烫伤后大鼠肝糖皮质激素受体减少的机理——肾上腺部分切除动物的研究

部分去除肾上腺的大鼠烫伤后,血清糖皮质激素无明显升高,而肝胞液糖皮质激素受体(GR)却有升高的趋势,其中烫伤后6 h组和对照组的相差有非常显著的意义。进一步用打点杂交进行的研究表明,部分去腺大鼠烫伤后6h肝GR mRNA也有增加。这些结果提示,完整动物烫伤时肝胞液GR的减少依赖于血中糖皮质激素的升高。

糖皮质激素对大鼠血清磷脂酶A_2的张力性抑制

采用滴定法测定了大鼠血清及肝、肺匀浆的磷脂酶A_2(PLA_2)活性,发现去肾上腺大鼠血清PLA_2活力为75.13±7.94U,而对照组大鼠为58.88±15.33U,两组间有显著差异。给去肾上腺大鼠注射氢化考的松(5mg/100g体重)后2h,血清PLA_2活力为55.09±8.63U,和对照组大鼠无显著差异。对照和去肾上腺大鼠的肝、肺匀浆的PLA_2活力也无显著差异。这些结果说明,糖皮质激素对大鼠血清PLA_2有张力性抑制作用。鉴于许多炎性疾病过程中均有血清PLA_2活力的升高,而这些疾病用糠皮质激素治疗有效,本实验结果提示,在这些病人存在着糖皮质激素的相对不足。

糖皮质激素受体的结构和功能

近年来已克隆出人、大鼠和小鼠糖皮质激素受体的cDNA,并利用定点突变等技术分析了受体结构和功能的关系。还利用小鼠乳腺瘤病毒、人金属硫蛋白II_A基因等详细研究了受体和DNA的相互作用,对糖皮质激素的诱导蛋白也进行了深入研究。

全杜仲胶囊对自发性高血压大鼠肠壁微血流灌注的影响

目的 探讨全杜仲胶囊(QDZJN)和松脂醇二葡萄糖苷(PDG)对自发性高血压大鼠(SHRs)肠壁微循环血流灌注及其频谱特征的影响。方法 将SHRs随机分为SHR,SHR+QDZJN,SHR+PDG(L),SHR+PDG (M)和SHR+PDG (H)组。对照组为Wistar-kyoto(WKY)鼠。各组分别接受QDZJN或纯净水(对照组和SHR组)灌胃2个月。手术暴露大鼠小肠,激光多普勒血流探测仪(LDF)和血流成像仪(LDPI)检测并比较各组大鼠肠壁微血流灌注水平。小波分析比较各组肠壁内皮源性频段幅值。结果 与对照组相比,SHRs肠壁血流灌注水平显著降低(P<0.001)。QDZJN和各剂量PDG治疗2个月后,SHRs肠壁血流灌注水平显著升高(P<0.001)。SHRs组肠壁微血流灌注一氧化氮(NO)依赖和非依赖性内皮细胞源频段振幅均显著低于对照组(P<0.01)。QDZJN和PDG治疗可显著提高内皮细胞源频段幅值(NO依赖:P<0.0001;NO非依赖:P<0.01)。结论 QDZJN和PDG治疗2个月可显著改善SHRs肠壁的微血流动力学和内皮功能障碍。

转化医学:从转化研究到靶向治疗与个体化医学

生命科学在基因组学、干细胞和微电子技术等领域已取得了突破性进展,然而如何诊断、治疗包括癌症在内的许多重要疾病仍然是医学实践中亟待解决的难题。因此,"转化医学"这一新的概念应运而生,开展和加强"转化研究"已逐渐成为共识。值得注意的是,转化研究不仅包括采用各种新方法、新技术研究疾病的发生机制及诊断和治疗,也强调从临床实践中提出问题,研究和解决与疾病诊治有关的重要课题。转化医学的另一个重要内容是个体化治疗,即根据疾病在分子水平的改变而采用特异的靶向药物治疗。目前能进行个体化靶向治疗的案例仍屈指可数,但随着对许多疾病机制的深入了解,新的诊断技术和生物标记的发现,以及更多靶向药物的开发,个体化治疗有望在不久的将来,从特例成为临床实践中的常规。

甾体激素的调节基因表达作用

由于对甾体激素受体的结构、结构与功能关系及HRE进行了许多研究,人们对甾体激素受体和HRE及多种转录因子相互作用调节基因表达的过程在分子水平上有了更深入的了解,因而对甾体激素调节基因表达的机制有了进一步的认识,本文综述了这方面的研究进展。

人类疾病的基因诊断

基因工程技术给生命科学带来了革命性的变化。它在识别DNA突变和区别不同种族DNA方面具有高灵敏度和高分辨力的特点,这使得用基因工程技术诊断人类遗传性和感染性疾病得到了迅速发展。有人把这种诊断方法称为基因诊断(gene diagnosis)。本文将简述目前基因诊断的主要方法和原理。

种植骨髓间充质干细胞脑血管支架的性能评价

背景:一般认为对支架表面进行修饰,尤其是种植细胞,可能会加速或导致其内皮化,避免支架内血栓形成而引起再狭窄的发生。目的:寻找骨髓间充质干细胞种植血管支架的最佳条件。方法:将1×106,1×107,1×108,1×109 L-1的第3代大鼠骨髓间充质干细胞分别接种至不锈钢血管支架制备细胞-支架复合物,接种48 h后电镜观察细胞形态变化。取SD大鼠160只,20只为正常对照组,其余140只制作缺血性脑卒中模型,造模8周后随机分为7组,分别植入不锈钢支架、高分子材料支架及不同浓度细胞-支架复合物,以不植入任何材料的为模型对照。植入后8周,蛋白免疫印迹技术检测植入支架上细胞的血管内皮生长因子表达,流式细胞仪检测各组大鼠血小板活化。结果与结论:种植的干细胞均能在不锈钢支架上贴壁生长,当细胞浓度为1×107 L-1时,上皮样细胞完整覆盖支架,细胞及细胞器形态正常。缺血性脑卒中模型实验中,1×107 L-1细胞-支架组细胞生长良好,在血管内环境诱导下具有良好的内皮化趋势,并且可显著抑制血小板活化。表明当细胞种植浓度为1×107 L-1时制备的血管支架通畅,具有良好的生物学效应。

蛋白质泛素化系统

泛素化是单个或多个泛素在泛素激活酶、泛素结合酶及泛素蛋白质连接酶的作用下共价修饰底物蛋白质的过程。近年来的研究发现,许多含环指的蛋白质本身是蛋白质泛素连接酶,或是多亚基连接酶中的重要成分。由于细胞内可表达200以上的环指蛋白,并且多亚基连接酶可利用同一环指蛋白但不同的底物识别蛋白。这些研究极大地丰富了对泛素化系统酶的认识,也使进一步调节和干预连接酶与底物的相互作用成为可能。新近的研究还发现。泛素化不仅可导致蛋白质的降解,还可直接影响蛋白质的活性和细胞内定位,是调节细胞内蛋白质功能和水平的主要机制之一。

糖皮质激素受体mRNA的检测

用盐酸胍法和苯酚法从大鼠肝脏分离出了完整的RNA,通过oligo(dT)纤维素亲和层析从中纯化mRNA。然后用GRcDNA探针和mRNA进行Northern印迹杂交和斑点印迹杂交,放射自显影后用光密度计对糖皮质激素受体mRNA进行定量,获得了重复性较好的结果,本方法为从基因转录水平上研究GR的变化打下了必要的基础。

维生素D受体在骨动态平衡中的调节作用

维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)是调控骨发育、代谢和动态平衡的重要分子,其作用机制涉及遗传基因、信号通路、激素及旁分泌因子等多方面,而VDR信号通路则在其中起到重要的调控作用。虽然针对VDR研制的药物已对骨质疏松疾病的治疗表现出较好效果,但近年来研究发现,通过饮食调节钙和磷的摄取可以纠正VDR缺陷小鼠的骨质损伤表现,该发现对VDR在正常生理状态下骨动态平衡以及骨代谢中的重要性提出了异议。最近有研究提出,VDR的表达主要存在于松质骨未成熟成骨细胞,在其他骨细胞中的表达和功能有待进一步验证。因此,VDR在不同类型骨细胞中的表达及其在骨动态平衡中的作用机制还有待更进一步的研究,有关机理的阐明将为我们深入了解骨质疏松的发病机制奠定基础,从而指导临床相关疾病的治疗。

血清类黏蛋白的功能和临床意义

类黏蛋白(ORM)属于急性时相反应蛋白,机体许多组织和细胞均能合成,但主要的合成器官是肝脏。ORM能够调节参与天然免疫和获得性免疫的多种细胞,平衡机体的能量代谢,并具有抗疲劳作用。许多组织损伤均可诱导细胞及血中的ORM升高。在感染和创伤的过程中,血中ORM水平在炎症的多个阶段均持续升高。因此,监测血中ORM水平能够与C反应蛋白(CRP)互补,反映炎症性疾病的持续、进展和消退情况,从而为精准治疗提供新的线索。文章从ORM的结构特征、生物功能以及检测ORM的临床意义等方面对ORM进行综合性的阐述。

杜仲纯中药制剂和松脂醇二葡萄糖苷对自发性高血压大鼠肾脏微循环血流灌注及其频谱特征的影响

目的:探讨杜仲纯胶囊(EU)和松脂醇二葡萄糖苷(PDG)对自发性高血压大鼠(SHRs)肾脏微循环血流灌注及其频谱特征的影响。方法:将30只SHRs随机分为SHR组,SHR+EU组(6.00g/kg EU灌胃),SHR+PDG(L)组(8.75mg/kg PDG灌胃),SHR+PDG(M)组(17.50mg/kg PDG灌胃)和SHR+PDG(H)组(35.00mg/kg PDG灌胃),每组各6只。6只WKYs大鼠为Control组。各组进行灌胃给药2个月。手术暴露大鼠肾脏,利用激光多普勒血流探测仪和血流成像仪检测并比较各组大鼠肾脏微血流灌注水平和血流成像情况。采用小波变换比较各组肾脏内皮源性频段幅值。结果:与Control组相比,SHR组肾脏血流灌注水平显著降低(P<0.01)。治疗2个月后,与SHR组相比,SHR+EU组和SHR+PDG各剂量组肾脏血流灌注水平显著升高(P均<0.01)。与Control组相比,SHR组肾脏微血流灌注内皮细胞源频段振幅显著降低(P<0.01)。与SHR组比较,SHR+PDG(M)组、SHR+PDG(H)组中NO依赖和非依赖性内皮细胞源频段幅值显著提高(P<0.01)。SHR+EU组NO依赖性内皮细胞源频段幅值显著提高(P<0.01)。结论:SHRs肾脏存在微循环血流动力学异常和内皮功能障碍,EU和PDG治疗2个月后可显著改善SHRs肾脏的微血流动力学和内皮功能。

T细胞介导的精准肿瘤免疫治疗

以嵌合抗原受体-T细胞(chimeric antigen receptor-T cell,CAR-T)治疗和卡控点(check point)阻断为代表的一系列研究和临床应用表明,自体或移植的特异T细胞可以清除已发生的肿瘤,标志着肿瘤免疫治疗进入了新的阶段。近期研究发现,借助于新一代测序、蛋白质组学及生物信息技术,可以鉴别出肿瘤细胞通过MHC提呈的突变特异性的新抗原,这些抗原或抗原组合具有高度的个体和肿瘤特异性。实验表明,新抗原能通过主动免疫在动物模型中产生抗肿瘤的作用,也可作为过继转移抗原特异性T细胞、TCR转染T细胞和CAR-T所识别的目标。这些重要进展为进一步开展肿瘤临床的精准免疫治疗奠定了理论和实践基础。

脂皮质素的结构和功能

引言甾体和非甾体抗炎药物在临床上有着极其广泛的作用,但在很长一段时间内,人们对其作用机制所知甚少。70年代的一系列研究发现,花生四烯酸的代射产物前列腺素(PGs)、白三烯(LTs)

基因转录的顺式调节

借助于缺失分析,定点突变技术,人们在DNA分子上识别出了启动子、增强子和负调节DNA片段三种类型的顺式调节片段,并通过DNA酶印迹法和凝胶迁移率改变等方法证明,顺式调节DNA片段是通过和特异的结合蛋白相互作用而产生调节基因转录效应的。近年来人们已纯化和克隆了一些顺式调节DNA片段结合蛋白,对其结构和功能的关系也进行了深入的研究。本文介绍了这方面的一些研究进展。

靶向内质网应激作为肿瘤治疗的新策略

内质网应激是细胞应对蛋白质突变和表达水平异常的防御性反应,包括未折叠蛋白反应(UPR)、内质网相关蛋白质降解(ERAD)和自噬体形成等多个组成部分。许多研究指出,肿瘤细胞依赖高水平的内质网应激反应以维持生存和高速生长,干扰UPR和ERAD可抑制肿瘤细胞的生长。同时,癌细胞发生抗药的关键机制是产生新的突变,这些突变可能会进一步诱导UPR和ERAD等,使抗药癌细胞对内质网应激的抑制剂更加敏感。因此,面对后基因组时代发现的肿瘤细胞突变的多样性、异质性和持续性,靶向细胞对突变的反应——内质网应激,是值得关注和研究的新抗肿瘤策略。