KLF8在人早孕绒毛组织中的表达及其意义

目的:通过检测正常孕妇早孕期绒毛组织中双向转录因子Krüppel-like factor 8(KLF8)的定位及表达,探讨其在早孕期滋养细胞侵袭中的作用。方法:选择2012年3月至2012年6月在重庆医科大学附属第一医院门诊孕6～11周进行选择性流产的22例正常孕妇为研究对象,取绒毛组织标本,采用免疫组化SP法检测各组孕妇绒毛组织中KLF8蛋白的定位,实时荧光定量PCR技术检测各组孕妇绒毛组织中KLF8 mRNA表达水平,采用蛋白印迹法检测各组孕妇绒毛组织中KLF8、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)蛋白的表达水平。结果:(1)正常孕6～11周绒毛组织中均有KLF8蛋白表达,主要定位于绒毛组织滋养层中的细胞滋养细胞和合体滋养细胞。(2)KLF8 mRNA随妊娠周数增加而逐渐升高,并在孕8～10周达到高峰(孕8周最高),而后急剧降低。(3)正常早孕绒毛组织中KLF8、MMP-9蛋白表达水平同样随妊娠周数增加而逐渐升高,并在孕8～10周达到最高峰(孕9周最高),而后逐渐降低。(4)正常早孕绒毛组织中KLF8蛋白及MMP-9蛋白表达呈正相关关系,相关系数r为0.66(P<0.001)。结论:KLF8在正常早孕组织中定位于滋养层细胞尤其是与侵袭密切相关的细胞滋养细胞中,且表达变化与MMP-9蛋白水平以及滋养细胞浸润能力相吻合,提示KLF8可能参与胚胎植入及胎盘形成过程中滋养细胞浸润活性调控。

绒毛膜羊膜炎与产前糖皮质激素双重暴露对早产大鼠胎肺成熟与发育的影响

目的:探讨不同程度绒毛膜羊膜炎(chorioamnionitis,CA)与产前糖皮质激素双重暴露对早产大鼠胎肺成熟及远期肺发育的影响。方法:36只SD孕鼠随机分6组:生理盐水+地塞米松(A组)、脂多糖0.5μg+地塞米松(B组)、脂多糖4.0μg+地塞米松(C组)、生理盐水+生理盐水(D组)、脂多糖0.5μg+生理盐水(E组)、脂多糖4.0μg+生理盐水(F组)。孕19 d时每组每个羊膜腔内分别注射生理盐水、脂多糖0.5、4.0μg,24 h后分别肌注地塞米松0.4 mg和生理盐水。再24 h后剖宫取胎,胎盘、胎膜行病检,每组随机处死6只新生鼠,胎肺行病检。实时荧光定量PCR测肺组织表面活性蛋白(surfactant protein,SP)A、B、C及炎性细胞因子白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的mRNA相对水平。生后第15天(P15)肺组织切片做形态学观察。结果:(1)C、F组胎鼠死亡率高于其他组而子鼠生存率低于其他组(P均<0.05)。(2)肺炎和CA病理评分C、F组最高,B、E组次之,A、D组最低(P均<0.05)。(3)SP-A、SP-C mRNAs相对表达水平D、F组低于其余4组而B组最高(P均<0.05);SP-B mRNA表达水平D、E、F组低于其余3组而B、C组最高(P均<0.05)。(4)IL-1βmRNA表达水平在F组最高(P<0.05);TNF-αmRNA表达水平在C、F组最高,A、D组最低(P均<0.05)。(5)P15时C组肺泡发育明显受抑。结论:孕鼠羊膜腔内注射不同剂量脂多糖可诱导不同程度的CA和肺炎,组织学炎症程度随脂多糖剂量增高而加重;轻中度CA和产前地塞米松双重暴露不会对围产期母子生存率造成不利影响,不会抑制胎儿和新生儿生长,炎症不被抑制反而协同诱导更显著的肺成熟;重度CA和产前地塞米松双重暴露会带来不利影响,尤其是增加支气管肺发育不良风险。

可吸收防粘连膜及宫腔支撑球囊联合应用在中重度宫腔粘连术后的治疗效果观察

目的探讨可吸收防粘连膜及宫腔支撑球囊联合应用在中重度宫腔粘连的治疗效果。方法 2016年1~12月四川省人民医院收治的49例中重度宫腔粘连患者,均行宫腔镜下宫腔粘连分离术(TCRA),术中根据中国宫腔粘连诊断分级评分标准进行评分,术后用雌孕激素疗法3个周期(戊酸雌二醇4 mg/d共21天,后10天加用地屈孕酮10 mg bid)。根据术后处理方法分成3组:A组(14例)放置防粘连膜;B组(14例)放置宫腔支撑球囊及防粘连膜;C组(21例)放置宫腔支撑球囊。术后3个月均行二次宫腔镜探查,根据中国宫腔粘连诊断分级评分标准再次进行评分。结果 3个月后复查宫腔镜,三组患者宫腔镜粘连评分比较差异有统计学意义(P<0.01),B组(防粘连膜+宫腔支撑球囊)效果最佳。三组患者术后子宫内膜厚度及月经量均有明显改善(P<0.01)。结论 TCRA术后同时放置防粘连膜及宫腔支撑球囊在中重度宫腔粘连的预防术后复粘方面有较好的效果。

胎盘组织中KLF-8和MMP-9的表达及其与子痫前期发病的关系

目的探讨胎盘组织中Krtippel样因子8（KLF-8）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）的表达及其与子痫前期发病的关系。方法选择2011年9月至2012年3月重庆医科大学附属第一医院以剖宫产术分娩的子痫前期孕妇22例（轻度4例、重度18例）为子痫前期组，同期孕足月行择期剖宫产术分娩的20例健康孕妇为对照组。免疫组化sP法检测胎盘组织中KLF-8蛋白的表达部位，实时荧光定量PCR技术检测胎盘组织中KLF-8mRNA的表达水平，蛋白印迹法检测胎盘组织中KLF_8及MMP-9蛋白的表达水平。结果（1）子痫前期组和对照组胎盘组织中均有KLF-8蛋白表达并主要表达于合体滋养细胞的胞核及胞质中，与对照组比较，子痫前期组胎盘组织中KLF-8蛋白阳性染色程度较弱。（2）子痫前期组胎盘组织中KLF．8mRNA表达水平为0．69±0．08，对照组为1．14±0．09。两组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。（3）子痫前期组KLF-8及MMP-9的蛋白表达水平分别为0．684-0．05及0．21±0．03，对照组分别为0．94±0．06、0．34±0．03，两组分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。（4）合计分析两组孕妇的胎盘组织中KLF-8蛋白与MMP-9蛋白的表达呈正相关关系（r=0．64，P〈0．01）。结论子痫前期孕妇胎盘组织中KLF-8mRNA和蛋白表达水平均明显低于健康孕妇，主要表达于与细胞侵袭密切相关的滋养细胞中，且KLF-8蛋白表达与MMP-9蛋白呈正相关。提示KLF-8可能通过影响滋养细胞侵袭力而参与子痫前期的发病。

孕鼠羊膜囊内注射脂多糖诱导组织学绒毛膜羊膜炎对早产大鼠胎肺成熟与发育的影响

目的 在妊娠晚期利用不同剂量脂多糖羊膜囊内注射建立孕鼠组织学绒毛膜羊膜炎（histologic chorioamnionitis,HCA）模型,探讨HCA炎症强度对早产大鼠胎肺成熟及发育的影响. 方法 30只Sprague Dawley孕鼠完全随机分为4组.妊娠19d时各组单个羊膜囊内分别注射脂多糖2、8、10 μg（每组8只）和生理盐水（对照组6只）,均为40μl.给药后48 h剖宫取胎.收集胎盘、胎膜、脐带和胎肺等组织行病理检查.实时荧光定量聚合酶链反应测定胎肺组织表面活性蛋白（surfactant protein,SP）A、B、C及角质细胞生长因子（keratinocyte growth factor,KGF）的mRNAs相对表达量.免疫组织化学法测定KGF蛋白表达.收集新生鼠肺组织,行形态学观察.采用R×C表卡方检验、Kruskal-Wallis检验和方差分析进行统计学分析. 结果 （1）对照组与脂多糖2、8和10 μg组的胎鼠死亡率分别为0.0％（0/55）、22.5％（18/80）、51.4％（36/70）和87.5％（35/40）,胎鼠死亡率随脂多糖剂量增加而升高（x2=46.183,P＜0.005）.（2）脂多糖组均能诱导HCA、肺炎及脐血管炎,且组织学炎症程度随脂多糖剂量增高而加重（肺炎：Hc=39.84;HCA：Hc=41.13;脐血管炎：Hc=41.52;P均＜0.01）.（3）4组（依次指对照组及脂多糖2、8和10 μg组）SP-A、SP-B、SP-C和KGF mRNA的相对表达量比较,差异均有统计学意义[SP-A mRNA：0.99±0.28、2.48±0.34、1.09±0.31和0.09±0.09,F=78.051;SP-B mRNA：0.99±0.34、2.23±0.53、1.49±0.51和0.14±0.06,F=28.327; SP-CmRNA：1.20±0.39、2.00±0.20、1.04±0.37和0.12±0.16,F=39.546; KGF mRNA：0.97±0.19、2.18±0.61、0.93±0.09和0.21±0.11,F=37.544;均P＜0.01.脂多糖2μg组各基因mRNA的相对表达量高于对照组,而脂多糖10 μg组低于对照组（P均＜0.05）.（4）脂多糖2 μg组KGF蛋白表达较对照组和脂多糖8、10 μg组明显增高（0.60±0.20、0.28±0.12、0.37±0.22和0.24±0.12,F=17.280,P＜0.01）.（5）出生3d时,脂多糖8 μg组仔鼠肺泡发育明显受抑,成熟度较对照组及脂多糖2 μg组低. 结论 大鼠羊膜囊内注射不同剂量脂多糖可诱导不同程度的HCA、脐血管炎和肺炎,组织学炎症程度随脂多糖剂量增高而加重.适度炎症能促进肺成熟而不增加支气管肺发育不良的发生风险,KGF可能起一定作用.

案例教学法在妇产科临床实习教学中的应用观察

目的评估案例教学法妇产科临床实习教学中的应用效果。方法选取2021年7月-2022年7月四川省人民医院妇产科临床实习生30名作为对照组进行常规教学;选取2022年8月-2023年7月的30名妇产科临床实习生作为研究组,实施案例教学法,比较2组实习生的考核成绩、学习积极性、对教学效果的评价。结果研究组病例分析成绩为(89.53±7.28)分、理论成绩为(92.76±4.13)分、操作技能成绩为(94.55±4.28)分,均高于对照组的(81.42±6.25)分、(86.65±4.12)分和(89.39±4.29)分(P<0.001),差异有统计学意义;在学习积极性方面,研究组批判思维评分为(10.72±1.24)分、主动参与评分为(9.37±1.34)分、同学间互动沟通评分为(14.73±2.28)分、知识积累评分为(12.56±1.26)分、自主学习评分为(7.31±1.15)分、总分为(55.56±9.36)分,均高于对照组的(9.46±1.26)分、(8.26±1.33)分、(11.42±2.25)分、(10.22±1.22)分、(6.29±1.18)分、(47.12±9.12)分(P<0.001),差异有统计学意义;在对教学效果的评价方面,研究组的满意率高于对照组(P<0.05),差异有统计学意义。结论案例教学法可以帮助实习生提升学习积极性,满足教学需求,增强实习生病例分析能力,提升考核成绩。