298例2型糖尿病对肺功能的影响

目的分析糖尿病患者的肺功能,研究肺是否为糖尿病损害的靶器官。方法回顾性298名糖尿病患者肺功能(包括通气功能和弥散功能),以一氧化碳弥散量(DLCO)作为肺弥散功能的指标。对照组为年龄性别匹配的300名健康志愿者。分析糖尿病病程及合并高血压对肺功能的影响。结果糖尿病组患者中所有肺通气功能指标均低于对照组,但两组之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。糖尿病患者DLCO平均值为91.4±16.7%,明显低于对照组(104.1±7.9%)(P<0.001)。结论糖尿病患者肺弥散功能受损,提示肺脏是糖尿病慢性病变的靶器官之一。

老年社区获得性肺炎患者治疗失败的原因和危险因素

本研究运用无反应肺炎（NRP）的概念，回顾性分析上海交通大学附属第六人民医院18个月内老年社区获得性肺炎（CAP）患者治疗失败的可能原因和危险因素。1

人FcεRIα亚基细胞外区的原核表达及其和IgE结合的机制

应用两种不同的表达系统对FceR I α亚基的细胞外区进行克隆和表达,表达产物经纯化后用免疫斑点杂交法检测其与IgE结合的能力,探索IgE与其高亲和力受体FceR I α亚基的细胞外区结合的机制。结果两种体系均成功表达出FceRI α亚基的细胞外区,pBAD/gⅢA表达的FceR I α亚基的细胞外区能与IgE结合,而PQE30表达的FeaR I α亚基的细胞外区不能与IgE结合。提示FccR I α亚基的细胞外区已足够和IgE结合,无需β、γ亚基的存在,其所具有的一定的空间构型和二硫键的形成在与IgE结合时是必需的,而糖基化位点在与IgE的结合时是非必需的。

大鼠重组IgE Fc区C_H2-3的原核表达及活性研究

目的 研究大鼠IgE的Fc区CH2 3的生物学活性。方法 构建大鼠IgE的Fc区CH2 3的原核表达质粒pBAD gⅢA CH2 3,并转化入TOP10中 ,阿拉伯糖诱导表达、周质腔抽提、Ni NTA金属鳌合柱纯化获得大鼠IgE的Fc区CH2 3,细胞及动物水平检测蛋白质生物学活性。结果 原核系统表达出大鼠IgE的Fc区CH2 3,它能够阻断OVA激发的RBL 2H3的脱颗粒反应 ,阻断被动皮肤实验。结论 大鼠IgE的Fc区CH2 3能够封闭IgE高亲和力受体 。

肥大细胞的存活和凋亡

肥大细胞不仅参与过敏性炎症反应,而且在许多慢性炎症性疾病和天然免疫中也起着相当的作用。在正常情 况下肥大细胞在组织中保持恒定的数量,在哮喘及慢性炎症的损伤修复阶段可以观察到肥大细胞数量增加。本文就肥大细胞 存活和凋亡的因素调节机制作一综述。

细支气管肺泡癌

细支气管肺泡癌作为肺腺癌的一个亚型,有其独特的生长方式和临床表现,自1976年报道以来,已对其进行了广泛的研究,本文就近年的有关文献作一综述。

大鼠肥大细胞Fas的表达与功能研究

目的 研究大鼠肥大细胞表面Fas的表达情况及其功能。方法 应用RT PCR和免疫印迹法检测Fas的转录和表达 ,并用免疫细胞化学法定位 ;应用annexinⅤ流式细胞仪检测经抗大鼠Fas多克隆抗体诱导的RBL 2H3细胞的凋亡情况。结果 RT PCR扩增出Fas细胞外区 4 74bp片段 ,免疫印迹证实肥大细胞有蛋白表达 ,免疫细胞化学证实肥大细胞膜表面有Fas表达 ,annexinⅤ流式细胞仪检测发现在抗大鼠Fas多克隆抗体的诱导下RBL 2H3出现凋亡。结论 大鼠肥大细胞表面表达Fas,通过激活Fas途径可诱导肥大细胞凋亡。

人FcεRIα亚基的细胞外区的克隆表达和抗血清的制备及功能

为获得有生物活性的FcεRIα亚基细胞外区及多克隆抗体 ,并探知其功能 ,构建FcεRIα亚基的细胞外区的原核表达载体PBAD/gIIIA/FcεRIα,经表达、纯化后用斑点杂交法检测其活性。纯化制品免疫兔子获得抗血清 ,并研究抗血清对FcεRI的作用。结果发现 ,经原核表达出的FcεRIα亚基的细胞外区能与IgE结合 ;获得具有特异性抗FcεRI的抗血清 ,可能抑制嗜碱粒细胞脱颗粒。实验提示原核表达系统能产生有生物学活性的FcεRIα亚基的细胞外区 ,用其制备的抗血清能够识别FcεRIα亚基的细胞外区 ,可能抑制嗜碱粒细胞脱颗粒 ,为研究FcεRIα表达调节。

大鼠IgECH2-3-FasL融合蛋白基因转染对RBL-2H3的影响

目的:探索大鼠IgECH2-3-FasL融合蛋白对大鼠肥大细胞株RBL-2H3诱导凋亡作用和抑制其脱颗粒作用。方法:将本室构建的真核表达质粒pcDNA3.1/IgECH2-3-FasL转染肥大细胞株RBL-2H3,RT-PCR及免疫印迹法鉴定大鼠IgECH2-3-FasL融合蛋白的表达,AnnexinⅤ流式细胞分析融合蛋白对RBL-2H3的凋亡作用,通过组胺释放率的测定,分析融合蛋白对RBL-2H3脱颗粒的阻断作用。结果:大鼠IgECH2-3-FasL以融合蛋白的形式在RBL-2H3上获得表达,并且诱导RBL-2H3凋亡,部分阻断了RBL-2H3的脱颗粒。结论:大鼠IgECH2-3-FasL融合蛋白具有促进肥大细胞凋亡和抑制肥大细胞脱颗粒的双重作用。

^99m锝-聚合白蛋白肺灌注显像诊断肾病综合征伴肺栓塞患儿

目的：探讨^99m锝标记的聚合白蛋白（^99m Tc—MAA）肺灌注扫描在诊断肾病综合征伴肺栓塞患儿中的价值。方法：对2000～2005年33例D-二聚体异常的肾病综合征患儿进行^99mTc-MAA肺灌注显像，并分析相应的胸片、心电图检查结果。对肺灌注显像阳性患儿进行溶栓及抗凝治疗，2～4周后复查肺灌注显像观察疗效。结果：15例患儿（48．4％）出现肺灌注异常。其中1例为左肺动脉干完全阻塞，对15例患者行溶栓及抗凝治疗2周后症状均明显好转，2～4周后复查肺灌注显像发现完全恢复10例，好转3例,2例未复查。结论：肾病综合征患儿的肺栓塞发病率并不低。且临床表现无特异性；^99mTc—MAA肺灌注扫描是无创安全的诊断方法。利于早期发现肺栓塞患儿。

不同途径激素治疗对慢性阻塞性肺疾病急性加重期疗效及炎症反应的影响

目的:探讨雾化激素是否可作为全身激素的替代方法用于慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)的治疗。方法:因AECOPD住院的患者随机分为常规治疗组、雾化激素组、静脉激素组3组,后两组分别在常规治疗组的基础上加用布地奈德雾化或甲基强的松龙静滴,疗程10d。结果:(1)常规治疗组于入组后10dPaO2、FEV1改善(P<0.05)。雾化激素组于入组后24hPaO2改善,3d时FEV1、FVC改善,10d时FEF50改善(P<0.05)。静脉激素组于入组后24hPaO2改善,3d时FEV1、FVC、FEF50改善(P<0.05)。与雾化激素组比,静脉激素组3d时FEV1、FVC改善更明显(P<0.05),10d时两组改善值相似(P>0.05)。(2)治疗后静脉激素组痰IL-6下降幅度高于常规治疗组(P<0.05),与雾化激素组比无差异(P>0.05)。仅静脉激素组痰TNF-α降低(P<0.05)。(3)静脉激素组高血糖发生率(20.0%)高于常规治疗组(P<0.05),与雾化激素组(3.3%)比无差异(P>0.05),雾化激素组与常规治疗组比无差异(P>0.05)。结论:雾化激素治疗AECOPD疗效与静脉激素相似,可作为AECOPD的一种替代治疗方案。

肠内营养在慢性阻塞性肺疾病并呼吸衰竭使用无创通气治疗患者中的应用

目的探讨肠内营养在治疗慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)并呼吸衰竭使用无创通气治疗患者中的应用价值。方法将52例COPD并呼吸衰竭已使用无创通气治疗患者按随机数字表法分为治疗组26例和对照组26例,2组患者均给予抗感染、相关对症治疗,治疗组采取留置鼻胃管方式鼻饲肠内营养液能全力,行肠内营养支持治疗15d。记录2组患者肠内营养治疗前后血液生化指标(包括血红蛋白、血浆总蛋白、白蛋白)、体质量测量指标(包括体质量、肱三头肌皮皱厚度、上臂肌围)、无创通气时间及使用有创机械通气的病例数、ICU住院时间。结果治疗组肠内营养支持治疗15d后,血液生化指标较治疗前显著升高(均P<0.05),体质量测量指标较治疗前显著增加(P<0.05);与对照组比较,治疗组肠内营养支持治疗后血液生化指标和体质量测量指标均明显增加(P<0.05)、无创通气时间及ICU住院时间明显缩短(P<0.05),使用有创机械通气的比率明显下降(P<0.05)。结论对COPD并呼吸衰竭患者,合理的肠内营养支持治疗可以改善机体的营养状态,缩短无创通气及ICU住院时间,降低有创机械通气的比率。

卵清白蛋白特异性T辅助细胞1/T辅助细胞2细胞系的建立

目的体外建立可长期培养的抗原特异性的T辅助细胞(Th)1/Th2克隆及细胞系,并分析其对抗原的反应情况及其产生细胞因子的情况。方法采用卵清白蛋白(OVA)免疫BALB/c小鼠,取淋巴结细胞在体外用同系脾细胞和OVA反复刺激,然后分别用白介素(IL)-2、γ干扰素(IFN-γ)及IL-2I、L-4共同培养,并同时加入同系脾细胞和OVA,进行Th1和Th2克隆的诱导,然后通过有限稀释法进行克隆化培养。对克隆化的细胞用酶联免疫吸附试验(ELISA)和流式细胞仪分别检测其分泌细胞因子的情况及细胞的表面标志。结果各获得2株Th1/Th2细胞系,它们分泌的细胞因子分别为IL-2、IFN-γ和IL-4I、L-5I、L-10等。结论成功建立抗原特异性Th1/Th2细胞系。

肿瘤标记物在特发性肺间质纤维化中的临床意义

目的探讨肿瘤标记物在特发性肺间质纤维化(IPF)中的临床意义。方法分析57例IPF患者及713例其他肺病患者的临床资料。结果 IPF患者血清中多种肿瘤标记物升高,血清CYFRA21-1与DLCO(r=-0.608,P=0.013)、PaO2(r=-0.487,P=0.000)呈显著负相关,与P(A-a)O2呈显著正相关(r=0.433,P=0.002),CA125与PaO2(r=-0.374,P=0.042)、CA19-9与DLCO呈显著负相关(r=-0.518,P=0.016)。结论 IPF患者血清中许多肿瘤标记物升高,其中CYFRA21-1、CA19-9、CA125与疾病严重性相关,CYFRA21-1还与预后相关,是预后不良的标志。

亚砷酸胸腔注射治疗恶性胸腔积液

目的:评价亚砷酸胸腔注射治疗恶性胸腔积液的临床价值。方法:恶性胸腔积液患者68例,均经细胞学和病理学确诊,随机分为治疗组和对照组:在胸膜腔积液充分引流后,治疗组36例,胸膜腔内注射亚砷酸10mg^20mg,每天或隔日1次,连续3次;对照组32例,胸膜腔内注射博莱霉素30mg/m2,7天1次,共1~2次。观察疗效、毒副反应、生活质量。结果:治疗组CR10例(28%),PR16例(44%),总有效率为26/36(72%);对照组CR8例(36%),PR13例(45%),总有效率为21/32(65%),两组有效率差异无显著性(P>0.05)。治疗组注药后胸痛反应明显低于对照组(P<0.05),胃肠道反应、骨髓抑制、发热反应两组间无明显差异(P>0.05)。治疗后两组KPS评分均有增加,治疗前后比较有明显差异(P<0.05)。结论:亚砷酸胸腔注射治疗恶性胸腔积液是一种有效、安全的方法。

表达ROG的重组腺相关病毒载体的构建及高滴度病毒的制备

目的:获得表达小鼠ROG(repressor of GATA 3)基因的重组腺相关病毒载体,制备表达ROG的重组腺相关病毒。方法:设计、合成引物,通过RT PCR法从CTLL 2细胞总RNA中扩增ROG基因,测序确认后,连接于pAAV MCS载体,双酶切、PCR鉴定重组病毒载体;制备高滴度重组腺相关病毒。结果:成功扩增了小鼠ROG基因,构建可表达ROG基因的重组腺相关病毒载体,并获得表达ROG的重组腺相关病毒。结论:本实验获得的小鼠ROG重组腺相关病毒,将为支气管哮喘的基因治疗研究奠定基础。

κ、λ轻链C区基因的克隆与表达

目的 利用pBAd/gⅢA表达载体和大肠杆菌Top 10克隆和表达κ、λ轻链C区基因片段,探索生物工程技术制备小分子抗原的可行性。方法 经RT-PCR从正常人的外周血淋巴细胞mRNA中扩增出κ、λ轻链恒定区基因,限制性双酶切后分别克隆到同样酶切的pBAd/gⅢ A质粒中,转化大肠杆菌。酶切鉴定与PCR法筛选出阳性克隆菌株,经Arabinose诱导表达出κ、λ轻链片段。Ni^(2+)-NTA亲和层析纯化后,以150 mg/mL SDS-PACE与Western blot鉴定纯化产物,并测定蛋白的相对浓度。结果 SDS-PACE与Western blot结果显示,纯化后的产物在M_r 16000处呈致密的单一条带,与克隆基因表达产物的相对分子质量一致,该带经HRP标记的羊抗人IgG Fab抗体证实为抗体片段成分。结论 κ、λ轻链C区基因的pBAd/gⅢA表达在技术上是可行的,该原核系统表达的片段具抗原性,为后续的开发应用打下了基础。