儿童急性髓系白血病中miR-196b表达及预后意义

目的通过检测miR-196b在初诊急性髓系白血病(AML)患儿中的表达,评估miR-196b在儿童AML中的临床意义。方法从标本库中抽取52例初诊AML患儿骨髓,利用q RT-PCR方法检测miR-196b表达水平(结果以2-ΔΔCt表示),并与同期30例非白血病患儿标本对照。结果单核系组(M4、M5)的miR-196b表达水平高于非单核系组(M1、M2、M3、M6、M7)和对照组,而非单核系组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。miR-196b表达水平在t(15;17)组最低,11q23(MLL)组最高,差异有统计学意义(P<0.01)。使用NCCN2013预后分组标准,预后良好组miR-196b表达低于预后不良组,差异有统计学意义(P<0.01)。首疗程缓解组miR-196b表达明显低于首疗程未缓解组,差异有统计学意义(P<0.05)。WBC≥100×109/L组miR-196b表达水平高于WBC<100×109/L组,差异有统计学意义(P<0.01)。miR-196b表达水平与初诊时血小板计数呈显著正相关(r=0.302,P=0.030)。结论 miR-196b表达水平在初诊AML预后不良组明显增高,高水平的miR-196b与低缓解率和较差的预后相关。miR-196b有望成为AML患儿治疗新靶点。

microRNA-155在小儿急性髓性白血病中的差异表达及分析

目的探讨microRNA-155在初诊急性髓性血病(AML)患儿和非白血病对照儿童之间的差异表达情况,分析其意义。方法随机抽取我院标本库中自2012至2013年间收集的19例初诊AML骨髓标本以及20例非白血病对照儿童标本,利用Taqman探针实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测microRNA-155的相对表达水平(结果以2-△△Ct表示)。结果 microRNA-155的表达水平在AML患儿和对照组之间有显著差异(AML患儿组增高)(Z=-4.382;P=0.001);在预后分组中,不良组、中等组和良好组之间microRNA-155的表达水平无明显差异(P>0.05);在早期治疗反应分组中,缓解组和未缓解组之间表达水平无显著差异(P>0.05)。结论与对照组相比,microRNA-155在初诊小儿AML中发生显著的差异高表达现象,过表达的microRNA-155与危险度分组和早期治疗反应、预后等无显著相关性。microRNA-155有希望成为小儿AML的一个早期诊断标记物,但对于预后的意义尚有待于进一步的深入研究。

miR-196b、miR-25在儿童急性髓细胞白血病中的表达及临床意义

目的探讨初诊AML患儿miR-196b、miR-25的表达及其临床意义。方法从骨髓标本库中随机抽取2012-2013年收集的20例初诊AML以及20例非白血病对照标本,利用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-196b、miR-25的相对表达量。结果 miR-196b的相对表达量在患者和对照组间有显著差异(P<0.05);在危险度分组中,miR-196b在高危组、中危组和低危组有显著差异(P<0.05);在WBC<10万/mm3和≥10万/mm3组间,miR-196b表达有显著差异(P<0.05);在一疗程缓解组/未缓解组,miR-25表达有显著差异(P<0.05);在染色体核型预后良好组/预后不良组间,miR-196b表达水平具有显著差异(P<0.05),核型不良组miR-196b表达水平增高;而miR-25呈低表达现象,差异有显著统计学意义(P<0.05)。结论 miR-196b在初诊AML患儿中明显高表达,高表达的miR-196b与不良预后相关;miR-25的表达水平增高提示着良好的早期治疗反应和预后。这些miRNAs有望成为儿童AML早期诊断、治疗及判断预后的独特生物标记物。

解脲脲原体性阴道病中Nugent评分的应用及影响因素

目的探讨将Nugent评分法应用于解脲脲原体性阴道病的意义及可能影响评分的因素。方法收集128例疑似细菌性阴道病患者的阴道分泌物标本,进行解脲脲原体培养和Nugent评分,根据低倍镜下上皮细胞的多少分成2组(Ⅰ组为薄涂片组:涂片镜检每低倍视野>10个且≤30个上皮细胞;Ⅱ组为厚涂片组:涂片镜检每低倍视野>30个上皮细胞),并对2组标本解脲脲原体在Nugent评分等级中的阳性率进行比较。结果 2组阴道分泌物涂片Nugent评分结果差异具有统计学意义(P<0.05),其中评分>6的标本中解脲脲原体阳性率明显高于评分<4的标本。结论阴道分泌物标本采样质量、涂片厚薄均可对Nugent评分产生影响,推荐镜检应作厚涂片。

伴有inv（16）重排的儿童急性髓系白血病的临床与实验研究

目的回顾性分析inv（16）儿童急性髓系白血病（AML）的临床和实验室特点。方法采用红、绿荧光素直接标记的双色断裂点分离的基因探针核心结合因子β（CBFβ）对15例形态学诊断为急性粒-单核细胞白血病伴异常嗜酸细胞（M4EO）或形态学上无M4EO特征但经逆转录一多重巢式聚合酶链反应（多重RT-PCR）证实有CBFβ平滑肌肌球蛋白重链基因11（MYH11）融合基因的AML和核型伴有8三体的M4患儿进行双色荧光原位杂交（D-FISH）检测，并将其结果与细胞形态学、免疫表型、染色体核型和RT-PCR相联系和比较。结果D-ISH揭示除2例伴8．三体的AML外，其余13例AML包括M4EO12例和M4a1例，均提示有CBFβ基因断裂，其平均阳性细胞检出率为55．2％（37．0％-86．0％）。D-FISH阳性病例RT-PCR也检出CBFβ-MYH11融合转录本。免疫表型检测均有髓系抗原CD13和CD33表达，但不伴有淋系抗原表达。G显带核型分析检出10例有inv（16），其中2例同时有8和22三体，1例只伴有22三体。R带分析仅检出5例有inv（16）。本组inv（16）AML的预后总体良好，治疗后完全缓解（CR）率达81．8％，中位生存期11个月，其中8例尚在CR中，但1例同时伴有＋8和＋22者CR后8个月出现复发和核型演变，并迅即死亡。结论inv（16）AML是急性白血病中1种独特亚型，大多数有M4EO特征，总体预后良好，但同时伴有＋8、＋22，特别是同时伴核型演变者其预后似不乐观。在inv（16）的检测方面，G显带技术明显优于R带；D-FISH结合RT-PCR则更为敏感可靠。

伴有11q23／MLL重排的儿童急性髓系白血病的临床及实验室分析

目的分析伴有11q23／混合谱系白血病（mixed lineage leukemia，MLL）基因重排的儿童急性髓系白血病（acute myeloid leukemia，AML）的临床和实验室特点。方法采用骨髓细胞短期培养法和R显带技术对234例初诊AML患儿进行核型分析；采用逆转录一多重巢式聚合酶链反应（多重PCR）技术检测MLL融合基因以及JlⅥLL部分串联重复；采用双色MLL基因探针，对其中2例核型分析具有11q23易位而多重PCR检测肌L融合基因呈阴性的患儿样本进行间期双色荧光原位杂交（dual-colorfluorescenceinsituhybridization，D-FISH）MLL重排检测。结果R显带提示234例初诊AML患儿中，20例（M514例、M44例、M22例）有涉及11q23的易位，包括t（9；11）（p22；q23）12例，t（1；11）（q21；q23）3例，t（6；11）（q27；q23）2例，t（11；19）（q23；p13）、t（5；11）（q31；q23）和t（X；11）（q24；q23）各1例。多重PCR证实其中18例有MLL的融合转录本，有2例阴性，但D-FISH均检出MLL重排；在其余AMI。患儿的样本中检出8例（M54例、M42例、M2和M6各1例）有MLL部分串联重复。本组AML患儿中，11q23／MLL重排的总检出率11．97％（28／234），其中85．7％（24／28）的病例为M4／M5亚型。本组28例伴有11q23／MLL重排患儿，治疗后完全缓解率为53．8％，与对照组（以同期伴有其他异常核型和正常核型的AML—M4／M5患儿共27例作为对照）的90．5％相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。其中2例患儿接受了强烈化疗，分别生存达81和66个月。4例接受了异基因干细胞移植，已分别生存21、20、16和11个月，至今仍在完全缓解中。本组28例伴有11qga／MLL重排患儿的中位生存期为11个月，对照组为15个月，差异无统计学意义（P〉O．05）。结论伴有11q23／MLL重排的AML患儿和单核系白血病高度相关。11q23易位和MLL部分串联重复是相互排斥的，二者预后均较差。采用强烈化疗和异基因于细胞移植有望获得较好疗效。多重PCR联合染色体核型分析和D-FISH技术是对初诊AML患者进行各种MLL重排筛检的有效方法。

新生儿先天畸形396例染色体异常核型及其表型临床特征分析

目的 研究新生儿畸形的主要染色体核型及其临床表型.方法 对2006年1月至2012年5月在苏州大学附属儿童医院就诊的396例先天畸形新生儿按常规方法制备外周血淋巴细胞染色体,G显带并进行核型分析;对各型核型异常患儿的临床表型进行统计分析.结果 1.新生儿396例中检出外周血染色体异常核型159例,异常率为40.2％,其中国内外首次报道3例.2.异常核型中以21-三体（唐氏综合征）最为常见,共130例,占81.8％,其中119例为标准型,10例合并涉及D组或G组的罗伯逊易位,1例伴有性染色体异常.3.其他常见异常核型依次为del（5） （p12-14）4例、18-三体4例、45,XO 4例、inv（9） （p11q12-21）4例、X-三体1例、Rob（13;14）1例、8-三体1例、del（18） （q22）1例等.4.染色体病的临床表型有特殊面容147例（92.5％）、先天性心脏病97例（61.0％）、低出生体质量72例（45.3％）、先天性肛门闭锁13例（8.1％）、多发性畸形11例（6.8％）、肠畸形10例（6.2％）、外生殖器异常9例（5.7％）、猫叫样哭声4例（2.5％）、四肢水肿4例（2.5％）、指趾异常6例（3.6％）、先天性脑发育不良6例（3.6％）、颈蹼5例（3.1％）和唇腭裂3例（1.8％）等.结论 染色体核型异常是导致新生儿先天性疾病的重要因素;特殊面容、先天性心脏病、低出生体质量、多发性畸形是新生儿染色体病的主要临床体征.

566例身材矮小儿童的细胞遗传学分析

目的探讨身材矮小儿童的细胞遗传学病因。方法对566例身材矮小儿童按常规方法制备外周血淋巴细胞染色体，G显带并进行核型分析。对携带常染色体异常的患儿进行家系调查。结果共发现异常核型81例，异常率为14．3％，其中性染色体异常72例（88．9％），常染色体异常8例（9．9％），47，XX，＋mar1例。仅1例常染色体部分三体患儿（46，XY，der（14）t（5；14）（q34；p11）pat）的父亲存在核型异常E46，XY，t（5；14）（q34；p11）]。结论性染色体异常是儿童身材矮小的重要因素，应引起临床医师的高度重视。

核因子阳性儿童急性髓细胞性白血病临床特征及预后因素分析

目的 探讨核因子（即CBF,包含AML1/ETO和CBF/MYH11）阳性儿童急性髓细胞白血病（AML）临床特点及影响其预后的相关因素.方法 回顾性分析苏州大学附属儿童医院2007年6月至2012年6月初诊并至少进行1个疗程以上化疗的非急性早幼粒细胞白血病（APL）和Down综合征的85例AML病例,分为低危、中危、高危3组,了解3组患儿生存预后,分别分析性别、FAB分型、初诊白细胞数、CBF是否阳性、染色体、诱导缓解疗程数、中枢神经系统白血病（CNSL）、复发、是否行造血干细胞移植（HSCT）等因素对预后影响,Kaplan-Meier生存曲线分析其中40例CBF阳性AML患儿的5年总生存（OS）率和无事件生存（EFS）率,并以CBF阴性者为对照.结果 低、中、高危3组AML 5年OS率分别为（66.5±11.6）％、（54.5±14.4）％、（42.7±7.2）％,差异有统计学意义（x2=6.085,P=0.048）;5年EFS率分别为（62.2±14.0）％、（54.5±14.4）％、（41.9±7.3）％,差异无统计学意义（x2=1.060,P=2.589）.CBF阳性分布为低危组22例,中危组3例,高危组15例;40例CBF阳性者存活23例,45例CBF阴性者存活24例,2组5年OS率分别为（51.8±8.8）％、（50.6±7.6）％,差异无统计学意义.复发病例共10例,其中CBF阳性患儿6例（死亡3例）,阴性患儿4例（死亡2例）.HSCT患儿共20例,CBF阳性者5例（死亡1例）,阴性者15例（死亡3例）.COX回归模型多因素分析显示,性别、诱导缓解化疗疗程数和HSCT对各组AML预后均有统计学意义,而FAB分型、初诊白细胞计数及CNSL则对预后无明显统计学意义（P均＞0.05）.结论单纯化疗对核因子阳性或阴性AML患儿的5年EFS率差异无统计学意义,而HSCT可明显改善CBF阴性及整体AML患儿的5年OS率.

伴有t（8；21）变异易位的急性髓系白血病患儿二例遗传学研究

目的报道2例分别伴有t（8；20）（q22；q13）和t（1；8；21）（q32；q22；q22）的t（8；21）变异易位的M：型急性髓系白血病（AML—M2）。方法骨髓细胞短期培养法制备染色体标本，应用反带和吉姆萨显带技术进行核型分析；双色双融合AML1-ETO探针进行间期及中期双色荧光原位杂交（D．FISH）检测AML1-ETO融合信号；多重巢式反转录一聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测AML1-ETO融合基因转录本。结果例1核型为45，x，-y，t（8；20）（q22；q13）[12]／46，XY[3]，例2核型为46，xx，t（1；8；21）（q32；q22；q22）[18]／46，XX[2]；间期和中期FISH证实了AML1-ETO融合基因和变异易位的存在；多重巢式RT—PCR检测到AML1-ETO融合基因转录本。结论t（8；20）（q22；q13）和t（1；8；21）（q32；q22；q22）实质上都是t（8；21）的变异型易位；核型分析联合D—FISH、多重巢式RT—PCR对确定伴有变异型t（8；21）易位的AML患者的性质和预后是重要的。