳性神经细胞中的PDK1,利用聚合酶链式反应及行为学实验Morris水迷宫对PDK1敲除小鼠进行研究。结果:该系统确实能敲除海马中的PDK1,且敲除后的小鼠学习记忆能力明显下降。结论:PDK1敲除后影响了小鼠的学习记忆能力,PDK1在海马介导的学习记忆过程中有重要作用。

于右任诗词的时代精神

于右任先生一生做诗、填词从未间断,写下了千余首爱国诗篇。于右任的白话诗,不仅通俗易懂、朗朗上口,而且寓意深刻,深受广大群众的欢迎。于右任学识渊博,笔力雄健,诗词歌赋博大精深,充满着忧国忧民的情怀。

小鼠胚胎房室管内皮细胞EMT体外研究方法的改良

目的:对小鼠胚胎房室通道内皮细胞向间充质细胞转化(epithelial-mesenchymal transdifferentiation,EMT)体外研究方法的改良。方法:根据小鼠胚胎房室管内皮细胞EMT体外胶原凝胶实验方法进行改良,去胚胎时以37℃的1×M199培养基代替冰PBS,培养液中加入了ITS。结果:显微镜下观察培养8h内皮细胞贴着胶原表面生长;48h后,爬出的间充质细胞数量和爬行的距离达到顶峰;细胞PECAM-1阳性信号的细胞与SMA阳性信号的细胞没有共定位;爬入胶原的细胞数量比率平均达(95.7±1.4)%。结论:本方法介绍的小鼠胚胎房室通道EMT体外研究方法,是很理想的体外实验的模型,可以满足各种心脏瓣膜发育实验研究的要求,为先天性心脏病的研究提供有力的实验平台。

Wntless/GPR177对小鼠原肠发生和心脏发育至关重要（英文）

小鼠早期胚胎发育包含原肠运动和器官发生等重要发育过程,这些过程受多种信号通路调控,其中有Wnt、BMP、Nodal、FGF等信号通路,它们之间进行精细严密的协调,保证胚胎发育的正确进行。β-联蛋白作为Wnt配体的共同下游信号分子,在小鼠原肠运动和器官发生中发挥至关重要的作用。Wntless/GPR177在以前的研究中已被报道参与调节Wnt配体的成熟、分选和分泌等,小鼠全身剔除Wntless(Wls)将严重影响胚胎体轴形成。在该研究中,Wls被特异性地在上胚层、心血管中胚层和心肌祖细胞中剔除,以探索Wls如何参与到小鼠原肠运动和心血管发育中。我们发现,在上胚层剔除Wls后,明显阻断了上皮-间充质转化过程,这是中胚层迁移中的关键步骤。在Wls条件性剔除的上胚层中,β-联蛋白表达模式发生变化,表达水平明显下降;E-钙黏着蛋白和N-钙黏着蛋白明显上升。此外,被剔除Wls的上胚层中,细胞凋亡明显增加。不论是在心脏中胚层还是在心脏前体细胞中,剔除Wls都导致严重的心血管发育缺陷和胚胎死亡,证明Wls对心脏发育同样十分重要。这些研究结果证明,Wntless在小鼠原肠运动和心脏发育中均发挥十分重要的作用。

Ras/Raf/MAPK信号通路与先天性心脏病发生学的研究进展

Ras/Raf/MAPK信号通路参与调控一系列重要的细胞活动,在细胞生长、发育、增殖、分化以及细胞间功能同步及细胞恶性转化等多种生理、病理过程中起重要作用。该通路成员的体细胞突变将会引起肿瘤的发生;生殖细胞突变将会影响胚胎发育过程,从而引起一系列先天性心脏病的发生,例如努南综合征等。

TANGO2全身敲除小鼠在生理条件下正常发育和繁殖

目的:利用运输和高尔基体组织蛋白2同系物(transport and Golgi organization protein 2 homolog,TANGO2)敲除小鼠阐明TANGO2在哺乳动物中的生理功能,探究TANGO2是否是导致DiGeorge综合征发生的候选基因。方法:制备TANGO2敲除小鼠模型,通过实时荧光定量PCR检测该小鼠模型的基因敲除效率。观察并记录野生型、杂合和纯合敲除小鼠的表型和生长繁育情况。通过组织解剖和组织学分析,观察野生型和敲除小鼠的心脏和大脑组织的形态结构。结果:TANGO2 mRNA在野生型小鼠的心脏和大脑中表达,而在敲除小鼠相应组织中的表达水平显著降低。TANGO2敲除小鼠发育正常,能够存活和繁殖,没有明显的表型异常。与野生型同窝仔相比,生存率没有显著差异。组织形态分析显示,新生敲除小鼠和6月龄敲除小鼠的心脏和大脑与野生型之间无明显差异。结论:TANGO2敲除小鼠能够正常发育和繁殖,并且缺乏人类中TANGO2相关疾病或DiGeorge综合征的相关表型。

金纳米簇的制备、表征及对玉米种子萌发的影响

选用模式植物玉米为研究材料,初步评估了金纳米簇在植物中的安全性.结果表明：金纳米簇对玉米种子发芽率没有影响,50~400mg/L的金纳米簇能够促进发芽期间玉米幼苗根和芽的生长.通过切片观察了金纳米簇在玉米幼苗细胞和组织中的吸收情况,发现金纳米簇能够进入玉米根尖脱落细胞以及根部皮层细胞.另外,通过电感耦合等离子体原子发射光谱（ICPAES）测定了金纳米簇在玉米幼苗中的吸收量,证实了金纳米簇未从玉米根部向地上运输.

果蝇生长发育中PI3K/Akt/dTOR信号通路的研究进展

果蝇雷帕霉素靶蛋白(dTOR)是哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在果蝇中的同源物。PI3K/Akt/dTOR信号通路在果蝇的细胞存活、生长及增殖中都具有重要的作用。研究dTOR途径在果蝇生长发育中的作用可为了解哺乳动物发育过程中涉及的信号通路机制提供依据。现就近年来关于PI3K/Akt/dTOR信号通路及其中信号成分在果蝇发育中调节作用的研究作一综述,并展望深入研究dTOR信号通路机制的意义。

WDR1与小鼠精神分裂样阴性症状呈正相关性

目的探讨海马CA1区条件性敲除WDR1与小鼠精神分裂样阴性症状的关系,并进一步分析其潜在神经机制。方法利用分子生物学手段,构建海马CA1区的WDR1条件性敲除小鼠[CA1-Cre;WDR1flox/flox(CKO)],结合做窝行为学手段、免疫荧光等实验方法观察分析CA1区WDR1在精神分裂样阴性症状中的作用。结果 (1)脑片免疫荧光的结果显示WDR1在CKO小鼠中敲除成功;(2)做窝实验结果显示:WDR1 CKO小鼠做窝质量明显高于WDR1flox/flox小鼠(WT组);(3)培养海马神经元,免疫荧光染色法显示,CKO小鼠的树突棘密度明显增加。结论实验结果表明敲除WDR1能够增加海马CA1区神经元的树突棘,并提高小鼠做窝能力,提示WDR1与小鼠精神分裂样阴性症状呈正相关。

PDK_(1)调控小鼠心脏流出道发育形成并协同Nkx_(2.5)调节房室轴形成的作用

目的观察磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1(PDK_(1))在调控小鼠心脏流出道(OFT)发育和协同Nkx_(2.5)调控小鼠心脏房室轴(AVC)发育中的作用。方法用PDK_(1)^(F/F)小鼠与Nkx_(2.5)-cre小鼠进行交配,在第二代子代中获得PDK_(1)^(+/+)、PDK_(1)^(F/+)和PDK_(1)^(F/F)三种基因型小鼠,每种基因型Nkx_(2.5)-cre为阳性或阴性。用PCR对小鼠基因型进行鉴定后,对小鼠心脏表型进行分析,先在显微镜下观察心脏大体外观并拍照,然后制作成石蜡切片,HE染色后,显微镜下观察微细结构。结果各小鼠均能存活到出生,对照小鼠PDK^(1)^(F/F)显示正常的心脏结构,PDK_(1)^(F/F),Nkx_(2.5)-Cre小鼠,心脏组织中的PDK_(1)全部被敲除,心脏表现为明显的肺动脉狭窄,表型包括管腔狭窄、肺动脉瓣不分割和肺动脉瘤等。在一例PDK_(1)^(+/+)小鼠中,心脏只观察到三个腔室,两个心房和一个心室,且没有AVC轴发育将三个腔分开。在另一例PDK_(1)^(F/+),Nkx_(2.5)-Cre小鼠中,心脏观察到四个腔室,两个心房和两个心室,也没有AVC轴发育将四个腔分开,且OFT没有发育成主动脉干和肺动脉干。考虑到Nkx_(2.5)-cre小鼠是Cre knock-in小鼠,其中一个等位基因因敲入了cre遭到破坏,即使PDK_(1)没有完全敲除,也可能因为Nkx_(2.5)遭到破坏而出现心脏发育缺陷。结论PDK1是调控心脏OFT发育的重要因子,PDK1可能联合Nkx_(2.5)调控心脏OFT、AVC轴的发育形成。

珠海地区超深入岩地连墙成槽施工技术

珠海市区至珠海机场城际轨道湾仔北站为深基坑工程,围护结构采用地下连续墙,深度达54.1m,底部嵌入弱风化花岗岩至少2m,因地质起伏变化较大,入岩深度最大达18m。文中结合该工程,阐述超深地下连续墙关键施工技术。上部软土地层采用成槽机施工,下部硬岩段采用冲击钻施工,冲抓结合解决超深地下连续墙入岩成槽问题;同时改进常规地连墙入岩成槽技术,采用气动潜孔锤预先引孔的方式提高冲击成槽效率。

三十八军在郑州地区抗战纪实

抗日战争的相持阶段,国民革命军三十八军在郑州地区阻击日本侵略军南侵。这支部队的前身是陕西靖国军第三路军第一支队。是杨虎城将军亲自创建的国民革命军十七路军。这是发动西安事变的主力部队之一。西安事变后,国民政府撤销十七路军总部,所属部队缩编为三十八军,下辖十七师(师长赵寿山)、一七七师(师长李兴中)及陕西警备一旅(旅长孔从洲)、三旅(旅长王镇华)。抗日战争开始后,杨虎城将军被蒋介石秘密囚禁。

温县鸡传染性法氏囊病

今年四月份以来,鸡传染性法氏囊炎在我县爆发流行,本病发病率高,死亡快,给我县养鸡业带来了严重的损失。尤其是专业户,其经济损失更为惨重。为了摸清本病在我县的流行情况,危害程度,以便采取有效防治措施,我站技术人员于6月18～20日,对本病进行了调查。

新编农村安全用电宣传口号

1、安全用电要牢记,时刻注意莫放松; 用电知识常学习,规章制度要记清。2、用电之前先申请,私拉乱接患无穷; 不懂电器莫装懂,胡乱摆弄事故生。3、安装工艺必须精,验收合格方运行; 发现隐患莫使用,安装修理找电工。4、电业法规是准绳,遵章作业保安宁; 电是商品要分清,偷电窃电法不容。5、保护开关户户用,灵敏可靠保运行; 发现故障快排除,不准私自退运行。6、架空线路按规程,少占农田便机耕; 导线硬弯剪断接,不合要求不准用。

毛泽东和杨虎城之间的秘密使者

在陕北富县毛泽东 交给汪锋三封密信 1935年11月下旬的一天,陕北根据地,雪后天睛,空气格外清新。王首道来到汪锋住的窑洞,要他立即到前线总指挥部接受新任务。汪锋是陕西兰田县人,大革命失败后参加了刘志丹领导的渭华暴动,曾担任过红二十六军政委。 红军前线总指挥部驻扎在陕北富县西边退套塬东村。村东有一排五孔土窑洞。南面三孔窑住着毛泽东、周恩来,北面住的是前总政治部主任杨尚昆。杨尚昆先安排汪锋住下,并对汪锋说:“你是主席调来的,工作由主席给你当面指示,你先好好休息。”

小鼠急性心肌梗死模型建立及左心室重构评价

目的探讨小鼠急性心肌梗死模型建立及左心室重构评价。方法取40只C57B/L6雄性小鼠,30只结扎冠状动脉(冠脉)左前降支,建立急性心肌梗死模型(A组),10只予假手术为对照(B组)。术前1d和术后4周心脏超声评价左心室舒张末内径(LVEDD)和左室射血分数(LVEF)。术后4周测量小鼠心脏重量/体重(HW/BW)比值,取心脏标本做Masson染色测量梗死纤维化面积,WGA染色测量小鼠心肌细胞横截面积。结果 A组心肌梗死模型建立成功率为73.3%(22/30)。A组小鼠术后4周LVEDD、心肌细胞横截面积和HW/BW比值均大于B组[(4.45±0.57)mm vs.(3.44±0.36)mm、(746.60±74.48)μm2 vs.(296.20±37.21)μm2和0.0065±0.0010vs.0.0054±0.0004](P<0.05)。A组小鼠术后4周LVEF低于B组[(46.95±6.72)%vs.(73.79±6.56)%](P<0.05)。A组平均梗死后纤维化面积为(48±11)%。结论采用结扎冠脉前降支可成功建立小鼠急性心肌梗死模型。LVEDD、LVEF HW/BW比值等可用于综合评价梗死后心肌重构程度。